当期目录

2020年 第37卷 第06期    刊出日期：2020-12-28

上一期    下一期

研究报告

过表达 miRNA-320 对顺铂诱导卵巢早衰大鼠卵巢功能的影响

赵丽, 刁瑞英, 蔡昭炜, 李青洋, 陈博, 李雪玲, 王志鸣

2020, 37(06):  1. 

摘要 ( )   HTML  

相关文章 | 计量指标

摘要:目的 探讨过表达 miRNA-320 对顺铂诱导卵巢早衰大鼠卵巢功能的影响。 方法 选择清洁级 SD 雌性大鼠32 只,随机分为 4 组:正常对照组、模型组、阴性对照组和 miRNA-320 过表达组,每组 8 只。 在实验过程中,每天观察各组大鼠饮食、活动和体毛等外在表现的差异。 采用 ELISA 检测各组大鼠血清中 E2、FSH、LH 的含量;采用 HE染色,光镜下观察各组大鼠卵巢组织形态学变化;采用 PCR 检测各组大鼠卵巢组织 miRNA-320、PGRMC1、BMP15的表达水平;采用 Western blot 检测各组大鼠卵巢组织中 PGRMC1、BMP15 的蛋白表达水平。 结果 与正常对照组相比,模型组大鼠活动迟缓、无精神、反应迟钝、食欲下降、体质量下降以及体毛暗淡无光泽;组织形态学分析表明,卵巢组织明显萎缩、皮质变薄、闭锁卵泡数目多以及间质纤维组织增多;血清 FSH、LH 显著升高,而血清 E2 及卵巢组织中 PGRMC1、BMP15 的蛋白和 mRNA 表达水平均降低,差异具有统计学意义( P< 0. 05) 。 与阴性对照组相比,miRNA-320 过表达组大鼠活动量增加、反应较为敏捷、进食增多、体毛逐渐有光泽;间质纤维化明显减轻、成熟卵泡数量明显增加、黄体数增多;血清 E2 的含量、卵巢组织中 PGRMC1、BMP15 的蛋白和 mRNA 的表达水平均升高,而FSH、LH 的含量降低( P<0. 05) 。 结论 顺铂可诱导卵巢早衰大鼠卵巢功能障碍,过表达 miRNA-320 可改善顺铂诱导的卵巢早衰大鼠的卵巢功能。


光电结合检测大鼠原代神经元胞内钙离子浓度方法的建立

刘丽娜, 许晴, 魏华, 李华, 薛奋勤, 薛冰

2020, 37(06):  7. 

摘要 ( )   HTML  

相关文章 | 计量指标

摘要:目的 利用电刺激结合转盘共聚焦显微镜检测胞内钙离子浓度变化。 方法 钙离子变化是神经元发挥功能的关键因素。 本实验利用荧光探针 fluo-4AM 标记钙离子,电刺激兴奋神经元,转盘共聚焦技术检测胞内荧光强度的快速变化。 结果 成功制备了刺激电极,并结合转盘共聚焦系统检测到刺激前 10%左右的原代神经元有自发的钙离子升高,电刺激后,胞内钙离子迅速上升,刺激结束后,仍有周期性的升高,但幅度降低。 结论 电刺激结合转盘共聚焦检测到胞内刺激前后钙离子的快速变化。




卵巢切除小鼠冠状动脉封堵诱导心肌梗塞模型的建立与评估

王菲, 胡威, 张鹏, 王晓武, 师长宏, 刘宏斌

2020, 37(06):  11. 

摘要 ( )  

相关文章 | 计量指标

摘要:目的 建立模拟绝经后妇女发生心肌梗塞( MI) 的小鼠模型。 方法 将雌性小鼠卵巢切除( OVX) 后进行左冠状动脉前降支封堵诱导心肌梗塞发生;通过超声、血流动力学、形态学分析、免疫组织化学和 TUNEL 染色评估小鼠心脏功能和心肌梗塞面积的变化及心肌纤维化的程度。 结果 卵巢切除联合心肌梗塞可加重心脏功能受损,显著增加心肌纤维化和心肌梗塞面积,可诱导细胞凋亡和 TGF-β1 表达,血清中促炎细胞因子 TNF-α 和 IL-10 水平显著增加。 结论 成功建立模拟绝经后女性发生 MI 的小鼠模型,并对其功能和组织学特征进行评估。

HbA1c 不适于小型猪血糖控制状态的监控

贾云晓, 赵玉琼, 牛苗苗, 袁记方, 相磊, 戴鑫, 陈华

2020, 37(06):  17. 

