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2017年 第34卷 第01期    刊出日期：2017-02-28

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研究 论著

实验大鼠仙台病毒抗体检测能力验证结果评价

李晓波, 付瑞, 王洪, 王吉, 卫礼, 王淑菁, 邢进, 冯育芳, 李威, 王莎莎, 贺争鸣, 岳秉飞

2017, 34(01):  1-6. 

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摘要: 目的了解全国实验动物检测相关实验室在大鼠仙台病毒抗体检测项目上的技术水平，发现并解决检验中存在的问题，促进各实验室加强质量管理，提高检测水平。方法制备标准实验大鼠血清样品，经过标定后分装，按照CNAS 的要求进行均一性和稳定性验证，标定好的样品随机编号并随机发放给各参加实验室，每个实验室3 个样本，在规定时间内反馈结果，结果以阳性或阴性表示，与预期结果均一致者判为满意结果，不完全一致或逾期未反馈结果者判为不满意。结果来自18 个省市自治区的28 家单位报名参加本次比对实验，均在规定时间反馈了结果，其中25 家单位获得满意结果，占参加比对实验室的89. 3%; 结果不满意的3 家单位，其中1 家有1 个样品与预期结果不符，另外2 家均有2 个样品与结果不符。28 家单位中有27 家采用酶联免疫吸附法( ELISA) 检测，另外1 家用免疫荧光法( IFA) 检测。反馈的原始记录总体真实可信，个别参加单位存在检测试剂来源不清、操作过程不详及阳性结果未进行复检等问题。结论各实验动物检测机构大鼠仙台病毒总体检测能力较高，本次能力验证计划的实施能够反映实验室的检测水平。

姜黄素对沙漠干热环境中暑大鼠生命体征和相关血液指标的影响

张东辉, 刘江伟, 许永华, 曹金军, 许琴, 赵荣, 李佳佳, 李建瑛, 是文辉, 董翔, 马娜, 宋来阳

2017, 34(01):  7-10. 

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摘要: 目的探讨姜黄素对沙漠干热环境中暑生命体征和相关血液指标的影响，以阐明姜黄素对中暑大鼠的保护作用。方法选取6 ～ 8 周龄SPF 级雄性SD 大鼠200 只，每组40 只，随机分组( 对照组、溶剂组、姜黄素低剂量预处理组、姜黄素中剂量预处理组、姜黄素高剂量预处理组) ，各组连续7 d 等体积灌胃，同时置于西北特殊环境人工实验舱中，设定沙漠干热环境气候模式( 温度41℃，湿度10%) ，分别在0 min、50 min、100 min、150 min 时间点，各组随机取10 只动物测量核心体温、称质量、并出舱麻醉，采集动脉、静脉血，测定血气、血常规及血生化指标。结果高剂量组10 min 体温平均上升速率明显低于对照组( P ＜ 0. 05) 和溶剂组( P ＜ 0. 05) ; 高剂量组10 min 体质量平均下降速率明显低于对照组( P ＜ 0. 05) 、溶剂组( P ＜ 0. 05) ; 高剂量组10 min 体质量平均下降速率与pO2、pH 值、糖、 甘油三酯呈负相关( 相关系数分别为: － 0. 955、－ 0. 355、－ 0. 692、－ 0. 733) ，与白细胞数目呈正相关( 相关系数为:0. 943) 。结论中暑大鼠的体温上升速率和体质量下降速率可能是反映大鼠预后的有用指标，姜黄素可以降低沙漠干热环境中暑大鼠体质量平均下降速率和体温平均上升速率，从而保持血液中较高的pO2、减缓血液pH 值降低、维持血液中糖、甘油三酯能量物质在较高水平，同时抑制血液中白细胞数目上升，从而可能通过维持机体内环境的相对稳定而发挥对沙漠干热环境中暑大鼠损伤的保护作用。

姜黄素预处理对沙漠干热环境中暑大鼠血清及尿液电解质的影响

许琴, 董翔, 周娇, 许永华, 张东辉, 李佳佳, 赵荣, 李建瑛, 是文辉, 马娜, 宋来阳, 刘江伟

2017, 34(01):  11-15. 

