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2019年 第36卷 第04期    刊出日期：2019-08-28

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研究报告

高糖高脂饲料诱导的小型猪肥胖模型

相 磊，陈 华， 赵德明

2019, 36(04):  1. 

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目的 探讨高脂高糖饲料对巴马小型猪脂肪分布与血液生化指标的影响。方法 巴马小型猪14头，实验组8头，为本实验室培育的2型糖尿病易感小型猪，饲喂高脂高糖饲料30周；对照组6头饲喂正常饲料。30周后测定体型系数、CT扫描脂肪含量、采集血液检测生化指标，比较实验组与对照组的差异。结果 高脂高糖饲料饲喂30周后实验组动物与对照组动物在体质量、体质指数(BMI)、脂肪总含量差异显著(P<0.05)，内脏脂肪含量差异极显著(P<0.01)；血液生化指标中胰岛素、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、甘油三脂与对照组相比差异极为显著(P<0.01)，低密脂蛋白胆固醇与对照组相比差异显著(P<0.05)。此外，实验组巴马小型猪血清蛋白、肌酸酐与对照组差异显著(P<0.05)；尿酸、尿素与对照组差异极显著(P<0.01)，显示实验组小型猪呈现肾损伤。结论 高脂高糖饮食能够引起巴马小型猪脂肪堆积，内脏脂肪堆积尤为明显，血液生化指标呈高脂血症伴有肾功能的损伤。

精神依赖药物成瘾模型建立及小脑Bax基因的表达

谢明仁，俞发荣

2019, 36(04):  6. 

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目的 研究精神依赖药物(海洛因)对成瘾大鼠小脑Bax基因表达的影响。方法 采用剂量递增法建立成瘾大鼠模型，用酶联免疫吸附法(ELISA)检测小脑细胞Bax的基因的表达。结果 连续给大鼠注射海洛因7 d后，大鼠出现明显的戒断症状；小脑细胞Bax、Caspase-3、Caspase-9水平比对照组分别升高了88.21%、94.21%、87.24%，与对照组比有显著性差异(P<0.01)。结论 精神依赖药物(海洛因)对脑组织细胞的损伤作用可能通过诱导小脑Bax基因表达，激活caspase实现。

不同时期绿色荧光裸鼠雌鼠血浆及组织中性激素水平变化

尤金炜， 董 敏，刘 彪，赵志刚， 王丽娴，马 畅，张旭亮， 刘 捷， 恽时锋

2019, 36(04):  10. 

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相关文章 | 计量指标

目的 了解不同妊娠期、泌乳期绿色荧光(Green Fluorescence Protein，简称GFP)裸鼠雌鼠血浆中雌激素、孕激素、泌乳素及各组织中泌乳素及泌乳素受体mRNA水平变化。方法 通过电化学发光法测定血浆中激素的水平，通过荧光定量PCR法测定泌乳素及泌乳素受体mRNA相对表达量。结果 GFP裸鼠雌鼠妊娠期内雌激素和泌乳素水平不断下降、孕激素的水平先升后缓慢下降、组织中泌乳素mRNA水平较低、泌乳素受体水平较高；而在泌乳期内雌激素、孕激素水平较稳定、组织中泌乳素mRNA水平较高，泌乳素受体水平较低。结论 不同时期GFP裸鼠雌鼠体内性激素的水平不同，参与裸鼠妊娠调控过程，为解决雌鼠不孕、易流产等问题提供了基础参考值和内分泌水平的解决思路。

微卫星与生化位点法对BALB/c小鼠遗传检测比较分析

覃辉艳，陈华凤，王 芳，杨 慧，李 彬， 张洁宏

2019, 36(04):  14. 

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相关文章 | 计量指标

目的 应用微卫星DNA标记检测BALB/c小鼠的遗传质量，并与现行国家标准生化标记法进行比较，探讨其在近交系小鼠遗传监测中的应用，为建立微卫星DNA检测方法奠定基础。方法 采用20个微卫星基因位点和毛细管电泳技术对BALB/c小鼠进行遗传质量检测，同时采用现行国家标准生化标记法进行检测比较分析。结果 各样品20个微卫星基因位点DNA片段大小相同，没有新的等位基因出现；生化标记检测结果亦显示Akp1等14个生化标记基因均为纯合，个体间生化标记表型均一致，根据国家标准符合品系特征。微卫星DNA标记检测结果与生化标记检测结果一致。结论 微卫星DNA标记可准确可靠、方便快捷地检测近交系小鼠遗传质量，本研究所选的20个微卫星基因位点可用于BALB/c小鼠遗传质量监测。

兔膝骨关节炎模型的建立及评价

欧慧瑜， 李瑞鹏， 邵珍怡， 郭秋平

2019, 36(04):  18. 

