当期目录

2019年 第36卷 第06期    刊出日期：2019-10-28

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研究报告

脑栓通胶囊对动脉粥样硬化小鼠血脂水平的影响

刘婷婷， 孙芳玲， 赵学庆， 郑文荣， 田欣， 祝自新， 郭德玉， 王文

2019, 36(06):  1. 

摘要 ( 156 )   PDF (1268KB) ( 94 )  

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目的 观察脑栓通胶囊对动脉粥样硬化小鼠血脂水平的影响,探讨脑栓通胶囊治疗脑卒中的机制。方法 6周龄雄性Apo E -/- 小鼠,采用高脂饮食法建立动脉粥样硬化模型,造模成功后随机分为模型组、脑栓通胶囊低剂量组、脑栓通胶囊高剂量组。低剂量组给予脑栓通胶囊0. 5 g/kg体质量,高剂量组给予脑栓通胶囊1. 0 g/kg体质量,对照组给予等量的蒸馏水。连续给药12周后腹主动脉取血,分离血清。酶偶联比色法测定血清总胆固醇（total cholesterol,TC）、甘油三酯（triglyceride,TG）、低密度脂蛋白胆固醇（low density lipoprotein-cholesterol,LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（high density lipoprotein-cholesterol,HDL-C）水平。结果 与模型组相比,脑栓通胶囊低剂量组和高剂量组均显著降低血清中TC、TG和LDL-C的含量,但对HDL-C含量无影响。结论 脑栓通胶囊可以调节血脂水平,其治疗脑卒中的作用机制很可能与该途径有关。

实验动物雪貂阿留申病病毒核酸检测方法的建立

赵 鹏， 郭 智， 佟 巍， 向志光

2019, 36(06):  5. 

摘要 ( 76 )   PDF (1311KB) ( 64 )  

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目的 建立阿留申病病毒PCR检测方法,以用于实验动物雪貂阿留申病病毒的检测。方法 参考Genebank中阿留申病病毒核酸VP2基因序列设计一对引物,建立PCR检测方法,进行特异性、敏感性测试,并对实验雪貂粪便样品进行筛查。结果 测序结果显示,使用设计的引物可特异性地扩增获得阿留申病病毒的VP2中531 bp基因片段;在常见实验动物DNA病毒,小鼠多瘤病毒、小鼠细小病毒、犬细小病毒、疱疹病毒、鼠痘病毒、仙台病毒、小鼠腺病毒中均未扩增出目的条带;以目的片段核酸为模板测试该方法敏感性,检测下限达到90. 6 copy/μL。应用该方法对39份雪貂粪便样品进行检测,未检测出阿留申病病毒核酸阳性。结论 本研究建立的方法具备一定的特异性和敏感性,可作为实验动物雪貂中阿留申病病毒感染病原筛查的方法。

无菌大鼠深二度烫伤感染金黄色葡萄球菌机体炎性反应的研究

李鸿雁， 颜克松， 马东升， 战大伟， 孙兆增

2019, 36(06):  9. 

摘要 ( 129 )   PDF (9614KB) ( 33 )  

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目的 为探究无菌大鼠深二度烫伤创面感染金黄色葡萄球菌后机体的炎性反应,试验应用无菌大鼠及SPF级大鼠分别建立深二度烫伤模型和烫伤后金黄色葡萄球菌感染模型,分析愈合过程、炎性反应及病理变化。方法20只6周龄雌性Wistar无菌大鼠,在超净工作台内采用恒温恒压烫伤仪94℃作用8 s造成大鼠深二度烫伤,随机分为两组,一组伤口感染浓度为1×1~08CFU/m L金黄色葡萄球菌0. 5 m L,一组不做处理,创面保持无菌状态; 20只6周龄雌性SPF级Wistar大鼠,在相同条件下烫伤,随机分为两组,一组伤口感染浓度为1×10~8CFU/m L金黄色葡萄球菌0. 5 m L,一组不做处理。分别观察4组大鼠的伤口结痂时间、脱痂时间和愈合时间,并在烫伤前(0 h),烫伤后24 h、48 h、3d、5 d、7d、10 d、14 d时取血清,检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1α(IL-1α)和表皮生长因子受体(EGFR)的变化;烫伤后24 h、3d、7 d、10 d伤口处皮肤HE染色,观察病理变化。结果 感染金黄色葡萄球菌无菌大鼠伤口脱痂及愈合时间显著短于其他3组(P<0. 05);感染金黄色葡萄球菌SPF级大鼠,结痂、脱痂及愈合时间显著长于其他3组(P<0. 05);感染金黄色葡萄球菌SPF级烫伤大鼠组由于双重损伤使血清炎性因子TNF-α、IL-1α水平升高,且在烫伤后72 h显著高于其他3组(P<0. 05);无菌大鼠由于对烫伤及金黄色葡萄球菌刺激反应激烈,烫伤后血清TNF-α、IL-1α和EGFR水平迅速升高,且在烫伤24 h时显著高于2组SPF大鼠(P<0. 05),在烫伤48 h时血清EGFR水平显高于两组SPF大鼠(P<0. 05)。病理显示,感染金黄色葡萄球菌SPF烫伤大鼠伤口处新生血管及肉芽组织生成时间均长于其他3组;感染金黄色葡萄球菌无菌烫伤大鼠伤口处新生血管及肉芽组织生成时间均短于其他3组。结论 无菌大鼠由于其免疫系统处于休眠状态,受到烫伤和金黄色葡萄球菌的双重刺激,迅速激活其全身免疫系统,加快了伤口愈合; SPF烫伤大鼠感染金黄色葡萄球菌后产生的多种免疫逃避分子加重了机体的炎性反应,延缓了伤口愈合。