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摘要: 目的观察姜黄素预处理对沙漠干热环境中暑大鼠血清及尿液电解质的影响。方法140 只SD 雄性大鼠，随机分为中暑0 时间点组和中暑后24 h 组，每组又分为常温氯化钠对照组、轻度中暑氯化钠组、中度中暑氯化钠组、重度中暑氯化钠组、轻度中暑姜黄素组、中度中暑姜黄素组和重度中暑姜黄素组7 个亚组。常温组条件为温度25℃，相对湿度35%; 中暑组条件为温度41℃，相对湿度10%。第一组大鼠在中暑零时刻采下腔静脉血进行血清电解质测定，第二组大鼠于中暑后24 h，收集24 h 尿液、采下腔静脉血，进行电解质测定。结果随中暑程度的加深，血清K + 逐渐降低，Na +、Cl －、Ca2 + 有升高趋势，但均未达到显著水平，姜黄素干预后K + 逐步回升，而Na +、Cl －、Ca2 + 均显著升高。中暑后24 h，血清中K + 在轻度与中度中暑时恢复至正常水平，而重度中暑时，血清K + 浓度依旧很低。姜黄素干预后，轻度与中度中暑大鼠血清K + 上升反弹明显，并显著高于正常水平，重度中暑大鼠血清K + 则恢复至正常水平，而Na +、Cl －、Ca2 + 在中暑之后24 h 均恢复至正常水平。中暑后24 h，尿中K +、Na +、Cl － 的浓度均较低，姜黄素干预后，尿中Cl － 增加显著。结论姜黄素可通过提高血清中K + 浓度，促进Cl － 的排出而纠正沙漠干热环境中暑大鼠电解质紊乱。

Mkate2 转化过的大肠埃希氏菌制备的急性肾盂肾炎小鼠模型

雷雨, 王光强, 朱德生

2017, 34(01):  16-19. 

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摘要: 目的在普通实验环境下通过向肾皮质内注射1 × 107 cfu /mL 的Mkate2 转化非致病性大肠杆菌法，成功制备了急性肾盂肾炎小鼠模型。方法采用影像学方法对模型制作效果进行监测，提高了模型制作的成功率，减少了动物的使用数量。结果成功制备了小鼠肾盂肾炎模型，同时该细菌没有在肾脏中持续增殖，大大降低了模型制作的生物学风险。

长爪沙鼠Eef1a2 基因的克隆与同源性分析

李玉娜, 郭萌, 杜小燕, 李长龙, 霍学云, 路静, 吕建祎, 刘欣, 陈振文

2017, 34(01):  20-25. 

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摘要: 目的长爪沙鼠真核蛋白延长因子1a2 ( eukaryotic translation elongation factor 1 alpha 2，Eef1a2) 基因的克隆，测序和同源性分析。方法提取长爪沙鼠骨骼肌组织的mＲNA，通过同源扩增和cDNA 末端快速扩增技术( rapid amplification of cDNA ends，ＲACE) 克隆Eef1a2 cDNA 序列全长。通过DANSTAＲ 软件比对长爪沙鼠和人类、大鼠、小鼠Eef1a2 的cDNA 和氨基酸序列，并分析其同源性。结果长爪沙鼠Eef1a2 cDNA 序列全长1812 bp，编码区 ( coding sequence，CDs) 1392 bp，编码463 个氨基酸。其核苷酸序列与人类、大鼠和小鼠的同源性分别为88. 6%，94. 0%和93. 8%; 长爪沙鼠Eef1a2 氨基酸序列与人类、大鼠和小鼠的同源性分别为100%， 99. 9% 和99. 9%。结论 长爪沙鼠Eef1a2 的核苷酸序列和氨基酸序列均与人、大鼠、小鼠高度同源。因此，长爪沙鼠可能是一种人类Eef1a2 基因研究的理想模型。

原代培养对成年小鼠肝组织及肝癌组织理化特性的影响

庄云芳, 樊婷婷, 童仁洋, 李学凤, 李慧玲, 王福金, 王爱国, 王靖宇

2017, 34(01):  26-33. 

