当期目录

2021年 第38卷 第6期    刊出日期：2021-12-28

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实验动物行业兽医现状分析 

许虎峰, 孙晨阳

2021, 38(6):  1. 

摘要 ( )  

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实验动物行业中,兽医体现在实验动物相关工作中的每一个环节,包括实验动物的日常管理、动物实验的设计、实验过程中动物健康保障和护理、实验动物福利的监督和管理、动物实验技术的应用、实验动物取材、施行安死术等。 通过参阅相关文献资料,结合自身工作总结,就目前实验动物兽医现状进行分析,供各位同仁以参考。

柚皮苷对DSS诱导结肠炎小鼠肠道菌群的影响

张伟东, 徐阳, 郑路, 等

2021, 38(6):  5. 

摘要 ( )  

相关文章 | 计量指标

目的 探究柚皮苷( Naringin,NG)对 DSS 诱导的结肠炎小鼠肠道菌群的影响。 方法 用 C57BL / 6 雄性小鼠构建动物模型,将 15 只小鼠分为对照组、模型组和 NG 组,每组 5 只。 除对照组外,其它两组给予 4% ( m / v) DSS 自由饮用,第 2 天给予 NG 组小鼠 NG 干预。 第 9 天处死小鼠,留取结肠和粪便。 Western blot 检测炎症分子蛋白磷酸化核因子-κB-p65( p-NF-κB-p65)和凋亡蛋白 Bcl-2。 PCR-变性梯度凝胶电泳( PCR-DGGE) 技术分析小鼠肠道菌群结构。 结果 模型组 p-NF-κB-p65 和 Bcl-2 蛋白表达与对照组比较,有显著差异( P<0. 01) ,且 NG 干预后有不同程度的改变;对 PCR-DGGE 中的条带通过非加权成对算术平均( UPGMA)算法进行聚类分析,结果显示各组小鼠结肠菌群结构具有显著差异。 结论 NG 可以有效改善 DSS 诱导的结肠炎症状,改善小鼠肠道菌群。



糖氧剥夺对大鼠脂肪干细胞自噬和成脂的影响

袁志坚, 吴小瑜, 何文涓, 丁亚明, 钟晓春

2021, 38(6):  11. 

摘要 ( )  

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目的 研究大鼠脂肪干细胞( adipose derived stem cells,ADSC)及糖氧剥夺下,细胞自噬和对诱导分化成脂的影响。 方法常规制备 ADSC, 设 置 对 照 组 ( G 组 ) 、 少 糖 组 ( SG 组 ) 、 缺 氧 组 ( G + CoCl2 组 ) 、 缺氧少糖组( SG+CoCl2 组)和自噬阳性对照组( EBSS 组) 。 设置不同培养时间,MTT 检测各组 ADSC 存活情况;Western blot 分析细胞自噬及成脂诱导油红“ O”染色与比色。 结果 不同培养时间,ADSC 细胞均可增殖。 培养 24 h,各组细胞之间无差别( P>0. 05) ,但培养 48 h 和 72 h,G 组细胞增殖明显高于其它三组( SG 组、G + CoCl2 组和 SG+CoCl2 组) ,P<0.05;Western blot 分 析, EBSS 组、G 组 和 SG 组 的自噬相关蛋白 Ⅰ 型 ( LC3-Ⅰ ) 明显弱于自噬相关蛋白Ⅱ 型( LC3-Ⅱ ) ,且 G+CoCl2 组和 SG+CoCl2 组的 LC3-Ⅰ 明显高于 EBSS 组;成脂诱导实验中,G 组油红“ O” 比色值最高,与其它组比较均有统计学差异( P<0. 05) 。 结论 ADSC 具有较强的细胞自噬作用,推测在缺糖缺氧条件下,通过抑制细胞自噬,降低 ADSC 存活率以及诱导分化成脂率。



射干止咳胶囊抗炎作用初探

包玉龙, 甘雨 范英兰, 朱竟赫, 武晓琳, 刘禾, 吴怡, 李国信

2021, 38(6):  16. 