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目的 通过兔软骨缺损制备兔膝骨关节炎模型并进行评价。方法 将动物按体质量和性别随机分成3组：假手术组，模型组和阳性对照氨基葡萄糖组，每组12只。造模4周后开始灌胃给药，每天1次，连续给药4周。末次给药后，将动物处死，ELISA试剂盒检测血清及关节液中IL-1β和TNF-α水平，对关节软骨和滑膜进行HE染色，并对关节软骨进行Mankin’s评分以评价其损伤情况。结果 与假手术组相比，模型组血清、关节液中IL-1β、TNF-α水平明显升高，而给予氨基葡萄糖可降低血清、关节液中IL-1β、TNF-α水平。HE染色见模型组软骨结构改变、缺损，滑膜有炎细胞浸润；软骨评分明显高于假手术组。给予氨基葡萄糖可以减轻软骨缺损，减少滑膜炎细胞浸润，降低软骨评分。结论 关节软骨钻孔可建立兔膝骨关节炎模型，反映其主要特征，并能通过给予阳性对照药减轻损伤和炎症反应。该模型可用于治疗关节炎药物的评价和筛选。

DHEA对小鼠超排卵和卵母细胞质量的影响

何 岩，于 洋，董婉维， 周生来， 王 惟， 杨 葳， 郑志红

2019, 36(04):  22. 

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目的 研究脱氢表雄酮(DHEA)对C57BL/6J雌鼠超排卵效果和卵母细胞质量的影响及其机制。方法 3周龄C57BL/6J雌鼠30只随机分为3组，分别为对照组、低剂量处理组(2 mg/kg·d-1)和高剂量处理组(5 mg/kg·d-1)。用DHEA灌胃1周，再经超排卵后分别进行体外受精和收集卵丘细胞。提取卵丘细胞RNA进行qRT-PCR检测与胚胎质量相关基因Grem1、Has2、Ptgs1、Ptgs2和Vcan的mRNA水平以及凋亡相关基因Caspase3和Bcl2l10的mRNA水平。结果 经过DHEA处理的雌鼠超排卵后，体外受精(IVF)显示实验组异型卵比例下降。实验组卵丘细胞中与胚胎质量相关基因Has2，Ptsg1和Vcan转录水平与对照组相比上调，而Germ1和Ptgs2的mRNA水平下调。Caspase3的mRNA水平下调，Bcl2l10的mRNA水平上调。结论 经过DHEA处理后可以通过抑制卵丘细胞凋亡，提高卵母细胞的质量。

四氯化碳诱导近交系C57BL/6小鼠建立肝纤维化模型

刘甦苏， 霍桂桃， 王辰飞，范昌发

2019, 36(04):  28. 

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相关文章 | 计量指标

目的 比较不同剂量四氯化碳诱导近交系C57BL/6小鼠肝纤维化模型的效果，以建立稳定的肝纤维化模型。方法 选择5周龄的C57BL/6近交系小鼠，分别腹腔注射给予高、中、低剂量的四氯化碳诱导肝纤维化，实验结束后取血及肝脏组织，检测血浆丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)的水平及肝脏病理变化。结果 近交系C57BL/6小鼠药物诱导后，各剂量组动物均能存活到8周，高剂量组存活率仅为20%远低于中、低组；血清转氨酶含量升高程度、肝组织病理改变存在剂量时间效应关系。病理分析表明，各剂量组均可见肝细胞变性/坏死、中央静脉周围/汇管区混合细胞浸润及肝脏纤维化。结论 10%四氯化碳给药8周后能诱导近交系C57BL/6小鼠形成较稳定的肝纤维小鼠模型，为后续肝纤维化机制研究及药物筛选工作奠定了基础。

高脂血症食蟹猴模型的建立及分析

杨永立，李 锋，汪云龙，刘发琴，周国春，高仕平，徐子辰，徐永德

2019, 36(04):  31. 