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摘要: 目的探讨体外培养对成年小鼠肝组织及肝癌组织理化特性的影响。方法采取9 月龄H-ras12V 转基因雄性小鼠的肝癌组织和癌旁组织及C57 /BL6J 正常雄性小鼠的正常肝组织进行体外培养，苏木精－ 伊红染色法检测肝组织在12 d 内的生长状态; 考马斯亮蓝染色法检测组织中总体蛋白在48 h 内的变化趋势; Western blot 法检测48 h内培养组织中p-EＲK、p-AKT、p-mTOＲ、GAPDH 和Cyclin D1 的蛋白表达水平; ＲT-qPCＲ 法检测48 h 内培养组织中18s ＲNA、Cyclin D1、GAPDH、UQCＲB 的mＲNA 表达水平。结果体外培养6 d 内，正常雄性小鼠肝组织、H-ras12V 转基因雄性小鼠肝癌及癌旁组织的细胞形态变化相似，存活状态良好。体外培养6 d 后，正常肝细胞和癌旁细胞逐渐减少，相比之下，肝癌细胞开始出现大量死亡，但出现少数克隆样细胞团。考马斯亮蓝染色检测结果显示，正常肝组织、肝癌组织和癌旁组织的总体蛋白变化趋势相似，随培养时间的延长，在130 ～ 170 kD之间的蛋白条带丰度先升高再降低，40 ～ 130 kD 之间的蛋白条带丰度逐渐增加。Western Blot 检测结果显示，随 着体外培养时间的延长，组织中p-EＲK、p-AKT、p-mTOＲ、GAPDH 和Cyclin D1 的蛋白表达水平呈逐渐下降趋势。ＲT-qPCＲ 检测结果显示，Cyclin D1 在正常肝细胞、肝癌细胞及癌旁细胞和GAPDH 在正常肝细胞、癌旁细胞中随培养时间的延长，呈现逐级升高趋势; 而GAPDH 在肝癌细胞和UQCＲB 在正常肝细胞、肝癌细胞及癌旁细胞中随培养时间的延长，呈现先下降后又逐渐升高的趋势; 18s ＲNA 的mＲNA 表达水平在正常肝细胞、肝癌细胞及癌旁细胞中没有规律性趋势变化。结论成年小鼠肝组织及肝癌组织在体外培养期间，虽然肝细胞的形态学变化不明显，存活良好，但短时间内，众多基因在mＲNA 和蛋白的表达水平上发生了显著的变化，对实验结果将有较大的影响。

市售化妆品安全性毒理学状况调查

袁丽华, 常秀玲, 康丽, 刁立琴, 高保栓, 刘英绵, 刘西林

2017, 34(01):  34-36. 

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摘要: 目的通过抽样测试，对河北省内部分城市( 2011—2012 年) 市售化妆品安全性毒理学状况进行调查。方法采用动物试验方法，对市场采集的祛斑类、防晒类、洗面类及沐浴类等33 个化妆品进行安全毒理学试验观察。结果19 个化妆品( 沐浴类8 个，洗面类8 个，祛斑洁面类3 个) 对家兔的急性皮肤刺激性试验结果: 无刺激性10例( 52. 6%) ，轻刺激性9 例( 47. 4%) ; 16 个样品( 沐浴类8 个，洗面类8 个) 对家兔急性眼刺激试验结果: 无刺激性0 例、微刺激性3 例( 18. 8%) 、轻刺激性13 例( 81. 2%) ; 17 个样品( 祛斑洁面类3 个，防晒类9 个，祛斑类5 个) 对豚鼠的皮肤变态反应试验结果: 14 例无致敏反应( 82. 4%) ，出现弱致敏性和轻致敏性反应的共有3 例( 17. 6%) 。结论调查显示，各类化妆品均有不同比例的轻( 或微) 度毒理学反应，虽然可以判定所调查产品均在人类可接受范围之内，但提示监管部门应重视和加强风险监控，以保障消费者安全。

实验用成年与老年猕猴血液生理和生化指标的比较

张永一, 赵维星, 王显望, 张晓莹, 曹江北, 米卫东

2017, 34(01):  37-40. 