摘要 ( )  

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目的 探讨射干( Belamcanda chinense)止咳胶囊抗炎作用及相关机制。 方法 采用小鼠耳肿胀实验和大鼠肉芽肿实验,观察射干止咳胶囊的抗炎作用,并通过检测经脂多糖( LPS)诱导的肺损伤小鼠血清中白介素 6( IL-6)及肿瘤坏死因子 α( TNF-α)水平,推测其可能的抗炎作用机制。 结果 与空白对照组比较,射干止咳胶囊低、中、高剂量组均能明显降低小鼠耳肿胀度程度,差异有显著意义( P< 0. 01 ~ 0. 05) ;与模型对照组相比,射干止咳胶囊低、中、高剂量组能够明显降低大鼠肉芽肿的质量,差异有统计学意义( P< 0. 01 ~ 0. 05) ;与模型对照组比较,射干止咳胶囊低、中、高剂量组能够明显降低小鼠血清 IL-6 和 TNF-α 水平,差异有统计学意义( P< 0. 01 ~ 0. 05) 。 结论 射干止咳胶囊具有一定的抗炎作用,其作用机制可能与抑制炎症因子合成及释放有关。



miR-143-3p通过调节TGIF2的表达在甲状腺癌中的作用研究

李佳, 李涛, 潘婧, 赵茜, 刘莉

2021, 38(6):  20. 

摘要 ( )  

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目的 探究过表达 miR-143-3p 对甲状腺癌( thyroid cancer,TC) 细胞的影响及其作用机制。 方法 Real-time PCR 分析正常甲状腺上皮细胞和不同 TC 细胞中 miR-143-3p 的表达。 Targetscan 网站和双荧光素酶报告系统验证miR-143-3p 和 TGIF2 3′UTR 的靶向关系;Real-time PCR 检测 miR-143-3p 和 TGIF2 mRNA 的过表达效率;过表达成功后,将 CAL-62 细胞分为对照组、miR-143-3p mimic 组、pcDNA-TGIF2 组和 miR-143-3p+TGIF2 组,ELISA 检测细胞上清液中诱导型一氧化氮合酶( iNOS) 、白细胞介素( IL) -1β 和 IL-6 的含量;试剂盒检测超氧化物歧化酶( SOD) 水平,免疫荧光检测活性氧( ROS)产生;显微观察干细胞成球,Western blot 检测 TGIF2、p-P65、富含亮氨酸重复序列的 G 蛋白偶联受体5 ( LGR5) 和 八聚体结合蛋白4 ( OCT4 ) 蛋 白 表 达。体内构建裸鼠移植瘤, 检测过表达miR-143-3p 对肿瘤生长的影响。 结果 miR-143-3p 在 TC 细胞中的表达明显低于正常甲状腺上皮细胞( P< 0. 05) 。Targetscan 网站和双荧光素酶报告系统证实 miR-143-3p 与 TGIF2 存在靶向关系。 miR-143-3p mimic 组 miR-143-3p的表达上调( P<0. 05) ,TGIF2 mRNA 和蛋白表达下调( P<0. 05) ,iNOS、IL-1β 和 IL-6 含量明显降低( P<0. 05) ,抗氧化能力显著下降 ( P < 0. 05) , 干 细 胞 成 球 能 力 降 低 ( P < 0. 05) , p-P65、 LGR5 和 OCT4 的蛋白表达均显著下调( P<0. 05) 。 pcDNA-TGIF2 组的结果相反,过表达 miR-143-3p 能显著抑制 pcDNA-TGIF2 的促癌作用。 裸鼠移植瘤模型表明过表达 miR-143-3p 能够减小肿瘤的质量和体积,下调瘤组织中 TGIF2 和 OCT4 的表达( P<0. 05) 。 结论过表达 miR-143-3p 能够通过下调 TGIF2 的表达抑制 TC 细胞促炎因子水平、抗氧化能力和干细胞样特性,并抑制裸鼠肿瘤的形成。



黄甲软肝颗粒对人血白蛋白致免疫性肝纤维化模型大鼠的影响

高晓新, 朱春玥, 张茜茜, 王佳帅, 曹春然, 胡宇驰, 李雪梅

2021, 38(6):  28. 

