实验动物科学

尤金炜, 董敏, 梁磊, 许龙祥, 马畅, 张旭亮, 方天, 恽时锋

2016, 33(06): 1-4.

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摘要: 目的研究常规动物实验操作对大鼠肝细胞内核转录因子Kappa B( 简称NF-κB) 的影响。方法采用雄性SD 大鼠，分别进行眼眶静脉采血、尾静脉注射操作，每天记录大鼠体质量和饲料消耗数据，连续处理14 d 后，测定各组大鼠肝细胞内NF-κB p65 的mＲNA 表达量和蛋白水平，并与对照组进行比较，分析这些操作的影响。结果与对照组相比，眼眶静脉采血及尾静脉注射实验组大鼠体增重和饲料能耗比均有降低，且差异极显著( P ＜0. 01) ; 实验组大鼠肝细胞中NF-κB p65 和蛋白的表达水平较对照组都有升高，且差异极显著( P ＜ 0. 01) ; 实验组中眼眶静脉采血组NF-κB p65 和蛋白的表达水平高于尾静脉注射组，差异极显著( P ＜ 0. 01) 。结论本研究中涉及的常规实验操作均引起大鼠的显著应激反应致福利受损，可导致肝细胞内NF-κB 表达水平提高，表明了NF-κB 参与了大鼠福利损伤的过程。

α-亚麻酸对胰岛素抵抗HepG2 细胞脂类合成基因表达的影响

解现星, 贺喜兵, 高婷婷, 刘源

2016, 33(06): 5-10.

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摘要: 目的分析在α-亚麻酸( ALA，C18: 3) 干预后，胰岛素抵抗HepG2( insulin resistance HepG2， IＲ-HepG2) 细胞模型脂类合成关键基因表达水平的变化。方法HepG2 细胞造模期分为两组，由无血清培养基培养的对照组( normal control group，NC) 以及含有0. 25 mmol /L 软脂酸的无血清培养基培养的软脂酸组( palmitic acid，PA) ，培养24 h 后鉴定细胞胰岛素敏感性并测定细胞内胆固醇( total cholesterol，TCH) 、甘油三酯( Tryglyceride，TG) 水平，然后用ALA 替代20%的PA 培养12 h，再次鉴定细胞胰岛素敏感性并检测细胞内TCH、TG 水平， real time qPCＲ检测TG、TCH 合成关键基因mＲNA 水平，Western blot 检测TG、TCH 合成关键基因蛋白表达量。结果IＲ-HepG2 细胞模型建立成功，并且PA 组TCH 水平显著高于NC 组( P = 0. 0016) ，出现了脂代谢紊乱; ALA 干预IＲ-HepG2 细胞 12 h后，细胞活性有所恢复，与PA 组相比，ALA 组胰岛素诱导基因( insulin induced genes，INSIGs) 及脂类合成关键蛋白的mＲNA 表达无明显变化; 与基因表达结果不一致的是，ALA 干预后可以特异性提升细胞内INSIG-2 蛋白相对表达量，但对INSIG-1 蛋白相对表达量没有明显影响。同时，ALA 可以显著抑制55kDa 固醇调节元件结合蛋白-2( sterol regulatory element-binding protein-2，SＲEBP-2 ) 、HMG-CoA 还原酶( 3-hydroxy-3-methyl glutaryl coen-zyme Areductase，HMGCＲ) 及脂肪酸合酶( fatty acid synthase，FASN) 蛋白的表达，且ALA 组细胞内TG 水平显著降低( P =0. 0119) 。结论0. 05 mmol /L ALA 干预IＲ-HepG2 细胞后，通过提升INSIG-2 蛋白的表达，抑制SＲEBP-2 从内质网到高尔基体的剪切成熟活化，降低细胞内55kDa SＲEBP-2 水平及HMGCＲ的表达，并且抑制FASN 表达，从而抑制了TG/TCH 的合成。

应用新西兰白兔验证可降解网状微孔球囊联合钙盐骨水泥治疗骨折的作用

吴建英, 刘贵省, 刘训伟

2016, 33(06): 11-15.