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相关文章 | 计量指标

目的 建立高脂血症食蟹猴模型。方法 采用高脂膳食饲料诱导食蟹猴，分别在4、8、12、18个月检测血清总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、甘油三脂(TG)指标，对其血脂指标的变化趋势进行分析。结果 模型组在饲喂高脂膳食饲料4个月后，TC、HDL、LDL与实验前相比差异极显著(P<0.01)；TG在饲喂高脂膳食饲料8个月后明显升高，与实验前相比差异极显著(P<0.01)；造模后，高脂饲料组与正常对照组比较，TC、HDL、LDL、TG均高于对照组，差异极显著(P<0.01)。结论 在本实验中，模型组TC、HDL、LDL、TG均呈现递增趋势，尤其是TC、LDL明显高于食蟹猴正常参考值水平，说明模型组食蟹猴具有高胆固醇和高、低密度脂蛋白血症的特征，初步建立了食蟹猴高脂血症动物模型。

|Ⅰ型干扰素受体(Ifnar)基因敲除小鼠的繁育及基因型鉴定

陈亚坤， 孙 婧，蒋亚君， 王昕昉， 刘晓宇， 戴连攀，卢选成， 李晓燕

2019, 36(04):  35. 

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目的 对Ifnar基因敲除小鼠繁育及鉴定方法进行分析，为多种病毒研究提供理想的动物模型。方法 将引进的纯合Ifnar基因敲除小鼠，以1雄2雌的合笼方式进行饲养繁殖，从仔鼠中提取鼠尾基因组DNA，PCR法扩增目的基因片段，琼脂糖凝胶电泳进行基因型结果判定。结果 Ifnar基因敲除小鼠繁育成功，获得了一批基因敲除鼠，使用PCR方法成功鉴定出Ifnar基因敲除纯合子小鼠。

过氧化氢酶-2能力验证样品的制备及其 均一性和稳定性测定

魏 杰，王 洪， 贾松华， 岳秉飞

2019, 36(04):  39. 

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目的 制备a、b两个型别的过氧化氢酶-2能力验证样品，并对其均匀性和稳定性进行测定评价。方法 均匀性测定均按照4%比例随机抽样，冻融稳定性以4次冻融为测定终点；时间-温度稳定性以4、20、37 ℃这3个温度为观测纵坐标，1、2、3、7、15、30 d为观测横坐标，在每个坐标交点，a型、b型分别随机抽取2瓶，测定不同条件下各型别样品的稳定性。结果 a型、b型样品在均匀性测定中，均表现为各型别的清晰条带；4次冻融后仍能稳定存在，且30 d内在4、20 ℃和37 ℃三种条件下均能稳定存在。结论 过氧化氢酶-2样品均匀性和稳定性良好，适于能力验证样品的制备发放需求。

病毒性心肌炎与人类主要组织相容性复合体 多态性的相关性研究

刘嫚嫚，都鹏飞

2019, 36(04):  44. 

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目的 探索主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex,MHC)等位基因与病毒性心肌炎(viral myocarditis,VMC)的关联性，以阐明VMC的免疫遗传学特征，并进一步探寻VMC发病中的保护基因，为可能的基因治疗提供靶基因探索新途径。方法 创建急性病毒性心肌炎的小鼠模型，通过血清炎症因子IFN-γ水平、心肌组织病理改变及心肌组织MHC基因表达水平的不同反映出病毒性心肌炎与MHC多态性之间有无相关性。结果 在32只病毒组小鼠中，MudoEb 5检测阳性的共有24只(基因频率37.5%)，MudoEb 7检测阳性的有9只(基因频率14.1%)，对照组中检测出MudoEb5阳性的有 6只(基因频率9.4%)，MudoEb7阳性共2只(基因频率3.1%)，两种等位基因的表达与对照组相比差异均有统计学意义(MudoEb 5 λ2=20.33 P=0.00 OR=13,MudoEb 7，λ2=5.38 P=0.02 OR=5.7)。结论 MudoEb5、MudoEb7基因型表达水平与COXB3的感染小鼠的病理改变存在正相关，并根据统计学分析，两种等位基因型可能为VMC小鼠的易感基因，其中MudoEb5基因型与VMC的病理相关密切程度更高。

膨化对实验犬粮营养成分影响的研究

李慧贤，常银莲， 卓志勇， 张海峰， 史 良

2019, 36(04):  51. 