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目的观察黄甲软肝颗粒对人血白蛋白( human serum albumin,HSA)所致的Wistar大鼠免疫性肝纤维化的保护作用。方法采用体内实验,将72只雄性大鼠随机分成阴性对照组、模型组、阳性药组、黄甲软肝高、中以及低剂量组剂量组,建立HSA致大鼠免疫性肝纤维化模型,计算肝、脾系数,测定血清中肝纤维化标志物含量、丙氨酸氨基酸转移酶( ALT) 、天门冬氨酸转移酶( AST)等相关生化指标,并检查肝脏病理形态改变。结果与模型组比较,黄甲软肝三个剂量组大鼠血清透明质酸( HA)含量显著降低;高剂量组血清层粘连蛋白( LN) 、Ⅲ型前胶原( PCⅢ )水平、ALT 和 AST 显著降低;高剂量组及中剂量组肝纤维化病变明显减轻。 结论  黄甲软肝颗粒能显著改善 HSA 所致的免疫性肝纤维化大鼠的肝纤维化程度。





两种国产与一种进口小鼠肝炎病毒ELISA抗体检测试剂盒的比较研究

方姣, 梁锦宁, 方茜, 朱康立, 黄海娜, 罗秋琳, 潘炫孝, 郭晓萍

2021, 38(6):  33. 

摘要 ( )  

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目的 本研究拟对比小鼠肝炎病毒( MHV)抗体 ELISA 检测试剂盒的敏感性、特异性、精密性和可信度,以筛选出既经济又可靠的检测试剂盒。 方法 选择两种国产与一种进口的 ELISA 试剂盒检测 MHV 抗体和以下 5 种病毒阳性血清:小鼠仙台病毒(SV)、小鼠肺炎病毒(PVM)、小鼠细小病毒(MVM)、小鼠鼠痘病毒(MPV)及小鼠呼肠孤Ⅲ型病毒(Reo-3),并进行敏感性、特异性、精密性及可信度实验比较。 结果 ELISA 国产 B 试剂盒的敏感性是国产 A 试剂盒的 400 倍,进口试剂盒的敏感性是国产 B 试剂盒的 4 倍;特异性实验显示国产 A 试剂盒与 MPV 无交叉反应,但与其他 4 种病毒阳性血清均有交叉反应,国产 B 试剂盒和进口试剂盒与 MPV 以外的 5 种病毒阳性血清均无交叉反应;精密性实验显示进口试剂盒批内平均变异系数为 5. 667%,国产 A 和国产 B 试剂盒批内平均变异系数分别为13. 825%和 13. 827%;可信度实验显示国产 B 试剂盒和进口试剂盒的阳性和阴性检测符合率均为 100%,国产 A 试剂盒的阳性和阴性检测符合率分别为 40%和 80%。 结论 ELISA 检测国产 B 试剂盒除敏感性和精密度低于检测的进口试剂盒外,其特异性和可信度均良好,国产 A 试剂盒的敏感性、特异性、精密性和可信度均低于检测的进口试剂盒。



妊娠SD大鼠血糖指标值的系统评价和单组连续变量Meta分析 

江心泳, 葛莉, 赖玉婷, 黄萍萍, 陈凡, 庞书勤, 于红虹

2021, 38(6):  37. 