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摘要: 目的通过观察新西兰白兔股骨内植入材料的降解及血液指标的变化验证可降解网状微孔球囊联合钙盐骨水泥治疗骨折的作用。方法根据植入物不同分为实验组( 植入可降解网状微孔球囊及钙盐骨水泥) 和对照组( 植入钙盐骨水泥) ，对术前、术后1，3，6个月的血液指标进行组间及组内比较，并通过影像学及病理学对植入物降解和骨组织生长匹配情况进行对比分析。结果实验组和对照组血液指标无明显改变; 在体内无明显免疫反应; 骨组织均可伸入到骨水泥间隙内，取代降解的骨水泥，形成规则的骨小梁结构; 实验组骨小梁较对照组粗大致密、分布规则。结论通过新西兰白兔验证了可降解网状微孔球囊联合钙盐骨水泥对活体无明显免疫反应，并利于骨折的修复愈合。

沙漠干热环境中暑大鼠血常规及肠黏膜病理学变化

董翔, 王金泉, 刘江伟, 许琴, 张东辉, 李佳佳, 马娜, 许永华

2016, 33(06): 16-20.

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摘要: 目的研究沙漠干热环境下不同程度中暑大鼠血常规及肠黏膜的病理学变化。方法将SPF 级SD 雄性大鼠48 只，随机分为常温对照组( NC 组) 、轻度中暑组( LHS 组) 、中度中暑组( MHS 组) 、重度中暑组( SHS 组) 。置于“西北特殊环境人工实验舱”模拟的沙漠干热环境温度( 41 ± 0. 5) ℃，湿度( 10 ± 2) % ＲH，禁食禁水。分别于( 50 ± 5) min、( 100 ± 5) min、( 150 ± 5) min 造成大鼠轻、中、重度中暑模型后，立即用3%戊巴比妥钠腹腔深度麻醉处死，留取静脉血及回、结肠组织标本，进行血常规检测和病理学观察评分。结果大鼠随中暑程度的加深，白细胞数逐渐增加，SHS 组白细胞数较其它各组增加明显( P ＜ 0. 05) ; 红细胞数、红细胞压积MHS 组较NC 组、LHS 组增加明显，SHS 组较其它各组增加明显( P ＜ 0. 05) ; MHS 组血小板数较NC 组、SHS 组增加明显( P ＜ 0. 05) 。MHS 组、SHS 组回肠和结肠病理学损伤评分随中暑程度的加深显著增加( P ＜ 0. 05) ; MHS 组、SHS 组内回肠病理学损伤评分高于结肠( P ＜ 0. 05) 。结论沙漠干热环境造成中暑大鼠白细胞数、红细胞数、红细胞压积升高，血小板数呈现先升高后降低的趋势，肠黏膜病理学变化随中暑程度的加深而进行性加重，其中回肠较结肠病理学损伤更为严重，提示预防沙漠干热环境中暑对小肠黏膜的保护尤为重要，而血小板数降低可能是反应重度中暑的重要指标之一。

姜黄素对沙漠干热环境中暑大鼠脑损伤的保护作用研究

赵荣, 刘江伟, 许永华, 是文辉, 宋来阳, 李建瑛, 李佳佳, 张东辉, 马娜, 董翔

2016, 33(06): 21-24.

