:目的 分析单酯型生物碱类对慢性心力衰竭大鼠心肌细胞的保护作用及对 PI3K / AKT 通路的影响。 方法将 100 只大鼠随机分为空白组(A 组) 、模型组(B 组) 、低剂量组( C 组) 、中剂量组(D 组) 和高剂量组( E 组) ,每组20 只。 C、D、E 组在慢性心力衰竭模型建模成功后给予附子浓缩液灌胃,剂量分别为 2. 79、5. 57、11. 14 g / kg。 灌胃6 周后检测各组大鼠病理组织学变化、超声心动图指标、心肌细胞凋亡率,心肌组织促凋亡蛋白( Bax) 、B 淋巴细胞瘤-2(Bcl-2) 、半胱氨酸蛋白酶 8( Caspase-8) 表达量,心肌细胞自噬蛋白、BNP、AI、PO2、IL-6、TNF-α 水平及 PI3K /AKT 通路蛋白表达量。 结果 B ~ E 组超声心动图指标室间隔收缩末期厚度( IVSs) 、室间隔舒张末期厚度( IVSd) 、左心室后壁收缩末期厚度( LVPWs) 、左心室后壁舒张末期厚度( LVPWd) 。 心肌细胞凋亡率,Bax、Caspase-8 表达量,IL-6、TNF-α 水平,心肌细胞自噬蛋白 LC3-Ⅱ、LC3-Ⅱ / Ⅰ,BNP 及 AI 水平均高于 A 组,LVEF、Bcl-2 表达量、PO2水平、心肌细胞自噬蛋白 P62 及 p-PI3K、p-AKT 表达量均低于 A 组(P<0. 05) ;C ~ E 组 IVSs、IVSd、LVPWs、LVPWd、心肌细胞凋亡率及 Bax、Caspase-8 表达量,IL-6、TNF-α 水平、自噬蛋白 LC3-Ⅱ、LC3-Ⅱ / Ⅰ、BNP 及 AI 水平低于 B组,LVEF、Bcl-2 表达量、PO2 水平、心肌细胞自噬蛋白 P62 及 p-PI3K、p-AKT 表达量高于 B 组( P< 0. 05) ;随着附子浓缩液剂量的增加,IVSs、IVSd、LVPWs、LVPWd、心肌细胞凋亡率、Bax、Caspase-8 表达,IL-6、TNF-α 水平、心肌细胞自噬蛋白 LC3-Ⅱ、LC3-Ⅱ / Ⅰ、BNP 及 AI 水平降低,LVEF 及 Bcl-2 表达、PO2 水平、心肌细胞自噬蛋白 P62 及 pPI3K、p-AKT 表达量升高(P<0. 05) 。 结论 单酯型生物碱类通过上调 p-PI3K、p-AKT 蛋白表达量,激活 PI3K / AKT通路,缓解心力衰竭恶性进展,且呈剂量依赖性。

目的 探讨一种安全、有效的肠道准备方法以提高动物模型结直肠准备质量。 方法 将 20 头行肠镜治疗的实验猪分成 A、B 两组,A 组仅进行禁食,不做其他处理,记录结果;15 d 后 B 组行长透明帽联合注水肠镜对猪肠道粪便进行冲洗,清理,进而进行肠道准备。 分别记录各组 20 例(共 40 例)肠道清洁程度,以及内镜医师对肠道准备的满意程度。 结果 长透明帽联合注水肠镜对猪肠道粪便进行冲洗,肠道清洁效果满意,手术视野清晰,满足实验要求。 结论 长透明帽联合注水肠镜在实验猪肠道手术准备中具有较高的应用价值。