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摘要: 目的比较实验用成年和老年猕猴血液生理和生化指标，为今后实验研究提供参考。方法随机选取健康成年猕猴20 只、老年猕猴12 只，雌雄各半，清醒状态下从后肢隐静脉抽取静脉血，行血常规和血生化检查，从股动脉抽血行血气分析检查。结果在血常规中，老年猕猴的平均红细胞血红蛋白浓度( MCHC) 极显著高于成年猕猴( P ＜ 0. 01) ; 血红蛋白( HCG) 、血小板( PLT) 、红细胞体积分布宽度标准差( ＲDW-SD) 等显著高于成年猕猴( P ＜ 0. 05) ; 老年猕猴淋巴细胞计数( LYMPH# ) 、嗜酸性粒细胞计数( EO# ) 等极显著低于成年猕猴( P ＜ 0. 01) ; 白细胞计数( WBC) 显著低于成年猕猴( P ＜ 0. 05) 。血生化中，老年猕猴的单胺氧化酶( MAO) 、甘油三脂( TＲIG) 极显著高于成年猕猴( P ＜ 0. 01) ; 丙氨酸转氨酶( ALT) 、血糖( GLU) 、乳酸脱氢酶( LDH) 显著高于成年猕猴( P ＜ 0. 05) ; 老年猕猴的超氧化物歧化酶( SOD) 极显著低于成年猕猴( P ＜ 0. 01) 。动脉血气中，老年猕猴的血乳酸( Lac) 极显著高于成年猕猴( P ＜ 0. 01) ; 老年猕猴的二氧化碳分压( PaCO2 ) 、碳酸氢根( HCO3 + ) 、二氧化碳总量( TCO2 ) 、碱剩余( BE) 等极显著低于成年猕猴( P ＜ 0. 01) 。结论成年和老年猕猴某些血液学指标有显著性差异，进行生物医学研究时应予以充分考虑。

清血通脉颗粒改善微循环障碍及对血栓形成的影响

朱竟赫, 庞杰, 齐越, 秦文艳, 赵金明

2017, 34(01):  41-44. 

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摘要: 目的研究清血通脉颗粒改善微循环作用、抗血栓作用。方法采用小鼠空肠袢局部滴加肾上腺素造成肠系膜微循环障碍模型，观察清血通脉颗粒对毛细血管管径大小、微血流速度和流态的影响; 采用电刺激大鼠颈总动脉近心端造成血流减慢并形成血栓，观察清血通脉颗粒对抗血栓形成的作用。结果清血通脉颗粒能显著改善毛细血管管径、微血流速度和流态; 能显著降低电刺激大鼠颈动脉引起的血栓堵塞率。结论清血通脉颗粒具有改善微循环、对抗血栓形成的作用。

高脂膳食、强制运动对仔鼠体质量及行为学影响的研究

雷雨, 刘庆春, 朱德生

2017, 34(01):  45-48. 