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摘要: 目的观察姜黄素对沙漠干热环境中暑大鼠脑组织氧化应激的影响。方法200 只SD 大鼠，随机分为5 组:盐水对照组、溶剂组、姜黄素预处理低剂量组、姜黄素预处理中剂量组、姜黄素预处理高剂量组。各组连续7 d 等体积灌胃，同时置于西北特殊环境人工实验舱，设定沙漠干热环境气候模式温度( 41 ± 1) ℃，湿度10% ＲH。分别在0 min、50 min、100 min、150 min 各组随机取10 只动物检测脑组织丙二醛( MDA) 及谷胱甘肽( GSH) 的含量。结果 ( 1) 0 min 时间点各组大鼠脑组织MDA 的含量无显著性差异( P ＞ 0. 05) ，随着干热环境持续时间延长MDA 含量呈现上升趋势，姜黄素预处理高剂量组与对照组、溶剂组差异具有显著性( P ＜ 0. 05) 。( 2) 0 min 时间点各组大鼠脑组织GSH 的含量无显著性差异( P ＞ 0. 05) ，随着干热环境持续时间延长GSH 含量逐渐下降，姜黄素预处理高剂量组与对照组、溶剂组差异具有显著性( P ＜ 0. 05) 。结论姜黄素对沙漠干热环境中暑大鼠脑组织氧化应激损伤具有抑制作用，对神经系统具有一定保护作用。

促肝细胞生长素对α-萘异硫氰酸酯致小鼠急性肝损伤的保护作用及机制研究

张洁, 李梦, 王燕, 孙泉, 成军

2016, 33(06): 25-30.

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摘要: 目的研究促肝细胞生长素( PHGF) 对α-萘异硫氰酸酯( ANIT) 致小鼠急性肝损伤的保护作用及机制，为其临床应用提供实验依据。方法50 只BALB/c 雄性小鼠，随机分为对照组10 只和ANIT 处理组40 只。ANIT 处理组小鼠口服105 mg /kgANIT 后随机分为模型组、重组人肝细胞生长因子组( ANIT + rhHGF 1 μg) 、促肝细胞生长素低剂量组( ANIT + PHGF 10 mg /kg) 、促肝细胞生长素高剂量组( ANIT + PHGF 20 mg /kg) 。对照组和模型组小鼠在口服ANIT前0. 5 h，口服ANIT 后6， 12， 24， 30， 36 h 腹腔注射生理盐水; ANIT + rhHGF 1 μg 组、ANIT + PHGF 10 mg /kg组和ANIT+ PHGF 20 mg /kg 组小鼠分别在相同时间点腹腔注射1 μg rhHGF、10 mg /kgPHGF 和20 mg /kgPHGF; 口服ANIT 后48 h，麻醉小鼠并心脏取血，血液离心后，取血清，检测谷丙转氨酶( ALT) 、谷草转氨酶( AST) 、碱性磷酸酶( ALP) 的含量。取肝脏，部分肝脏用10%甲醛溶液固定，切片后进行HE 染色，观察其病理变化; 部分肝脏液氮保存，检测超氧化物歧化酶( SOD) 的活性。结果ANIT + rhHGF 1 μg 组、ANIT + PHGF 10 mg /kg 组和ANIT + PHGF 20 mg /kg 组小鼠ALT、AST、ALP 含量比模型组显著降低。模型组与对照组SOD 含量比较，显著增加; ANIT + rhHGF 1 μg 组、ANIT +PHGF 10 mg /kg 组、ANIT + PHGF 20 mg /kg 组与模型组SOD 含量相比较，无明显差异。HE 染色结果显示，ANIT +rhHGF 1 μg、ANIT + PHGF 10 mg /kg 和ANIT + PHGF 20 mg /kg 组小鼠肝脏坏死和炎性细胞浸润情况明显减轻。结论PHGF 能保护ANIT 急性小鼠肝损伤，其作用机制可能与抑制炎症反应有关。

塞来昔布对海人藻酸致痫大鼠Iba-1 及GFAP 表达的影响

秦文艳, 齐越, 韦丹, 张冰冰, 康凯, 贾冬

2016, 33(06): 31-34.

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摘要: 目的研究选择性COX-2 抑制剂塞来昔布对癫痫大鼠的保护作用。方法采用海马内注射海人藻酸( Kainic Acid，KA，1 μg /μL， 1. 0 μL) 建立大鼠癫痫模型，观察并记录各组大鼠注射KA 后的行为学变化; 采用免疫组化法检测大鼠海马组织中离子钙接头蛋白分子( Iba-1) 和胶质纤维酸性蛋白( GFAP) 的表达情况。结果塞来昔布组的癫痫发作潜伏期明显延长，最大发作级别明显降低( P ＜ 0. 05) ; 与模型组相比，塞来昔布组的海马组织中Iba-1 和GFAP 的表达减少，胶质细胞活化情况明显减轻。结论塞来昔布可能通过抑制小胶质细胞和星形胶质细胞活化，减轻其介导的炎症反应，改善癫痫发作的程度。

人NEDD8 原核表达及兔高免血清制备

杨进花, 陈鸿军

2016, 33(06): 35-38.