摘要 ( )  

相关文章 | 计量指标

摘要:目的 糖化血红蛋白( HbA1c)是临床上常用的监测血糖控制状态的指标。 我们在巴马小型猪糖尿病模型的研究中,通过检测血液糖化血红蛋白含量,探讨 HbA1c 这一指标能否用于小型猪血糖控制状态的监控,以期为小型猪糖尿病研究提供基础数据。 方法 将 14 头小型猪随机分为 3 组,分别为对照组、高脂饲喂+链脲佐菌素( HFD+STZ)组和高胆固醇高脂饲喂+链脲佐菌素( HCFD+STZ) 组,对照组常规饲料喂养,HFD+STZ 组和 HCFD+STZ 组在高脂 / 高胆固醇高脂饲喂 3 个月后静脉注射 90 mg / kg 的 STZ,此后继续高脂 / 高胆固醇高脂饲喂 6 个月,实验期间每月检测空腹血糖( GLU) 、空腹胰岛素( INS) 、糖化血红蛋白、肝和肾功能指标( ALT、AST、CRE、BUN) 。 结果 2 个实验组每组各有 4 头小型猪在应用 STZ 后血糖显著升高,并持续至实验结束。 而 HbA1c 测定值各组之间差异不大。 其原因推测与小型猪红细胞对葡萄糖通透性较低有关。 结论 HbA1c 不适于小型猪血糖控制状态的监控。

南蛇藤醇介导的 PTEN 过表达增强顺铂对食管癌细胞的化学敏感性并抑制裸鼠成瘤能力

高元喜, 张炜, 王玉霞, 严佳丽, 刘新宇

2020, 37(06):  22. 

摘要 ( )  

相关文章 | 计量指标

摘要:目的 探究南蛇藤醇介导的 PTEN 过表达对食管癌细胞化学敏感性的影响。 方法 构建食管癌肿瘤模型小鼠,使用南蛇藤醇(1、5 mg / kg)和顺铂(5 mg / kg)单独或联合对其进行瘤内治疗,观察其肿瘤体积变化和检测 30 d时肿瘤质量;免疫组化检测 Ki67,VEGF 和 Caspase 3 的表达情况。 用不同剂量的南蛇藤醇( 0. 5、1、2. 5、5、10、20、50、80、100 μmol / L)处理人食管上皮细胞系( HET-1 A) 24 h,CCK8 分析检测细胞存活率。 顺铂( 4 μg / mL) 预处理EC109 / DDP 细胞后分别用不同剂量的南蛇藤醇( 1、2. 5、5 μmol / L) 处理 EC109 / DDP 细胞,对照组用 PBS 代替顺铂,CCK8 检测细胞存活率;Transwell 检测细胞的侵袭情况,Western blot 检测细胞中 EMT 相关蛋白以及凋亡相关蛋白表达情况,Hoechst 染色检测细胞调亡情况。 结果 南蛇藤醇 1 mg / kg 和 5 mg / kg 处理后的食管癌肿瘤模型小鼠体内肿瘤质量和体积均显著降低( P< 0. 05) ;PTEN 蛋白表达水平显著升高( P< 0. 05) ;Ki67,VEGF 和 Caspase 3 阳性细胞数均显著减少( P<0. 05) 。 用南蛇藤醇(1、2. 5、5 μmol / L) 处理后,与对照组比较,EC109 细胞存活率和侵袭力均显著降低( P<0. 05) ; Ki67、PCNA、N-cadherin 和 Vimentin 蛋白表达水平显著降低( P<0. 05) ;E-cadherin、cleavedPARP 和 cleaved caspase 3 蛋白表达水平以及细胞凋亡率显著升高( P< 0. 05) ;干扰 PTEN 后细胞存活率以及侵袭力显著升高( P<0. 05) ;凋亡率显著降低( P<0. 05) 。 结论 南蛇藤醇介导的 PTEN 过表达增强顺铂对食管癌细胞EC109 生长、侵袭和 EMT 的抑制作用,促进顺铂诱导的食管癌细胞 EC109 凋亡,从而增强顺铂对食管癌细胞的化学敏感性。

复方中药对流感病毒 A / PR / 8 / 34( H1N1)感染小鼠淋巴细胞功能和细胞因子的影响

王学文, 刘佐民, 王劲松, 李永清

2020, 37(06):  30. 