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目的 确定妊娠 SD 大鼠空腹血糖( FBG)和空腹胰岛素( FINS)指标的参考值上限。 方法 检索中国知网、万方、维普、Web of Science、The Cochrane Library、Scopus、PubMed、EMBase 和MEDLINE 共 9 个中英文数据库中与妊娠SD大鼠血糖有关文献,检索时限为 2014 年 1 月—2020 年 12 月。 严格按照纳入和排除标准,对检索到的文献进行筛选和数据提取。 采用 SYRCLE 动物实验偏倚风险评估工具进行文献质量评价,以加权均数差( WMD) 和 95%可信区间( CI)作为合并统计量,应用 STATA 15. 0 统计软件进行单组连续变量 Meta 分析。 结果  纳入37篇文献,包含428只大鼠。系统评价和 Meta 结果 显示妊娠大鼠FBG 和 FINS 的参考值上限分别为妊娠第0周的5. 51 mmol / L( FBG ) 及 无 统 计 数 据 ( FINS ) ; 第 1 周 6. 92 mmol / L ( FBG ) 和 15. 66 mIU / L ( FINS ) 、 第2周的6. 64 mmol / L( FBG)和 15. 98 mIU / L( FINS) 及第 3 周的 7. 04 mmol / L( FBG) 和 15. 63 mIU / L( FINS) 。 结论 通过Meta 分析确定妊娠 SD 大鼠 FBG 和 FINS 的参考值上限,为相关实验提供依据,以期减少实验误差。



SPF 级 SD 与 Wistar大鼠不同饲养周期和性别部分生物学指标的比较分析 

泰刚, 郭东, 杨志敏, 李洋, 张蕻, 李琛, 王婷婷, 路超, 赵思俊, 张俊凤 杨国伟

2021, 38(6):  47. 

摘要 ( )  

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目的 考察不同饲养周期和不同性别的 SPF 级 SD 大鼠与 Wistar 大鼠的部分生理及生化指标的生物学差异,建立不同品系及不同饲养周期大鼠血液生理及生化指标的正常参考值范围。 方法 5 ~ 6 周龄 SPF 级 SD 大鼠与Wistar 大鼠各 300 只,雌雄各半,饲养于屏障环境中,随机分为饲养 4 周组、12 周组及 24 周组,并饲养相应的周数。用全自动血细胞和生化分析仪进行血液生理及生化指标检测。 结果 SD 大鼠在 12 周组雌鼠和 24 周组雌、雄鼠的白细胞计数( WBC)总数显著高于 4 周组大鼠( P<0. 01) ,12 周组雄鼠的 WBC 总数高于 4 周组大鼠(P<0. 05),4 周组和 12 周组的雌鼠 WBC 总数低于雄鼠( P < 0. 05)。 不同饲养周期和性别的 Wistar 大鼠血液学指标无显著差异(P>0. 05)。 SD 大鼠 4 周组血清碱性磷酸酶(ALP)显著高于 12 周组及 24 周组(P<0. 01),且 4 周组雌鼠 ALP 低于雄鼠(P<0. 05),12 周组和 24 周组雌鼠 ALP 显著低于雄鼠(P<0. 01);12 周组和 24 周组 SD 大鼠的甘油三酯( TG)均高于 4 周组(P<0. 05)。 Wistar 雌性大鼠 12 周组和 24 周组雌、雄鼠的 ALP 均显著高于 4 周组( P< 0. 01),12 周组雄鼠ALP 高于 4 周组(P<0. 05)。 4 周组和 24 周组 Wistar 雌鼠 ALP 显著高于雄鼠( P<0. 01),12 周组雌鼠 ALP 高于雄鼠(P<0. 05)。 结论 不同饲养周期、不同性别及不同品系的 SPF 级大鼠,血液生理及生化指标具有一定差异性。



牛蛙替代蟾蜍在生理教学实验中的应用研究

徐彩云, 李天舒, 李晓慧, 于慧美, 郭新荣, 张大维, 崔佳润

2021, 38(6):  53. 