目的 探讨不同造模方法对皮肤损伤的影响及不同时间段创面皮肤愈合的病理学评价。 方法 实验选用SD 大鼠 78 只,雌雄各半,分为正常对照组(14 只) 、烧伤模型组(24 只) 、烫伤模型组(24 只)和全切皮肤模型组( 16只) 。 其中烫伤模型组采用台式超级控温烫伤仪烫伤皮肤组织,并于创面滴入混合菌,建立浅 II 度烫伤合并伤口感染模型。 烧伤模型组采用自制烧伤锥形瓶烧烫伤皮肤组织,并于创面滴入混合菌,建立浅 II 度烧伤合并伤口感染模型。 全切皮肤模型组采用无菌手术刀对皮肤进行面积为 3 cm×3 cm 切除,切除不伤及肌肉,建立皮肤全切模型。正常对照组分别于 D1、3、4、5、7、10、14 取 2 只动物进行解剖取材,烧伤和烫伤+细菌感染模型组分别于 D1、3、5、7、10、14 各取 4 只动物进行解剖取材,全切皮肤模型于 D4、7、10、14 各取 4 只动物进行解剖取材,对创面皮肤组织进行病理学检查。 结果 大体观察发现,不同模型造模初期皮肤均出现不同程度创面损伤;中期皮肤损伤部位周围均出现红肿、水泡等局部反应;末期皮肤愈合较为完整。 显微镜观察发现,各模型初中期皮肤主要表现为表皮变性坏死,角化不全,颗粒层、棘细胞层及基底细胞层缺乏,真皮不同程度炎性细胞浸润;末期皮肤表皮各层结构较为完整,真皮层可见大量新生血管,成纤维细胞聚集及少量炎症细胞浸润。 结论 通过对造模不同阶段皮肤组织的病理学评价,较为全面的分析了不同造模方法对皮肤的损伤与愈合情况,为后续药物药效学研究奠定了基础。

目的 筛选出均匀分布在大鼠染色体上的单核苷酸多态性( SNP) 位点,建立常用近交系大鼠遗传质量检测及品系鉴别方法。 方法 在文献中获得 SNP 共 141 个,利用 Ensembl 数据库中获取的信息筛选出在 BN、F344、GK、LEW、SHR 和 WKY 6 种大鼠品系中呈现多态性的 SNP 位点,并从中优化出均匀分布各染色体且包含品系特异性SNP 的最佳位点组合。 通过 PCR 扩增技术和 Sanger 测序方法对组合位点用于常用近交系大鼠遗传质量检测和品系鉴别的效果进行验证。 结果 优化出了在各品系内表现单态性、品系间呈多态性的 40 个 SNP 标记。 其中包含可以用于品系鉴别的特异性位点:4 个 BN 大鼠特异性位点,3 个 F344 大鼠特异性位点,2 个 GK 大鼠特异性位点,2个 LEW 大鼠特异性位点和 1 个 SHR 大鼠特异性位点。 分别利用 BN、F344、LEW、SHR 和 WKY 大鼠的 DNA 混合样本对优化出的 40 个位点进行验证,结果与网站数据一致。 结论 成功建立了常用近交系大鼠遗传质量检测及品系鉴别的 SNP 组合。

目的 基于 Th1 / Th2 表达探究特异性免疫对哮喘小鼠肺泡灌洗液炎性反应的影响。 方法 选择 40 只小鼠分为对照组、模型组、SIT 组及地塞米松组,每组 10 只。 除了对照组外均建立哮喘小鼠模型,激发阶段后 SIT 组注射 1 mg 的 OVA,地塞米松组灌胃 0. 075 mg / mL 溶液,其余大鼠注射等体积的 PBS 溶液。 采用肺功能仪检测气道反应;经瑞氏-吉姆萨染色观察肺泡灌洗液(BALF)炎性细胞;酶联免疫吸附法( ELISA) 检测 BALF 中细胞因子 IL-13、IL-4、IL-5 及 INF-γ;HE 染色观察肺组织形态;PAS 染色观察肺气道上皮杯状细胞活性;流式细胞术检测肺组织中Th1 及 Th2 占比。 结果 特异性免疫可显著降低模型小鼠气道高反应性、减少 BALF 内炎性细胞活性,并可通过升高 Th1 降低 Th2 而抑制哮喘发生发展。 结论 特异性免疫可缓解哮喘小鼠气道高反应性,抑制炎性反应,并通过改善气道上皮杯状细胞增生而缓解通气,可能与调节 Th1 / Th2 表达相关。

