实验动物科学

李艳红, 李晓波, 陆雪莹, 高剑峰, 肖向文

2013, 30(05): 1-5.

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摘要: 目的探讨熊果酸( UA) 对H22 荷瘤小鼠抗肿瘤作用及免疫功能的影响。方法皮下移植建立H22 荷瘤小鼠模型，腹腔注射不同剂量UA，检测抑瘤率和免疫器官指数，MTT 法检测脾脏T、B 淋巴细胞增殖能力，流式细胞术检测CD4 +、CD8 + T 细胞亚群含量及比例，ELISA 法检测血清细胞因子IL-2、IL-4 和TNF-α 的表达量。结果UA 对小鼠皮下移植性肿瘤H22 有显著的抑制作用，可降低免疫器官中异常增大的脾指数，增强脾脏中T、B 淋巴细胞增殖能力，提高淋巴细胞亚群CD4 + T 细胞表达及CD4 + /CD8 + T 细胞亚群比例，促进血清IL-2、TNF-α 表达，降低IL-4 表达。结论UA 可抑制小鼠肝癌H22 肿瘤生长，体内可以提高荷瘤小鼠的免疫能力，其抗肿瘤作用可能与机体的免疫调节作用相关。

海洛因对小脑皮质Bax 表达的影响

谢明仁, 李作平, 俞发荣, 连秀珍

2013, 30(05): 6-8.

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摘要: 目的探索海洛因对小脑皮质Bax 蛋白( bcl-x protein Bax) 表达的影响。方法肌肉注射海洛因，建立成瘾大鼠模型，用免疫组化方法检测小脑细胞Bax 的表达。结果连续给大鼠注射海洛因7 d 后，大鼠出现明显的戒断症状; 小脑细胞中Bax 表达阳性细胞比对照组明显增多，与对照组比有显著性差异( P ＜ 0. 01) 。结论海洛因具有诱导Bax 基因表达、损伤脑组织细胞的作用。

15-KETE 对大鼠肺动脉平滑肌细胞Kv1. 5、Kv2. 1 表达的影响

郭守利, 孙艳, 张一飞, 朱大岭

2013, 30(05): 9-14.

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摘要: 目的从细胞分子水平研究电压门控型钾通道亚型Kv1. 5、Kv2. 1 在15-酮基二十碳四烯酸( 15- ketoeicosatetretraenoic acid， 15-KETE) 致大鼠肺动脉收缩过程中的作用。方法通过酶法分离、培养SD 大鼠肺动脉平滑肌细胞( pulmonary arterial smooth cells，PASMCs) ，使用ＲT-PCＲ和Western blot 技术观察15-KETE 对大鼠 PASMCs 上Kv1. 5、Kv2. 1 通道表达的影响。结果( 1) 15-KETE 下调大鼠PASMCs 膜上Kv1. 5 通道mＲNA 及蛋白质的表达; ( 2) 15-KETE 下调大鼠PASMCs 膜上Kv2. 1 通道mＲNA 及蛋白质的表达。结论Kv1. 5、Kv2. 1 通道参与由15-KETE 引起的缺氧肺动脉收缩( hypoxic pulmonary vasoconstriction，HPV) 。

健脾化湿颗粒对D-IBS 模型大鼠内脏敏感性和脑中 CＲF 及其受体的影响

杜海燕1, 王迎寒, 张晓峰, 靳继伟, 郭洪杰

2013, 30(05): 15-19.

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二乙基亚硝胺诱发大鼠肝纤维化－肝癌动物模型的建立*

李彦, 李小弟, 廖明

2013, 30(05): 20-23.

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摘要: 目的建立大鼠肝纤维化－肝癌模型并动态观察大鼠肝纤维化－肝癌发生过程中的病理形态特点。方法用 0. 01%二乙基亚硝胺( DEN) 溶液间断喂养SD 大鼠诱发肝癌，对大鼠肝脏在不同诱癌阶段的病理变化进行动态观察。结果用药第4 周后，肝细胞点状坏死及炎性细胞浸润; 8 周时，肝细胞严重脂肪变性、灶性坏死，门管区出现纤维组织增生; 9—12 周时，增生的胶原束包绕并分割肝小叶，正常的肝小叶结构被破坏，假小叶形成; 15 周后存活大鼠均形成肝癌，肝癌细胞排列成条索状或团块状，诱癌组为100%成癌( 8/8) 。结论成功建立从肝纤维化发展成肝癌的动物模型，设立间歇期提高了大鼠癌变末期的成活率，该模型是动态研究肝癌发生发展进程的理想动物模型。

使用eCCI 仪制备大鼠TBI 动物模型及血清S100B 和NSE 含量变化

郭新荣, 王瑞辉, 吴涛

2013, 30(05): 24-27.