摘要 ( )  

相关文章 | 计量指标

摘要:目的 观察复方中药对流感病毒 A / PR / 8 / 34( H1N1) 感染小鼠淋巴细胞功能和细胞因子的影响。 方法 90只 BALB / c 小鼠随机分为 6 组,每组 15 只,分别为空白对照组、模型对照组、盐酸金刚烷胺对照组( 100 mg / kg) 、复方中药高剂量组(1. 5 g / kg) 、中剂量组(0. 75 g / kg)与低剂量组(0. 375 g / kg)组。 中药组连续灌胃 2 d 后,空白对照组滴鼻生理盐水,其他 5 组小鼠滴鼻流感病毒感染建立流感病毒小鼠模型,模型建立 4 h 后空白对照组和模型对照组灌胃去离子水,药物组灌胃不同剂量药物,连续 5 d。 灌胃结束后无菌取血,小鼠安乐死,取胸腺和脾脏,计算胸腺指数和脾脏指数;采用 MTT 测定各组的 T、B 淋巴细胞转化率;ELISA 检测肺组织中的细胞因子 IL-6、IL-10、TNF-α 和 IFN-γ 水平。 结果 与空白对照组相比,模型对照组胸腺指数和脾脏指数,T、B 淋巴细胞 A 值, IL-10 和 IFN-γ显著下降, TNF-α 和 IL-6 显著升高( P<0. 01) ;与模型对照组相比,复方中药中剂量组胸腺指数和脾脏指数,T、B 淋巴细胞 A 值,IL-10 和复方中药高剂量组 IFN-γ 显著增高,复方中药中剂量组 IL-6 显著下降( P < 0. 05) ,复方中药中、低剂量组 TNF-α 显著下降,IFN-γ 显著升高( P<0. 01) 。 结论 复方中药通过调节机体淋巴细胞功能和细胞因
子分泌水平,从而改善肺部炎症,是治疗病毒性流感的作用机制之一。

猕猴从幼年到老年的卵巢组织学变化

田川, 杨再玲, 朱向情, 李晔, 吕冠柯

2020, 37(06):  37. 

摘要 ( )  

相关文章 | 计量指标

摘要:目的 观察猕猴的卵巢组织从幼年到老年的变化情况,探索猕猴的卵巢随着年龄增长发生变化的机制,为卵巢衰老的研究提供组织学参考。 方法 (1)筛选幼年猕猴 3 只,青年猕猴 3 只,老年猕猴 3 只。 ( 2) 安乐死处理猕猴,取卵巢组织,电子天平称质量并拍照,横向切成 4 份,置于 4%多聚甲醛固定。 (3) HE 染色观察卵巢组织各级卵泡与结构变化;Masson 染色观察卵巢组织纤维化程度;Tunel 染色统计分析卵巢细胞的凋亡率;免疫组织化学染色统计血管个数。 结果 (1)幼年猕猴的卵巢脏器指数与青年猕猴的无显著差异,都高于老年猕猴的卵巢脏器指数。(2)幼年与青年猕猴的卵巢组织中可见原始、初级、次级,成熟卵泡;老年猕猴的卵巢局部只见闭锁卵泡,大部分被脂肪组织填充。 (3)幼年猕猴的卵巢纤维化程度高于青年猕猴,老年猕猴纤维化程度最高。 ( 4) 幼年猕猴卵巢细胞凋亡率与青年猕猴的无显著差异,都显著低于老年猕猴。 (5)幼年猕猴血管个数最多,青年猕猴多于高于老年猕猴。 结论 随着年龄增长,猕猴卵巢组织中卵泡数量逐渐减少、髓质被大量脂肪组织填充、间质排列散乱,这一生物学过程与卵巢纤维化程度增强、卵巢细胞凋亡率增加、血管个数减少相关。

和血明目片对激光诱导小鼠脉络膜新生血管的治疗作用

张宇飞，宋俊伯，危冬昱，龙盘，李曼红

2020, 37(06):  44. 

摘要 ( )  

相关文章 | 计量指标

摘要:目的 观察和血明目片对激光诱导小鼠脉络膜新生血管( choroidal neovascularization,CNV) 是否具有治疗作用。 方法 选取 8 周龄雄性 C57BL / 6 小鼠为实验动物。 CNV 小鼠进行 577 nm Nd:YAG 激光诱导( 能量 180 mW、光斑 100 μm、曝光时间 100 ms、光斑数 6 个) ,产生脉络膜新生血管后随机分为生理盐水组、小剂量组、中剂量组和大剂量组,每日进行生理盐水与和血明目片灌胃。 对照组小鼠除激光诱导外,其余操作同实验组小鼠。 对照组与生理 盐 水 组 生 理 盐 水 灌 胃 10 mL / ( kg· d ) , 小 剂 量 组、 中 剂 量 组 和 大 剂 量 组 分 别 给 予 0. 34 g / ( kg· d ) 、0. 68 g / ( kg· d) 、1. 36 g / ( kg· d)和血明目片灌胃,在干预后 1 周进行视网膜电流图、眼底荧光造影检查和脉络膜铺片新生血管染色。 结果 视网膜电流图结果显示各剂量和血明目片干预组的暗视 3. 0 反应 b 波幅值均高于生理盐水组( P<0. 05) ,且与和血明目片剂量呈正相关。 活体动物眼底荧光造影结果显示中剂量组和大剂量组眼底血管渗漏程度明显轻于生理盐水组( P<0. 05) 。 离体脉络膜铺片测量新生血管面积结果与眼底荧光造影结果基本一致。 结论 本研究从功能和形态两个方面证实了和血明目片对 CNV 小鼠病理损伤 CNV 具有一定的治疗作用,为下一步开展相关机制研究奠定了基础。