目的 测定不同途径进行恩诺沙星给药,对豚鼠体质量变化和血液生理生化指标的影响。 方法 分别测定不同途径进行恩诺沙星给药对豚鼠体质量、血液生理指标和血液生化指标的影响,利用统计学方法分析组间差异。结果 高剂量恩诺沙星饮水给药会显著影响豚鼠的饮水量,高剂量恩诺沙星和低剂量恩诺沙星饮水给药都会显著影响豚鼠的体质量增长。 在血液生理指标方面,不同给药处理组中的白细胞计数 WBC、单核细胞绝对值 MON、中性粒细胞绝对值 GRAN、平均红细胞血红蛋白浓度 MCHC、红细胞分布宽度变异系数 RDW-CV、血小板分布宽度PDW 等 6 项指标与对照组相比具有统计学意义(P<0. 05) 。 在血液生化指标方面,与对照组相比,不同给药处理组中的钙 Ca、丙氨酸氨基转移酶 ALT、碱性磷酸酶 ALP、γ-谷氨酰转肽酶 γ-GT、三酰甘油 TG 等 5 项指标具有统计学意义。 结论 不同途径恩诺沙星给药对豚鼠多项生物学指标影响的测定,为豚鼠的科学用药提供了基础数据。

目的 探讨三种饮用水对 NIH 小鼠血液指标的影响。 方法 将 54 只 NIH 小鼠随机分为 3 组,分别饮用高压灭菌水、高压酸化水和无菌水袋水(膜过滤水) ,在实验 30、60 和 90 d 分别取血进行血常规和血生化检测,并取肝组织进行组织病理学检查,探讨三种饮用水对小鼠健康状态的影响。 结果 60 d 水袋水组白蛋白( ALB) 显著高于高压灭菌水组(P<0. 05) ,酸化水组总蛋白( TP)极显著高于高压灭菌水组( P< 0. 01) ,其他生化和血常规指标组间无统计学意义(P>0. 05) ,肝组织病理学结果显示各组小鼠肝组织未发现病变,为正常肝组织。 结论 三种饮用水对NIH 小鼠健康状态无明显影响

目的 比较两种脱水程序和 5 种浸蜡时间对小鼠肝、肠道组织石蜡切片质量的影响。 方法 以 BALB / c 小鼠肝和肠道组织为材料,按照两种不同的脱水程序(程序一、程序二)和 5 种不同的浸蜡程序 (浸蜡总时间为 90、120、150、180 和 210 min) 制备石蜡切片,比较其组织切片和 HE 染色的效果。 结果 脱水程序一制作的石蜡切片容易碎裂,皱褶明显,组织中央易见空洞;脱水程序二制作的石蜡切片完整无空洞,石蜡切片经 HE 染色后镜下观察结构完整清晰。 相较于其他 4 种浸蜡程序,浸蜡总时间为 150 min 时制作的石蜡切片染色后观察最完整清晰。 结论使用脱水程序二及浸蜡总时间为 150 min 时所制作的石蜡切片质量有所提升,易于镜下观察,推荐作为小鼠肝和肠道组织石蜡切片的优化程序

目的 构建异源二聚体 CK-MB 重组蛋白并制备其特异性基因工程抗体,以此作为 CK-MB 定量检测试剂盒的诊断原料,从而辅助临床急性心肌梗死的早期诊断,提高诊断的准确性。 方法 通过共表达载体获取异源二聚体 CK-MB 并进行动物免疫,从而获取小鼠浆细胞;进一步使用单细胞光导系统分离抗原特异性小鼠单个 B 细胞,并通过单细胞 PCR 获取抗体轻重链的可变区基因序列后构建基因工程抗体。 基于初步的功能验证筛选出候选抗体,并进一步通过棋盘滴定法探究最佳的配对方案,并利用双抗夹心 ELISA 原理初步组装 CK-MB 定量检测试剂盒。 结果 成功获取 CK-MB 免疫原;通过单 B 细胞光导技术筛选出 CK-MB 抗原特异性小鼠单个浆细胞并制备出2 株小鼠源基因工程抗体,且均具有识别天然 CK-MB 的能力;经由双抗夹心 ELISA 法筛选出两种配对方案,其拟合曲线的 R2 均大于 0. 99。 结论 成功制备出靶向 CK-MB 的小鼠源基因工程抗体,经由 ELISA 初步验证抗体的特异性和亲和力,为进一步开发高特异性、高灵敏度的 CK-MB 新型定量检测试剂盒奠定了坚实基础。