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摘要: 目的为科学研究提供重复性好、损伤( TBI) 程度稳定的颅脑损伤( TBI) 动物模型制备方法。方法选用SD 大鼠，随机分为正常A 组、模型B 组、模型C 组、模型D 组和假手术E 组。使用电子颅脑损伤仪( eCCI) ，选定不同打击参数分别对模型B 组、模型C 组、模型D 组打击造模，制备不同损伤程度的TBI 模型，通过观察血清S100B 和 NSE 含量变化评价模型制备效果。结果损伤发生后第1 天、第2 天、第3 天血清S100B 和NSE 含量均呈上升趋势，模型组与假手术组比较均有显著性差异( P ＜ 0. 01) ; 各模型组之间表现为随打击力度的增加，S100B 和NSE 含量显著性增高( P ＜ 0. 01) 。结论利用eCCI 仪制备TBI 大鼠模型，能够通过打击速度、打击深度参数的设置而精确控制模型的损伤程度，具有易操作、打击强度可控制、重复性好等优点，能够根据研究需要制备各种理想损伤程度的动物模型

15 － KETE 对大鼠肺动脉平滑肌细胞钙离子浓度的影响

郭守利, 张一飞, 刘晔, 朱大岭

2013, 30(05): 28-32.

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摘要: 目的探讨15-KETE 对大鼠肺动脉平滑肌细胞内Ca2 + 的作用及其来源。方法以酶法( 胶原酶Ⅰ型和弹性酶) 分离培养原代大鼠肺动脉平滑肌细胞，将细胞稀释所需密度( 2 × 105 个/mL) ，加样于6 孔板中的盖玻片上，放入37℃孵箱中培养12 h，细胞贴壁后，取出6 孔板中的盖玻片，放入特制的小槽内，D-Hanks 液冲洗细胞3 次，加入 1 × 10 － 5mol /L 的Flou-3 /AM，置37℃孵箱中避光孵育约30 min，用D-Hanks 液洗去细胞外残留染料，应用激光扫描共聚焦显微镜技术，测定了15-KETE 对大鼠肺动脉平滑肌细胞游离钙离子浓度的影响。结果1) 15-KETE ( 1 × 10 － 8—1 × 10 － 6 ) mol /L 可依赖性引起肺动脉平滑肌细胞内钙离子浓度( ［Ca2 +］i) 增加; 2) 1 × 10 － 6 mol /L 维拉米( L-型钙离子通道阻断剂) 和无钙离子细胞外液显著阻抑了1 × 10 － 6 mol /L 15-KETE 引起肺动脉平滑肌［Ca2 +］i 增加。结论15-KETE 可引起大鼠肺动脉平滑肌［Ca2 +］i 增加，并且此钙来源于细胞外液钙离子。

输注体外诱导的同种反应性淋巴细胞诱导大鼠肝脏移植免疫耐受的研究

蔡勇, 于久飞

2013, 30(05): 33-36.

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摘要: 目的观察输注体外诱导的同种反应性淋巴细胞，是否可以延长大鼠移植肝脏的存活时间，从而探索一条诱导肝移植免疫耐受的新途径。方法以供者Lewis 大鼠淋巴细胞作为刺激物，体外刺激受者BN 大鼠淋巴细胞增殖，应用CFSE( 羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯) 标记法检测增殖情况; 将增殖后的BN 大鼠淋巴细胞经照射灭活后输注给同品系的BN 大鼠，并行Lewis 到BN 的肝移植，观察肝移植后BN 大鼠生存期。结果同种反应性淋巴细胞体外能够活跃增殖; 采用同种反应性淋巴细胞输注可以显著延长肝移植大鼠的存活时间( P ＜ 0. 05) 。结论体外诱导的同种反应性淋巴细胞输注，有可能成为诱导抗原特异性免疫耐受的一种新途径。

芬太尼联合东莨菪碱预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响

周洁, 桑黎黎, 毛剑楠, 李星翰, 薛芝, 刘晓凡, 孟勇

2013, 30(05): 37-40.

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摘要: 目的探讨芬太尼联合东莨菪碱预处理对大鼠心肌缺血再灌注后的心肌保护效应。方法24 只雌性大鼠随机分为3 组( 每组8 只) : 即C 组( 心肌缺血再灌注组) 、F 组( 芬太尼组) 、F + D 组( 芬太尼+ 东莨菪碱组) 。记录缺血前、再灌注即刻、再灌注30 min、再灌注120 min 等的心率( HＲ) 、左心室收缩压峰值( LVSP) 、左心室舒张末压 ( LVEDP) 、左心室收缩及舒张最大压力变化速率( ± dp /dtmax) 。再灌注120 min 后，均取动脉血样3 mL，测定血清超氧化物歧化酶( SOD) 活力、血清丙二醛( MDA) 浓度、一氧化氮( NO) 的浓度进行统计分析。结果血液动力学的各组时间节点间的HＲ和LVEDP 无显著差异( P ＞ 0. 05) ，LVSP、± dp /dtmaxF 组在再灌注30 min、120 min 时较C 组显著升高( P ＜ 0. 05) ，F + D 组则显著高于F 组( P ＜ 0. 05) 。生化指标中F + D 组的SOD 活力与C 组和F 组比较无显著差异( P ＞ 0. 05) ，F + D 组的MDA 浓度显著低于其余两组( P ＜ 0. 05) ，F 组和F + D 组的NO 浓度都明显高于C 组( P ＜ 0. 05) 。各组心律失常严重程度评分，F + D 组最低( P ＜ 0. 05) 。结论芬太尼联合东莨菪碱比单纯使用芬太尼预处理具有更好的对心肌缺血再灌注损伤的保护作用。

松花粉提取物对大鼠实验性高脂血症的预防功能研究

刘玉玲, 王建伟, 佟继铭, 李赛颖

2013, 30(05): 41-43.