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摘要: 目的探讨高脂膳食、强制运动对乳鼠体质量、血脂水平和行为学的影响。方法选择60 只刚断乳的BABL /c 乳鼠，随机分成两组，对照组( n = 10) 使用基础饲料喂养75 d，高脂组( n = 50) 使用高脂饲料喂养75 d，饲喂结束后，比较高脂饲料和普通饲料饲喂的仔鼠在体质量和血脂水平的差异; 为了研究仔鼠肥胖对运动行为的影响，利用双运动( 转轮和自主活动) 记录仪对各组动物的运动情况进行记录，分析高脂膳食和强制运动对仔鼠体质量及行为学的影响。结果高脂饲料和普通饲料饲喂的仔鼠在体质量和生化指标( TC，TG) 均有显著性差异; 无论雌雄，自主运动均无明显差异，但雌性肥胖拮抗小鼠的转轮运动明显高于雄性肥胖小鼠; 强制运动后，雄性肥胖强制运动组与肥胖对照组相比较体质量明显减轻，而雌性肥胖强制运动组与肥胖对照组相比较无明显变化。结论肥胖受饮食影响较大，对于雌性动物，主动运动可能有效地预防肥胖，另外肥胖一旦发生并进行强制运动干预，雄性减肥效果明显好于雌性。

食蟹猴离乳期间标准化生产管理技术要点探讨

田朝阳, 冯国胜, 王开敏, 葛桂容, 洪传绪, 杨颖珊, 马原野

2017, 34(01):  49-51. 

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摘要: 食蟹猴离乳阶段的标准化生产管理是实验食蟹猴质量控制和系谱信息管理的重要环节。本文对食蟹猴离乳期间的饲养管理、疾病防控、个体标记、检验检疫、疫苗免疫接种及动物福利保障等多个技术要点进行了简要概述，为科学制定规范化、标准化的食蟹猴离乳阶段的生产管理技术体系提供参考。

实验动物行业基础数据调查系统的设计与实现

李会萍, 王晓明, 刘万策, 胡金芳, 杨锦淳, 陈梅丽, 黄韧

2017, 34(01):  52-56. 

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摘要: 实验动物行业基础数据调查系统主要用于业内实验动物资源、相关产品、科技人员以及动物实验支撑产业供需情况等的数据收集、统计分析与展示，系统具有可灵活定制、可扩展、操作简单等特点。文章重点介绍系统结构、功能模块设计以及系统的实现。

无菌大鼠培育的技术创新及其繁育探讨

朱祥宇, 刘君芳, 周淑佩, 张阔, 王学文, 郑振辉

2017, 34(01):  57-61. 

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摘要: 对清洁级SD 大鼠进行剖腹取胎净化，经人工饲育建立无菌SD 大鼠群，以满足科研单位对无菌大鼠的需求。在手术隔离器中剥离子宫，取35 只仔鼠传入饲育隔离器，静置2 h 后存活20 只; 用自行研制的灌胃注射器，和市售配方改良奶粉，对剖腹取胎仔鼠进行人工哺乳。每24 h 人工哺乳5 ～ 6 次。哺乳20 只，离乳13 只。粪便、垫料、棉拭子经无菌检查，均无细菌生长。通过优化人工乳配方，创新无菌鼠培育技术，成功建立无菌大鼠模型，并传代保种，解决了科学研究在国内买不到无菌大鼠的难题。

内毒素所致急性肺损伤动物模型的研究进展

曹志敏, 唐明美, 文强, 李娜娜, 陈玲

2017, 34(01):  62-65. 

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摘要: 急性肺损伤( ALI) 是以急性进行性呼吸衰竭为特征的一种常见且死亡率高的临床综合征。目前对ALI 的研究主要以动物模型为基础，而动物种属及对诱导物的反应是影响动物模型成功与否的一个重要因素。因此，本文旨在对内毒素所致ALI 动物模型的研究概况作一综述。

SPF 鸡微生物质量控制标准与监测技术

林欢, 韩凌霞, 赵丽丽, 陈洪岩

2017, 34(01):  66-70. 

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摘要: SPF 鸡及鸡胚被大量用于人和兽用生物制品的生产基质和质量检定材料，在农业科学、医学科学和生物制品等领域的研究、生产、检定工作中有非常重要的作用。本文总结了SPF 鸡及鸡胚的微生物质量控制标准、质量监测技术，以及我国SPF 鸡培育和产业发展概况。