iRhom2^Uncv 小鼠乳腺发育障碍的转录组分析

尚艳姣, 周小军, 郭子潇, 袁征

2020, 37(06):  49. 

摘要 ( )  

相关文章 | 计量指标

摘要:目的 研究 iRhom2Uncv 小鼠乳腺表型相关的差异表达基因,为深入研究 iRhom2Uncv 小鼠乳腺发育障碍的相关机制提供靶点信息。 方法 对 12 周龄的野生型和 iRhom2Uncv 小鼠的乳腺组织进行 whole-mounts 染色,分析乳腺发育形态,收集乳腺组织进行转录组测序,筛选差异表达基因,ELISA 检测血清激素水平。 结果 与野生型小鼠相比,iRhom2Uncv 小鼠乳腺侧枝导管较稀疏,差异最显著的 18 个基因中有 6 个在 iRhom2Uncv 小鼠中表达上调,12 个表达下调。 其中 3 个催乳素家族基因在 iRhom2Uncv 小鼠中不表达,且在血清中几乎检测不到催乳素表达,而血清中的雌激素水平相比野生型小鼠较高。 结论 iRhom2Uncv 突变的小鼠存在乳腺发育障碍,可能与 iRhom2Uncv 小鼠中催乳素和 Zfp281 的缺失表达有关,生物信息学分析发现,iRhom2Uncv 小鼠神经发育可能存在不同于野生型小鼠的表型。

研究简报

微酸性次氯酸液对屏障设施动态环境杀菌效果的研究

白冰, 师长宏

2020, 37(06):  54. 

摘要 ( )  

相关文章 | 计量指标

摘要:目的 研究微酸性次氯酸液对细菌的杀灭效果,评估其雾化液对屏障设施动态环境的消毒效果,以期获得动态环境消毒方案。 方法 检测微酸性次氯酸液有效氯含量和 pH 值;分别用金黄色葡萄球菌和沙门菌标准株制备细菌悬液并制成菌片,并与微酸性次氯酸液作用后计算杀菌率;选择屏障设施进行微酸性次氯酸液喷雾消毒,作用不同时间后测量落下菌数,并计算杀菌率。 结果 微酸性次氯酸液有效氯含量为 6. 84× 10- 2 g / L,pH 值为 6. 24;微酸性次氯酸液与两种标准菌株作用 15 min 后杀菌率可达到 90%以上;屏障设施用微酸性次氯酸液喷雾 15 min,2 h杀菌率维持在 90% ,48 ~ 72 h 杀菌率低于 30% ;每日喷雾 1 次,工作 5 min,休息 5 min,持续 1 h,连续工作 21 d 后杀菌率为 60% ; 每日喷雾 2 次,每次连续 30 min 持续喷雾 21 d 后杀菌率达到 90%以上。 结论 微酸性次氯酸液对屏障设施具有良好的杀菌效果,长期使用杀菌率可达 90%以上,是一种高效安全的动态环境消毒方式。

高校实验动物行业非事业编制职工归属感调查及增强机制浅探

李胜利, 池亚菲, 孟霞, 卢静

2020, 37(06):  59. 

摘要 ( )  

相关文章 | 计量指标

摘要:归属感作为一种社会心理资源对高校非事业编制职工的思想和行为表现具有重要的影响。 本研究借鉴Goodenow 编制的归属感量表,从归属感、认同和学校依恋三个维度对实验动物行业非事业编制人员进行了调查。结果表明,实验动物行业非事业编制人员的归属感呈现出明显的两极分化现象:学历较低的工勤人员对学校的归属感较强而学历稍高的技术岗位人员归属感偏弱。 在对调研结果分析的基础上,提出提升高校实验动物行业非事业编制人员归属感的 3 条措施:激励政策公平化、激励方式丰富化和管理措施科学化。

小型啮齿类实验动物整体标本的制作及应用

刘莉, 罗晓玲, 张平, 王旖, 黎敏, 米本中

2020, 37(06):  62. 