不同小鼠肝炎病毒对ELISA方法检测其血清抗体的影响

吴朋朋，张彩勤 ， 赵 勇， 白 冰， 苗海港， 师长宏

2019, 36(06):  15. 

摘要 ( 133 )   PDF (5652KB) ( 123 )  

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目的 建立小鼠肝炎病毒（Mouse Hepatitis Virus,MHV）血清抗体ELISA检测方法,用于本地区MHV的日常监测,以便对SPF小鼠感染状况及时作出判断。方法 选取3种MHV毒株MHV1、MHV-JHM和MHV-A59,通过L929细胞扩增培养获得纯化浓缩抗原并筛选适合包被抗原类型;免疫BALB/C小鼠,获得高效价免疫阳性血清;优化ELISA反应体系建立规范化的ELISA试剂盒并用于临床小鼠血清样品的检测。结果 筛选出适合本地区的MHV包被抗原类型为MHV1,建立了病毒扩增及浓缩纯化方法,制备的MHV抗血清达到同批次大量高滴度的水平,可作为标准化质控血清。包被抗原、待检血清和酶结合物最佳工作浓度分别为4. 0μg/m L (10 -7. 73 /0. 1 m L TCID50)、1∶40和1∶4 000稀释;批次内和批次间平均变异系数分别为5. 13%和5. 57%;检测灵敏度为1∶4 000稀释;与小鼠仙台病毒（SV）、小鼠肺炎病毒（PVM）、呼肠孤病毒III型（Reo3）、小鼠细小病毒（MVM）和鼠痘病毒（Ect）阳性血清均无交叉反应。稳定性试验相对偏差小于10%。对165份血清样品进行检测,阳性血清相符率97. 37%（37/38）,阴性血清相符率92. 19%（118/127）。结论 本研究建立的ELISA方法检测小鼠血清MHV抗体具有较高的特异性、敏感性和结果可重复性,可以用于本地区MHV日常病原学监测,以便对小鼠感染状况作出准确判断。

长期精神紧张建立抑郁症模型

龚宇， 徐腾鹤， 钱婷婷， 罗颖， 陈浩， 赵丽君， 吴晓光

2019, 36(06):  23. 

摘要 ( 107 )   PDF (1068KB) ( 44 )  

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目的 采用长期精神紧张刺激建立动物抑郁症模型。方法 选用C57BL/6 J雄性4周龄小鼠17只,体质量(11. 05±1. 65) g,随机分为对照组、长期精神紧张刺激(LTMS)组。LTMS组单笼饲养并连续21 d每天给予猫惊吓3 h和剥夺睡眠12 h。实验组通过测定摄食量变化和高架十字迷宫实验、旷场实验、强迫游泳行为学变化来判断建模是否成功。结果 与对照组相比,LTMS组摄食量明显降低(P<0. 01),强迫游泳不动时间显著延长(P<0. 01)。旷场试验中,LTMS组小鼠穿越格数和直立次数均明显少于对照组,差异具有极显著性(P<0. 01)。高架十字迷宫实验中,LTMS组小鼠闭合臂停留时间明显延长,差异具有极显著性(P<0. 01);进入开臂次数比例减少,差异具有显著性(P<0. 05)。结论 长期精神紧张模型表现出行为绝望、活动能力下降、兴趣丧失、焦虑与抑郁症临床表现相似的症状,可作为抑郁症模型。

Hartley豚鼠SPF级核心种群生长曲线与血液生理生化指标测定

武卫国， 范涛， 王洪， 王学文， 刘佐民， 柳全明

2019, 36(06):  27. 