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目的 犬是人类最早驯化的动物之一，20世纪40年代，犬开始作为实验动物用于研究，在生物医学中主要用于实验外科学、基础医学、药理、毒理学以及一些疾病研究中，对生物医学的发展具有重要意义。为实验犬提供稳定配方的标准化饲料，是提高实验科学性的重要环节。目前，实验犬粮的生产主要采用膨化工艺。本文则主要研究在特定膨化条件下，实验犬粮蛋白质、脂肪、氨基酸、维生素以及微量元素等指标检测值与配方值的差异情况。方法 依据《中国饲料成分及营养价值表》(第28版)提供的数据，计算实验犬粮配方中各营养成分配方值，然后将成品实验犬粮送至实验室检测实际值，将二者进行对比。结果 实验犬粮经过膨化后，脂肪损失6%，组氨酸、赖氨酸、蛋氨酸分别损失8%、6%、2%，维生素E、维生素B2、烟酸、胆碱、维生素B6损失率分别为29%、65%、46%、1%、81%。结论 在本次研究中设定的膨化参数条件下，实验犬粮中各营养素损失如结果所示。因膨化参数不同，对营养素的影响不同，因此，建议同行可根据实际生产情况适当调整日粮配方。

小动物micro-CT与超声及主动脉插管术评价 左心室功能的比较研究

刘春蕾，李 晨 ，李 鑫 ，田亚平， 何昆仑

2019, 36(04):  55. 

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相关文章 | 计量指标

目的 研究micro-CT、主动脉插管术与超声心动图测量左心室功能参数的一致性与相关性，评价micro-CT评估左心室功能的科研应用价值。方法 利用micro-CT、主动脉插管术、超声对10对正常及心衰大鼠进行心功能检测，应用心功能分析软件测量左心室功能参数：收缩末期容积、舒张末期容积及射血分数，将micro-CT结果与、主动脉插管术、超声心动图结果比较。结果 10对大鼠检查均获得成果，micro-CT、主动脉插管术与超声心动图测量左心室功能参数具有良好的相关性。结论 micro-CT可以用来评价左心室功能，是准确测量心室功能的可行性方案。

CMU/1和CMU/2近交系长爪沙鼠脏器系数的比较

马兰芝， 李 迎， 尚世臣，黄 斌，尚玉璞， 王冬平， 陈振文

2019, 36(04):  60. 

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相关文章 | 计量指标

目的 对近交系CMU/1和CMU/2长爪沙鼠的体质量和主要脏器质量进行测定, 探索与建立长爪沙鼠主要脏器的生物学指标体系，为动物实验提供必要参数。方法 选择3～ 4 月龄近交系长爪沙鼠，分别称体质量与脏器质量, 进行统计学分析。结果 CMU/1和CMU/2近交系长爪沙鼠的肺脏器系数差异显著，其它差异不显著；Kendall和谐系数(W)接近1，其主要器官整体发育协调性较好；直线回归方程， CMU/1的胸腺P<0.05，CMU/2的肝、肺P<0.05，两样本间有线性关系。其中CMU/1的肝、脾、肾上腺、卵巢、胰腺和CMU/2的胸腺与体质量呈正相关。结论 CMU/1及CMU/2近交系长爪沙鼠脏器系数中肺脏器系数差异显著,基因型对近交系长爪沙鼠脏器系数无明显影响。

西方膳食对载脂蛋白E敲除小鼠的影响

杨 林，黎桂玲， 刘 科，代路路， 李金凤， 朱叶萌， 邝少松

2019, 36(04):  63. 

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目的 研究西方膳食和标准饲料对载脂蛋白E基因敲除小鼠(ApoE-/-)血液学及病理学的影响。方法 用西方膳食饲料和标准饲料对3月龄ApoE-/-小鼠进行喂养，并于喂养3个月、4个月和5个月时，采集小鼠外周血和主动脉弓。用全自动血液分析仪检测其血脂水平，并通过切片及染色，观察其动脉粥样硬化斑块的形成情况。结果 血脂方面，西方膳食及标准饲料喂养的小鼠血清中总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)比对照组C57小鼠明显升高，除了经4个月喂养的小鼠HDL-C外，其他各月龄血脂指标西方膳食喂养组都显著高于标准饲料组；在主动脉弓病理切片及染色方面，相同月龄下，西方膳食组小鼠主动脉斑块明显并且AS发病率明显升高。结论 西方膳食饲料及标准饲料均可诱导ApoE-/-小鼠表现AS病症，西方膳食饲料的诱导效果更明显。

研究简报

抽取小鼠脑脊液简便易行的新方法

桂 青，陈碧玉，刘翰琛，黄念来，陈贞磊，林炤华，周常文

2019, 36(04):  68. 