摘要 ( )  

相关文章 | 计量指标

摘要:目的 通过对传统的小型动物标本制作方法进行了一些新的尝试与改进,形成了新的制作方法,提高实验动物利用率。 方法 本文以 KM 小鼠为例,仅仅除去颅腔、胸腔、腹腔内容物,保留皮毛、肌肉和骨骼,经过精心整形和固定后,采用 0. 4%的硫酸锌和 4%的甲醛配成混合溶液,加入氯化钾配制成饱和防腐溶液浸泡 20 d 后,取出清洗晾干处理,对颅腔填充胶泥,装上义眼即可制作成动物整体标本。 结果 本次实验动物标本制作的 KM 小鼠整体标本外部形态自然,无毒无异味,标本符合啮齿类动物的典型形态。 结论 小型啮齿类实验动物标本制作方法较传统的浸制标本或剥制标本制作简便,并且环保,实验材料易得,成本较低,可在教学、科学普及中推广使用。

不同血清型腺相关病毒在大鼠 DRG神经元转染效果的比较

杨帆, 杨艳, 王晓亮, 孙薇, 陈军

2020, 37(06):  66. 

摘要 ( )  

相关文章 | 计量指标

摘要:目的 比较不同血清型腺相关病毒( AAV5、AAV6、AAV8 和 AAV9) 对背根神经节( DRG) 初级感觉神经元的转导效能。 方法 将 24 只雄性 SD 大鼠随机分为 8 组,分别通过 DRG 直接注射不同血清型腺相关病毒( AAV5、AAV6、AAV8 和 AAV9)载体,各组大鼠分别在转染后第 3 周和第 4 周取材,并在共聚焦显微镜下观测对大鼠 DRG初级感觉神经元的转染效果。 结果 组织切片的荧光结果显示,腺相关病毒各亚型的转染效果如下:转染 3 周,AAV9> AAV6> AAV8 > AAV5;转染 4 周,AAV9> AAV6> AAV8> AAV5。 其中,AAV9 载体对大鼠 DRG 神经元的转导效果较好。 结论 DRG 注射不同血清型腺相关病毒( AAV5、AAV6、AAV8 和 AAV9) 载体,AAV9 对 DRG 神经元的转导效能最佳。

研究进展

骨关节炎动物模型的概述

唐玉玲, 王进, 邱业峰, 袁征

2020, 37(06):  70. 

摘要 ( )  

相关文章 | 计量指标

摘要:骨关节炎( osteoarthritis,OA) 是一种常见的关节退行性疾病,患者易致残,严重危害个体健康和社会公共卫生。 临床上人类 OA 的致病原因复杂多样,且缺乏有效的根治疗法。 OA 的致病机理、防治策略以及药物筛选等相关科学研究依赖于 OA 动物模型的构建。 目前 OA 动物模型的造模方法主要分为自发性造模、诱发性造模、转基因造模三类。 近年来,越来越多的转基因 OA 模型被用于 OA 的相关研究中。 本文就 OA 动物模型进行概述,重点对已报道的转基因 OA 动物模型进行详细讨论,从而为探讨构建更为理想的转基因 OA 动物模型及 OA 相关研究提供线索及思路。

研究报告

hACE2 转基因小鼠模型

赵亚, 师长宏

2020, 37(06):  70. 

摘要 ( )  

相关文章 | 计量指标

摘要:血 管 紧 张 素 转 换 酶 2 ( angiotensin-converting enzyme 2, ACE2 ) 是 新 型 冠 状 病 毒 ( severe acute respiratory syndrome coronavirus 2, SRAS-CoV-2)及 SARS 冠状病毒( severe scute respiratory syndrome coronavirus, SARS-CoV)的受体,也是新型冠状病毒的药物治疗及疫苗研发靶点。 药物治疗及疫苗研发都离不开动物模型的支持,小鼠是目前各类疾病研究中应用最广泛的模型。 早在 2003 年 SARS 冠状病毒来袭后,人们发现,由于小鼠与人的 ACE2 蛋白之间存在结构差异,造成冠状病毒对小鼠的感染率较低,为了更好研究冠状病毒的致病机理,国内外研究者建立了几种表达人源 ACE2( hACE2)的转基因小鼠模型。 每种转基因小鼠由于应用技术、整合方式及小鼠品系等方面的差异,造成遗传背景及表型不同。 本文重点对现有的各种 hACE2 转基因小鼠模型进行介绍,利于研究者选择使用。

总目录

2020, 37(06):  81. 

摘要 ( )  

相关文章 | 计量指标