摘要 ( 126 )   PDF (1356KB) ( 33 )  

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目的 测定SPF级Hartley豚鼠核心群的生长体质量,血液生理、生化指标,并与清洁级豚鼠各指标进行比较。方法 选择种群中雌、雄个体各10只,通过称重,记录0～8周龄体质量;豚鼠采血,应用全自动血细胞计数仪与全自动血液生化分析仪检测各项生理、生化指标。结果 在SPF级豚鼠血液生理指标中,白细胞计数(WBC)、中性粒细胞计数(NEUT)、嗜酸性粒细胞计数(EOS) 3项指标,在雌性与雄性间有显著性差异(P0. 05)外,其他指标均存在极显著差异(P<0. 01)。结论 绘制了SPF级豚鼠生长曲线。SPF级豚鼠血液学指标在性别间有差异,与清洁级豚鼠相比存在显著差异。

小鼠巨细胞病毒荧光定量PCR检测方法的建立及应用

李晓波， 付瑞， 王吉， 王淑菁， 王莎莎， 李威， 秦骁， 黄宗文， 贺争鸣， 岳秉飞

2019, 36(06):  33. 

摘要 ( 115 )   PDF (5675KB) ( 68 )  

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目的 建立小鼠巨细胞病毒(Mouse Cytomegalovirus,MCMV)荧光定量PCR方法并对其进行初步应用。方法 选取NCBI发表的MCMV Smith株DNA polymerase基因保守序列设计引物探针,建立MCMV的荧光定量PCR方法,对方法的特异性、敏感性、重复性及稳定性进行验证,并应用该方法检测掺入MCMV的小鼠血液样品及2018年度送检的409份小鼠血液样本。结果 建立的MCMV荧光定量PCR方法标准曲线Slope为-3. 418,R2值为0. 999,扩增效率为96. 137%,可定量检测到的MCMV最低含量为47 copies/μL。以大鼠巨细胞病毒,猴巨细胞病毒,人单纯疱疹病毒,伪狂犬病毒及猫疱疹病毒I型为模板均无扩增曲线,特异性良好。方法组内和组间变异系数分别为0. 39%～0. 68%和0. 48%～1. 01%,重复性和稳定性好。可检测到掺入小鼠血液样品中MCMV病毒的最大稀释度为1∶1000(100. 75 TCID50/0. 1 m L),409份小鼠血液样品经检测均为阴性。结论 建立的小鼠巨细胞病毒荧光定量PCR方法有很好的敏感性、特异性及稳定性,可有效地检测小鼠中MCMV,为实验小鼠MCMV的监测及相关标准的补充完善提供了技术参考。

博来霉素和内毒素诱导两种品系小鼠肺纤维化模型的比较研究

何文涓， 吴小瑜， 袁志坚， 黄寅

2019, 36(06):  39. 

摘要 ( 104 )   PDF (10046KB) ( 29 )  

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目的 通过比较博来霉素和内毒素诱导ICR、C57BL/6两个品系小鼠的肺纤维化程度,从而建立合适的小鼠肺纤维化模型。方法 分别将ICR、C57BL/6两个品系小鼠随机分为对照组、博来霉素组、内毒素组。博来霉素组向气管注射博来霉素(5 mg/kg体质量),内毒素组尾静脉注射内毒素(40 EU/kg体质量),对照组气管注射等量生理盐水。两个品系的对照组、博来霉素组、内毒素组分别于造模后第7、14、28天各处死8只,观察小鼠一般情况,测量小鼠肺系数;采用HE染色观察肺组织病理学变化; ELISA法检测肺组织中羟脯氨酸的含量。结果 与对照组相比,两个品系的博来霉素组和内毒素组的肺系数、肺组织羟脯氨酸含量均不同程度增加,有显著性差异(P0. 05)。结论 C57BL/6小鼠对博来霉素和内毒素更敏感。博来霉素、内毒素均能够制备小鼠急性肺损伤肺纤维化模型。

黄芪多糖对繁殖猕猴生长性能、血液生理生化指标及腹泻发病率的影响

陈丽雄， 王俊斌， 李艳艳， 徐鸿界， 禹文海， 马进， 杨凤梅， 段素琴， 杨亚平， 刘权， 和占龙， 赵远

2019, 36(06):  44. 

摘要 ( 81 )   PDF (1445KB) ( 81 )  

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目的 通过饲喂黄芪多糖对繁殖猕猴生长性能、血液生理生化及腹泻发病率的影响,研究黄芪多糖在实验动物饲养管理中的应用。方法 选取不同年龄阶段的繁殖猕猴60只在饲料中添加0. 1%的黄芪多糖,每日饲喂一次。实验前、实验1月后、实验3月后分别采血测生理和生化指标、称体质量、统计腹泻发病率。结果 随着黄芪多糖添加时间的延长,体质量都成上升的趋势,血常规中白细胞、淋巴细胞数也呈上升趋势。血液生化中谷草转氨酶、谷丙转氨酶、总胆红素、尿素、总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、镁、C 3 、C 4 、IgA、IgG都呈上升趋势,血糖呈下降趋势;随着黄芪多糖添加时间的延长,繁殖猕猴腹泻的数量也呈下降的趋势。结论 黄芪多糖能明显提高繁殖猕猴的饲料利用率、有效调节免疫力、对繁殖猕猴的腹泻也有很好的预防和治疗作用。

研究简报

5周龄至109周龄Wistar大鼠体质量的正常参考值及增长速度

陈巍， 侯粉霞， 杨慧芳

2019, 36(06):  50. 