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摘要: 目的观察松花粉提取物对大鼠实验性高脂血症的预防功能，为松花粉提取物的应用提供实验依据。方法 Wistar 大鼠84 只，随机分为正常对照组、松花粉提取物0. 3、0. 15 和0. 075 g /kg 组、辛伐他汀2 mg /kg 组、溶媒对照组及高脂模型组。正常对照组，饲喂正常饲料; 各给药组在饲喂高脂饲料同时，灌胃( ig) 给予相应的药物，溶媒对照组灌胃等容积的葡萄籽油; 高脂模型组饲喂高脂饲料同时，灌胃等容积蒸馏水。实验周期为8 周，末次给药后 12 h，检测血清中TC、TG、LDL-C 和HDL-C 含量。结果松花粉提取物各组动物血清中TC、TG 和LDL-C 含量显著低于高脂模型组( P ＜ 0. 05 － 0. 01) ; 松花粉提取物0. 3 g /kg 和0. 15 g /kg 组动脉粥样硬化指数低于高脂模型组 ( P ＜ 0. 05) 。结论松花粉提取物对高脂饲料诱发的大鼠实验性高脂血症有一定的预防功效。

蚌埠医学院实验动物屏障系统的科学管理初

劳荃蘅, 刘雷, 刘民

2013, 30(05): 41-54.

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摘要: 随着实验动物学科的发展，许多实验动物工作单位投入大量资金建立屏障系统用来改善动物实验环境。根据我校实验动物中心屏障系统运行情况，参照国家有关实验动物标准，建立了一套行之有效的屏障环境实验室运行管理规范。针对高等医学院校屏障系统开放性动物实验室管理的特殊性，在实践经验的基础上，从规章制度、人员、动物、设施等几个方面总结了屏障系统开放性动物实验室的管理经验，提高医学院校屏障系统管理水平。

高龄五指山小型猪近交系血液生化指标测定

黄雷, 牟玉莲, 杨述林, 王辰, 程玉柱, 徐盼, 冯书堂

2013, 30(05): 44-47.

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摘要: 目的了解猪龄和性别对五指山小型猪( WZSP) 近交系血液生化指标的影响。方法WZSP 近交系F17、F18 6 月龄青年猪34 头( 7♂，27♀) ，5—6 高龄猪21 头( 8♂，13♀) ，禁食12 h 后经由前腔静脉采血，用全自动生化分析仪检测血液生化指标。结果青年猪和高龄猪有部分血液生化指标具有性别差异( P ＜ 0. 05) ，其中青年猪有3 项高龄猪有7 项; 青年猪和高龄猪有16 项血清生化指标具有差异( P ＜ 0. 05) 。结论WZSP 近交系血液生化指标有着明显的年龄差异，这对选用高龄猪作为人类老年化动物模型提供了基础参考数据。

实验豚鼠饲养管理方法探讨

左红梅1, 许立拔, 张首亚, 关业枝, 王珑

2013, 30(05): 48-51.

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摘要: 动物饲养条件能够影响实验动物的生长发育、生理功能与机体代谢，从而影响到实验结果的真实性、准确性和科学性。豚鼠是试验研究中用途较多的动物之一，但因其活动反应敏感，且具有一些特殊的生物学特征和生理解剖特点，因此，对豚鼠的实验室饲养和管理有一些特殊的要求，受到科研工作者的关注和重视。

自然杀伤细胞受体与功能的研究进展

杨超, 韩凌霞, 陈洪岩

2013, 30(05): 55-58.

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摘要: 自然杀伤( natural killer，NK) 细胞是由多种亚类组成的淋巴细胞，具有多种不同受体，表现出多种功能，同时具有先天性免疫细胞和后天免疫细胞，特别是杀伤性T 细胞的特性，在免疫记忆、自然杀伤、抗病毒和抗肿瘤方面都有重要作用。本文综述了NK 细胞的分类、受体和功能的研究进展。

水生动物用于科学实验的最新进展

陶宏婷, 吴端生

2013, 30(05): 59-64.

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摘要: 随着科学技术的发展，越来越多的水生动物被用于科学实验。本文根据近5 年来发表的文献，综述了斑马鱼、剑尾鱼、稀有鮈鲫、鲤鱼、鲫鱼、草鱼、非洲爪蟾、海蛙、文昌鱼等水生动物作为实验材料开展的生命科学基础研究、人类疾病动物模型研究、水产动物疾病模型研究、药物筛选、水产食品安全监测、环境监测、化学品标准测试和水产动物药品与饲料研发的最新进展。

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