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目的 建立抽取小鼠脑脊液的一种简单易行，材料低廉，生存率与成功率高的方法，为小鼠脑脊液的相关研究提供参考。方法 自制微量吸管。将小鼠头部固定与身体大约成120°角，对小鼠皮下组织和肌肉用镊子进行钝性分离，找到小鼠白色硬脊膜，进管抵达小脑延髓池，缓慢抽取小鼠脑脊液并将管退出，最后缝合小鼠伤口。结果成功获得小鼠脑脊液2～5 μL，小鼠存活。讨论 目前，大多文献记载的是大鼠脑脊液的抽取方法或较为复杂的小鼠脑脊液抽取方法，而此种针对小鼠的脑脊液抽取方法不但简单易行，对仪器要求低，成功率高而且小鼠生存率高，可以反复抽取。

独立通风笼盒系统内传热传质分析

张建平， 傅江南

2019, 36(04):  71. 

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目的 为了有效控制独立通风笼盒系统(individual ventilated cages, IVC)内环境的舒适性，保证笼盒内实验动物的生存和健康，对笼盒内的温度、湿度及氨浓度进行测试，并对笼盒内传热传质机理进行分析，同时为实验动物生存环境(密闭建筑空间、设备)控制提供参考。方法 小鼠75只，按数量递增顺序随机分为5组，饲养于同一架IVC设备内，分别对笼盒内的温度、湿度和氨浓度进行连续7 d的测试。结果 随着饲养天数的增加，笼盒内和房间内的温度差变化基本一致，相对湿度差和氨浓度差逐渐增大；同时笼盒内、外的氨浓度差同动物数量和时间均相关，有显著差异(P<0.05)，即动物只数越多，时间越长，氨浓度差越大。结论 IVC笼盒内温度受设施内温度的影响较大；相对湿度主要与送风空气相对湿度和换气次数有关；氨浓度与换气次数和动物只数有关。

实验动物设施运行中“三废”管理

卢 静，孟 霞，陈柏安

2019, 36(04):  77. 

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相关文章 | 计量指标

实验动物设施是指用于实验动物生产和实验的建筑物及设备的总和。实验动物设施运行过程中产生的废物、废水和废气(简称“三废”)等会污染环境，然而目前对“三废”进行合理有效管理的机制尚不完善。本文将对实验动物设施“三废”管理中涉及的问题进行探讨，以期能为建立合理的“三废”管理机制提供可行方案。

研究进展

猫遗传多态性的研究进展

贾松华，岳秉飞

2019, 36(04):  81. 

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实验用猫自19世纪末用于科学研究，现已广泛用于医药研发等各个领域，并作为人类遗传性疾病和感染性疾病的动物模型越来越受重视。猫的质量(尤其是遗传质量)对研究结果的准确性，重复性以及科学性有重要的影响。定期开展遗传质量检测，可有效避免实验用猫的种质退化、遗传漂移，减少实验结果误差等。随着生化标记和DNA分子标记的出现，为了解猫的遗传结构提供了更为简便可靠的方法。本文主要就生化标记和DNA分子标记在研究猫的遗传结构和多态性中的研究现状以及存在的问题进行了探讨。

研究报告

重建人类免疫系统的人源化小鼠模型及其在血液系统疾病研究中的应用

龙 杰， 杨志刚

2019, 36(04):  86. 

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相关文章 | 计量指标

动物模型在人类疾病发病机制的研究及药理学实验研究治疗中发挥重要作用。小鼠是目前主要的实验动物，但其与人类背景存在差异，不能完全模拟人类免疫系统及疾病状态。研究人员通过将人类细胞或组织植入免疫缺陷小鼠体内，可构建免疫系统人源化小鼠模型及人源化小鼠疾病模型。人源化小鼠可通过优化人源造血干细胞来源等条件，可得到免疫系统人源化程度较高的小鼠模型。目前，GVHD人源化小鼠模型及白血病人源化小鼠模型已经应用在研究疾病发病机制及开发新型临床治疗药物等方面。