目的 分析科学研究中偶遇患病大动物所引发的科学思考及相关处理方法,为类似状况的处理提供实践参考。 方法 在腹腔镜猪肝移植相关技术的研究中,供肝动物猪经耳缘静脉常规麻醉后,出现呼吸心脏骤停。 尸体解剖后发现腹腔囊性 包 块 和 大 量 腹 水 以 及 心 包 腔 积 液,对 包 块 囊 壁 细 胞 进 行 培 养 及 囊 壁 组 织 进 行 病 理 检 查。结果 囊壁细胞培养呈葡萄串状悬浮生长,涂片染色表明所培养细胞主要为炎性细胞。 HE 染色显示囊壁主要由肉芽组织及纤维组织构成,为慢性炎性增生所致。 结论 偶遇此例患病动物可得到以下启示:①大动物实验前需进行常规动物健康检查;②科研人员应具备高度的传染病防护敏感性;③科研人员在实验过程中需保持科研敏感性;④实验过程中应保留全面的病理标本;⑤养殖场质检人员须提升对动物的健康状况监测。

目的 研究广西巴马小型猪仰卧位的固定方法以便于动物实验的开展。 方法 选择行胸腔器官获取的广西巴马小型猪 12 头,接受全身麻醉后采用专用的固定装置进行仰卧位固定。 结果 12 头广西巴马小型猪在手术中体位得到很好的保持,未发生侧翻、移位等现象。 结论 采用专用的固定装置对广西巴马小型猪进行仰卧位固定是一种简单有效的方法

随着社会发展和人们生活水平的提高,宠物饲养逐渐成为人们精神层面的重要补充。 然而,当前存在着许多宠主缺乏科学的养宠观念,导致宠物错过及时治疗的机会,可能发展成为恶性肿瘤,甚至不治而亡。 鉴于肿瘤发生时间和进展过程的不确定性,早期筛查和治疗显得至关重要。 本文基于对近年来常见犬肿瘤的多种检测技术进行综合论述,进一步分析了这些技术的应用及其优缺点。 这对于在临床上实现犬肿瘤的有针对性、准确和迅速诊断具有重要意义,有望为快速、准确的犬肿瘤诊断和治疗提供理论依据。

阿尔茨海默病(AD)是一种以认知功能障碍为主要特征的神经退行性疾病,具体发病机制目前尚不清晰。 随着我国人口老龄化越来越严重,患有 AD 人群的比例越来越高,亟需深入探究其发病机制并建立合适的疾病模型。本文从当前 AD 的发病假说和体内外模型进行了综述,详细介绍了神经细胞 β-淀粉样前体蛋白( APP ) 转基因模型、D-半乳糖(D-gal)模型、D-半乳糖联合 β-淀粉样蛋白(Aβ)模型等 10 种体内模型和 3 种体外模型( HT22 细胞模型、PC12 细胞模型和 SH-SY5Y 细胞模型) ,以期为 AD 疾病的基础研究和新药开发提供模型参考和研究思路。关键词: 阿尔茨海默症;发病机制;体内动物模型;体外细胞模型

金黄色葡萄球菌作为一种人畜共患的条件性病原菌,其可对实验动物的质量及从业人员的健康构成严重的威胁,是屏障环境中必须监测和排除的病原体。 采用准确、灵敏、快速的细菌分子分型方法,对于控制屏障环境中金黄色葡萄球菌具有重要意义。 目前,金黄色葡萄球菌的分子分型方法有葡萄球菌染色体基因盒 mec, 葡萄球菌主蛋白 A 分型、多位点系列分型、脉冲场凝胶电泳分型、附属基因调节因子分型等。 了解屏障系统中金黄色葡萄球菌对实验动物的感染状况,比较了不同分子分型方法的技术特征与应用,可为实验动物金黄色葡萄球菌的检测及分型提供参考。

升压物质检查法是《中国药典》收录的一项药物安全性检查法。 用以检测可能含有引起血压升高杂质的原料药及其制剂中升压物质的限度是否符合标准规定。 该检查法的使用范围虽然较窄,但在临床用药安全上发挥着重要作用。 本文就升压物质检查法的实验原理、实验系统、方法应用、各国药典收录情况、改进建议,以及实验要点进行综述,为相关实验人员提供参考。