摘要 ( )  

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目的 比较牛蛙替代蟾蜍在生理学教学的实验效果,以探索这种实验动物替代的可行性。 方法 对牛蛙和
蟾蜍分别进行蛙心灌流实验和坐骨神经-腓肠肌刺激收缩实验。 结果 蛙心灌流实验中,牛蛙和蟾蜍离体心脏活
动在 Na+ 、Ca2+ 、K+ 、重酒石酸去甲肾上腺素( NA) 、氯化乙酰胆碱( Ach) 、乳酸( LA) 及碳酸氢钠( NaHCO3 ) 作用的影
响,变化整体趋势一致;坐骨神经-腓肠肌相关实验中,肌肉收缩最小时的刺激强度是 0. 1 V;0. 15 V 左右的刺激强
度可使肌肉收缩幅度达到最大值且保持不变;伴随着刺激逐渐增强,骨骼肌由开始的单收缩,转变为不完全强直收
缩,最后变为强直收缩。 受到刺激后,牛蛙与蟾蜍神经干动作电位传导速度分别 16. 6 m / s 和 13. 16 m / s。 牛蛙与蟾
蜍在上述实验中,结果均无显著性差异( P>0. 05) 。 结论 采用牛蛙替代蟾蜍开展生理学教学实验是切实可行的。



慢性心力衰竭兔心室结构重构对心电生理功能产生的影响及意义 

安晓霞, 贺梅年, 何秀英

2021, 38(6):  59. 

摘要 ( )  

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目的 探讨慢性心力衰竭( CHF) 兔心室结构重构对心电生理功能的影响及意义。 方法 雄性新西兰兔 32只,随机分为对照组( n = 15)和 CHF 组( n = 17) ,CHF 组采用经兔耳静脉注射异丙肾上腺素( ISO) 制备 CHF 模型,最终造模成功 15 只。 对照组给予相同体积的 0. 9% 生理盐水,最终 12 只进入实验。 采用超声心动图监测两组兔M 型心功能并记录Ⅱ 导联体表心电图,分别记录左心室射血分数( LVEF) 、主动脉最大流速( Avmax) 、左心室舒张末期内径( LVEDd) 、左心室收缩末期内径( LVESD) 、左室短轴缩短率 ( LVFS) 、室间隔厚度( IVST) 、左心室舒张末期容积( LVEDV) 、左心室收缩末期容积( LVESV) 、心率、PR 间期、QT 间期和 ST 段,评价心电生理功能变化。 程控刺激法观察刺激周长( BCL)为 150 ms 和 200 ms 时,心室有效不应期( ERP150 和 ERP200 ) 以及各自有效不应期离散度( dERP150 和 dERP200 ) 。 评价短阵快速刺激法诱发室性心律失常( VA) 的 BCL 及诱发率。 结果 与对照组相比, CHF 组兔的 LVEF、LVFS 及 Avmax 显著下降,LVEDd 和 LVESD 明显延长, IVST 较对照组变薄,LVEDV 和 LVESV 明显增大,差异极显著( P< 0. 01) ;HR 明显减慢,PR 及 QT 间期显著延长,ST 段明显下移,差异极显著( P < 0. 01) ; ERP 150 和 ERP200 明显延长,且 dERP150 和 dERP200 显著增大,诱发 VA 的 BCL 明显延长,VA 诱发率明显高于对照组,差异极显著( P<0. 01) 。 结论 CHF 兔心室结构发生显著的重构,心室电生理异常改变,二者相互作用,使折返性 VA 诱发率增加。


实验动物病理组织切片质量评价体系与回顾性分析 

乔欣, 李梦, 焦昆, 李胜利

2021, 38(6):  63. 

摘要 ( )  

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目的 分析前期制作的实验动物病理切片质量,为提高切片制作水平提供借鉴及指导。 方法 随机选取1800 件切片作为研究对象,根据相关质量控制标准评分,统计坏片率并对坏片原因予以分析。 结果 切片中,优片率为 90. 17% (1 623 / 1 800) ,坏片率为 9. 83% (177 / 1 800) 。 其中,甲级片占比为 31. 50% ,坏片率在可接受范围之内。 结论 规范取材操作,根据实验动物品种、年龄等因素,合理选择固定液和固定时间,严格控制包埋过程,提升切片技术,适时更换试剂试药等有助于改善实验动物病理切片质量,进一步提高甲级片,助力科学研究工作。



实验牛微生物学和寄生虫学等级及监测地方标准的研究和制定 

李昌文, 朱远茂, 夏长友, 陈洪岩

2021, 38(6):  66. 