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摘要: 本研究根据基因比对，将合成的nedd8 基因( HN8) 酶切克隆入pCold-TF 原核表达载体中，命名为pCold-HN8，转化到感受态宿主菌BL21( DE3) 中，加入不同浓度异丙基硫代半乳糖苷( IPTG) 于16℃中诱导表达24 h，超声波裂解，通过His-bind 纯化试剂盒纯化，分别进行SDS-PAGE 检测，结果HN8 蛋白获得可溶性表达，融合蛋白大小为64 kDa。用纯化的蛋白免疫新西兰兔，制备多克隆抗体，经Western Blot 和间接免疫荧光试验证实，兔抗HN8 蛋白的血清能够特异性识别HN8 蛋白。这为进一步研究HN8 蛋白在Neddylation 通路中的修饰作用奠定了基础。

恐惧性测试中导盲犬心率变化差异性研究

韩芳, 李雅婵, 赵明媛, 周子娟, 宋雅楠, 王亮, 王福金, 王爱国, 陈大朋, 王靖宇

2016, 33(06): 39-44.

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摘要: 目的探究导盲犬在恐惧性测试中心率变化规律，为导盲犬的前期筛选提供行之有效的行为学方法和生理依据。方法对中国导盲犬大连培训基地提供的28 只培训成功的导盲犬和32 只培训失败的淘汰犬进行恐惧性测试。同时收集到32 只犬的心率，其中导盲犬16 只，淘汰犬16 只。分析恐惧性测试中注意力及主动探索两个行为变量评分以及心率变化规律。结果恐惧性测试中导盲犬的注意力和主动探索行为变量得分均显著高于淘汰犬( 注意力: 导盲犬组: 3. 32 ± 0. 18，淘汰犬组: 2. 34 ± 0. 18，P ＜ 0. 01; 主动探索: 导盲犬组: 3. 32 ± 0. 24，淘汰犬组:2. 34 ± 0. 18，P ＜ 0. 01) 。恐惧性测试中检测到的导盲犬组与淘汰犬组的心率值均显著高于各组相应的静息心率( 导盲犬组: 测试心率: 116. 76 ± 11. 11，静息心率: 100. 38 ± 12. 71，P ＜ 0. 01; 淘汰犬组: 测试心率: 124. 83 ± 15. 57，静息心率: 98. 41 ± 12. 38，P ＜ 0. 01) 。对恐惧性测试中心率与静息心率的差值( △HＲ) 分析发现，淘汰犬组的差值显著高于导盲犬组( 淘汰犬组: 26. 42 ± 3. 68; 导盲犬组: 16. 38 ± 2. 03，P ＜ 0. 05) 。结论相对于淘汰犬而言，导盲犬在恐惧性测试中心率与静息心率的差值较小，这表明导盲犬的情绪相对比较稳定，可能与其能更好地控制恐惧情绪有关。本研究为导盲犬的早期筛选提供科学参考信息。

Tiantanbio: NIH 小鼠血液生理生化和脏器指标的测定分析

郭羽, 魏杰, 王锡岩, 张梦媛, 胡涛, 闵凡贵, 王洪, 岳秉飞

2016, 33(06): 45-49.