摘要 ( 291 )   PDF (2150KB) ( 109 )  

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目的 了解Wistar大鼠在其大部分生命过程中的体质量及其增长速度。方法 慢性毒性与致癌合并试验中的对照组,采用4周龄SPF级Wistar大鼠,雌、雄性大鼠各60只,试验前观察1周,常规饲料喂饲;试验期为104周,在试验的前13周内,每周测量一次体质量,之后每4周测量一次体质量。结果 Wistar大鼠自5周龄至109周龄生命过程中共37个时点的体质量及其增长速度:(1)随着鼠龄的增长,大鼠体质量持续增长,雄性和雌性分别在94周龄和102周龄达到体质量最大值,分别为(755. 7±103. 4) g和(515. 4±96. 6) g,之后体质量逐渐减低。(2)体质量增长速度随鼠龄的增长呈逐渐减慢的趋势,雄性和雌性分别在第66周龄和第82周龄首次出现负增长,负增长的幅度最终变得更大。结论 Wistar大鼠5周龄至109周龄共37个时点的体质量正常参考值及其增长速度,可对已有的Wistar大鼠体质量正常值的相关文献资料进行进一步完善和补充,为Wistar大鼠体质量正常值的实验室间比较或相关技术人员提供一些有用的参考。

香烟烟雾染毒改良方法的应用

蒋新格， 赵晨阳， 樊兴， 陈子龙， 党如意， 陈玲

2019, 36(06):  55. 

摘要 ( 101 )   PDF (1390KB) ( 82 )  

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目的 探讨烟雾染毒的改良方法对小鼠存活率的影响。方法 在普通烟雾染毒方法的基础上,改进制作一种可向染毒箱底部通入空气以增加氧气量,并能同时监测温度的染毒装置。将实验对象昆明系小鼠分为对照组(在普通染毒装置中,不染毒),染毒1组(普通染毒方法),染毒2组(改进的染毒方法)进行实验,应用统计软件SPSS20. 0分析比较各组之间小鼠的生存率、染毒装置内氧浓度以及总悬浮颗粒浓度变化。结果 共选取160只昆明系小鼠,并随机分为对照组40只,染毒1组60只,染毒2组60只,均雌雄各半。实验结果发现,染毒2组小鼠的存活率显著高于染毒1组,差异具有统计学意义(x~2=7. 647 P=0. 02<0. 05),染毒1组装置内的氧浓度明显低于染毒2组氧浓度,且染毒2组装置内的氧浓度波动小,差异具有统计学意义(F=5. 260,P=0. 045<0. 05)。染毒1组和染毒2组装置内的TSP浓度差异没有统计学意义,说明改进的烟雾染毒装置不影响毒物的剂量和染毒过程。结论 改良的烟雾染毒装置会使实验动物在非药物因素作用下的死亡率降低,且不影响实验染毒过程。

研究进展

应激性抑郁动物模型评价方法研究进展

曲书苑， 庞宝兴

2019, 36(06):  59. 

摘要 ( 102 )   PDF (1375KB) ( 43 )  

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抑郁症是一种常见的心境障碍,可由各种原因引起,以显著而持久的心境低落为主要临床特征,且心境低落与其处境不相称,严重者可出现自杀念头和行为。抑郁动物模型的研究是抑郁症的机制研究和临床药物开发的基础。其中应激性模型由于模拟抑郁症发病的诱因较充分且造模方法简便,已成为最常用的抑郁动物模型,广泛用于抑郁症的基础研究。本文综述了评价应激性抑郁动物模型的主要方法,为抑郁动物模型造模提供了参考依据。

研究报告

实验动物饲料营养特点及质量影响因素

史良， 张海峰

2019, 36(06):  69. 

摘要 ( 120 )   PDF (1285KB) ( 156 )  

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可重复性是生物科学研究的最基本的原则,其中的关键是控制除研究变量之外的所有变量。为了满足这一要求,实验动物的微生物学和遗传学已取得了很大进展,而实验动物的健康状况和环境因素(例如饲料、垫料、光照周期、噪声、湿度、温度等)也是可以影响研究成果的重要部分,其中实验动物饲料是影响实验动物生长繁殖、疾病和对实验操作的反应的重要环境因素,也是保证动物实验顺利进行和实验结果准确可靠的前提条件。本文简述了实验动物饲料营养的特点,并对影响实验动物饲料质量的主要因素作一概述。