摘要 ( )  

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标准化是实验动物的根本属性,质量标准是实验动物质量控制体系中的重要组成部分,实验动物微生物和寄生虫控制水平是实验动物分级的根本依据。 本文介绍了黑龙江省地方标准《实验动物牛微生物学等级及监测》 和《实验动物牛寄生虫学等级及监测》的编制背景、实验牛等级设定、检测项目的选择、检测方法、预期社会效益等主要内容。 本标准的制定可为黑龙江省农业实验动物新资源提供标准及技术保障、为公共卫生和生物安全提供重要的基础条件、为重大动物疫病研究提供高质量实验动物以及为生物制品的研发、生产及检定提供标准化实验动物,进而推动我省及全国畜牧行业技术进步及畜牧业的健康发展。



中央排风通气笼具( EVC)和独立通气笼具( IVC)的技术指标和参数评价 

耿祥飞, 王鹏, 刘鹏杰, 王树新

2021, 38(6):  73. 

摘要 ( )  

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目的 探讨两种密闭式笼具系统:中央排风通气笼具( EVC)和独立通气笼具( IVC)的性能比较。 方法 通过对 EVC 和 IVC 的占地面积、使用操作流程(换笼流程及清洗流程) 、损坏率、整体消毒清洁流程、小鼠饲养环境条件(换气次数、风速及氨浓度) 、笼盒内噪音、断电或机械故障的报警系统等指标进行对比评价。 结论 EVC 笼架占地面积小、节省空间及更容易清洗,观察、换笼操作相对简单,配件损耗低且能耗更低,但 IVC 清洗及隔音效果表现更佳。 结论 EVC 是一种节省空间、节能、环保且绿色的优化方案。



基因工程小鼠剖宫产生物净化技术的研究 

张曼, 彭丽娜, 高则发, 徐汪节, 王朝霞

2021, 38(6):  76. 

摘要 ( )  

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目的改进剖宫产手术,提高剖宫产生物净化效率,获得SPF级基因工程小鼠。方法结合小鼠妊娠时间,触诊判断胎鼠发育情况推测剖宫产手术时间,优化剖宫产手术流程,缩短手术时间以提高手术效率;改进剖出仔鼠由SPF级ICR小鼠代乳以提高成活率;采用统计学方法对剖宫产净化数据进行分析。结果以触摸胎鼠四肢清晰,头部与躯干长度相似,且胎位朝下为剖宫产手术最佳时间,改进手术细节使成功率达( 97. 9± 8. 25) % ;选择分娩时间和手术时间间 隔 最 小 的ICR母鼠代乳,间隔时间< 24 h,可提高仔鼠的离乳率,平均窝离乳率为91. 2% ;经剖宫产净化技术成功获得的仔鼠检测微生物级别符合SPF级。结论 提高实验小鼠的净化效率,为基因工程小鼠的生物净化奠定基础。剖宫产净化技术的优化可显著。




实验用猫的应用及标准化 

陈军, 王亮, 邱泽文, 詹红微, 李慧玲, 陈大朋, 王福金, 王爱国, 王靖宇

2021, 38(6):  80. 

摘要 ( )  

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猫作为中型实验用动物,拥有独特的生理学及解剖学特性,被广泛应用于生物、医药等领域的研究。 猫可用于制备多种疾病动物模型,在神经系统、降压实验等研究方面,具有不可替代的作用。 近年来,我国在猫的实验动物标准化方面虽有所进展,但相对缓慢。 本文主要对实验用猫的应用现状和国内外实验用猫标准化进展进行探讨。