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摘要: 目的测定Tiantanbio: NIH( 天坛生物: NIH) 小鼠的血液生理生化和脏器指标，并进行差异性和相关性分析。方法选取4 周龄和8 周龄Tiantanbio: NIH 小鼠各30 只，雌雄各半，麻醉后采血，测定17 项生理和13 项生化指标，解剖并测定主要脏器质量和脏器系数，分析各指标性别和周龄间的差异，并进行脏器质量与体质量的相关性分析。结果差异性分析显示，血液生理指标中，白细胞、白细胞亚群和血小板相关指标是主要差异项目; 血液生化指标多数都会受到性别和周龄的影响; 脏器质量雄性高于雌雄，并随着周龄增加而增大，脏器系数则随着周龄增加而减小。相关性分析显示，除胸腺外其他脏器质量均与体质量显著正相关( P ＜ 0. 05) ，其中雌鼠肝脏、雄性肾脏与体质量的相关性最高。结论性别和周龄都会影响血液生理生化和脏器指数的变化，不同机构保种的NIH 小鼠存在差异，需建立相应的生物学特性基础数据库。

IWT650 洗笼机在动物实验室的应用体会

马雷, 温福利, 张诗兰, 郑和平

2016, 33(06): 50-51.

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摘要: 为了提高工作效率，减少劳动负荷，确保笼具清洗的质量，我科利用洗笼机高效、简单、可靠等优良特性，在动物笼具日常清洗中采用洗笼机，实践说明洗笼机的笼盒清洗效果可以满足实验要求。

实验动物质量控制对医学院校教学和科研的保障作用

陈柏安, 王舒波, 姚紫彤, 孟霞, 卢静

2016, 33(06): 52-54.

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摘要: 实验动物是医学院校教学和科研的必要支撑条件，良好的实验动物质量控制是教学和科研的重要保障。目前国内医学院校和开展生物医学相关教学及研究的综合院校在实验动物质量控制方面呈现的水平参差不齐，这从一定程度上反映了其教学和科研的质量及综合实力。本文将主要介绍实验动物质量控制的核心内容，以期为医学院校教学及科研工作者提供参考。

屏障环境设施指标动态变化的研究

毕波, 陈志鹏, 张聪, 黄戎娟, 刘洋, 陈丙波

2016, 33(06): 55-58.

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摘要: 目的探讨屏障设施动态运行状况。方法对第三军医大学实验动物中心等单位的屏障设施内环境，按照国家《实验动物环境与设施GB 14925 － 2010》标准，对温湿度、噪声、照度、空气洁净度、最小静压差、空气菌落数、氨浓度等指标进行了静态和不同时段的动态检测。结果有些指标静态和动态情况下无显著变化，有些指标如空气洁净度、空气菌落数等变化较大。结论通过动物设施的环境检测，掌握了影响其变化的因素，可通过加强管理来保障动物环境设施的有效运行。

阿尔茨海默病致病基因突变相关的啮齿类动物和非人灵长类动物模型

姚紫彤, 王舒波, 卢静, 陈柏安

2016, 33(06): 59-63.

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摘要: 我国现有阿尔茨海默病( AD) 患者800 － 1000 万，患者数量随着人口老龄化逐年增加，目前尚无有效治疗或者逆转AD 的药物和方法。过去基于啮齿类动物模型筛选出的用于治疗AD 的药物在人体试验中均疗效差或有严重的副作用，这与啮齿类动物模型和AD 患者病理及行为特征差异大有直接关系。非人灵长类动物与人的大脑和神经系统高度相似，建立AD 非人灵长类动物模型意义重大。AD 病因复杂，但是致病基因突变是其已知的明确病因，应该重视利用基因修饰或者基因筛选等技术建立AD 非人灵长类动物模型。本文将着重介绍AD 致病基因突变相关的转基因小鼠模型和非人灵长类动物模型的特点和现状。

国内外实验动物玩具的发展现状及展望

郭瀚元, 定明

2016, 33(06): 64-66.

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摘要: 实验动物作为科学实验的基础条件，在生命科学发展中起到重要作用。随着国际动物权益保护观念的深入人心，保护实验动物、维护实验动物福利也呼声日高。在这个大环境下，实验动物玩具作为实验动物福利之一也逐渐被人们重视起来。本文将讨论实验动物玩具的发展现状及未来方向。

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