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2021年 第38卷 第1期    刊出日期：2021-02-28

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研究报告

七甲川菁染料与醋酸阿比特龙的化合物应用于小鼠前列腺癌的活体成像和治疗研究

谭邓旭, 马帅军, 吴朋朋, 张彩勤, 赵勇, 白冰, 秦靖, 师长宏

2021, 38(1):  1. 

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摘要:目的 研究七甲川菁( heptamethine carbocyanine)近红外( near-infrared fluorescence, NIRF)荧光染料与醋酸阿比特龙( abiraterone acetate,ABi)合成化合物( DZ1-ABi 和 783-ABi) 对前列腺癌的治疗及其在活体成像中的应用。方法 化学合成两种化合物 DZ1-ABi 和 783-ABi;将人前列腺癌细胞 PC-3、LNcaP 和 C4-2 培养至对数生长期后分别加入 DZ1-ABi、783-ABi 和 ABi,观 察 三 种 化 合 物 对 肿 瘤 细 胞 增 殖 的 抑 制 作 用；将 人 源 性 前 列 腺 癌 PDX 肿 瘤（B45354）皮下移植裸鼠随机分组给予 DZ1-ABi、783-ABi 和 ABi 治疗并监测肿瘤生长状况。 荷瘤鼠分别注射 DZ1- ABi 和 783-ABi（0. 1 nmol / 只），活体成像监测两种化合物在小鼠体内的代谢情况和肿瘤靶向性。 结果相较于ABi 和 783-ABi,DZ1-ABi 能更好地抑制人前列腺癌细胞 PC-3、LNcaP 和 C4-2 的增殖;在荷瘤鼠药敏实验发现,DZ1-ABi 表现出较 783-ABi 和 ABi 更好的治疗效果;活体成像显示,无论是肿瘤的靶向性还是荧光信号强度,DZ1-ABi 均表现出比 783-ABi 更为明显的优势。 结论DZ1-ABi 相较于 783-ABi 和临床药物 ABi 在对肿瘤的抑制和活体成像中均表现出比较明显的优势,有望成为新型的肿瘤显像和治疗双重靶向药物。

BMSCs 过表达 BMP-4 复合同种异体骨修复软骨缺损

2021, 38(1):  7. 

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摘要:目的 针对关节软骨损伤后修复困难,采用腺病毒( Ad) 载体介导骨形态发生蛋白( BMP-4) 修饰骨髓间充质干细胞( BMSCs) ,并复合同种异体骨软骨柱支架,以期实现关节软骨有效再生。 方法 制备同种异体骨软骨柱,BMSCs 过表达 BMP-4 复合同种异体骨修复关节软骨损伤,膝关节标本取材大体观察及分析,HE、番红固绿、Masson及免疫组化检软骨再生情况。 结果 HE、番红固绿、Masson 及免疫组化均提示实验组能显著促进缺损再生,并提高新生组织软骨含量。 结论 过表达 BMP-4 复合同种异体骨支架能显著促进软骨缺损再生,修复软骨损伤。

自发性先天性白内障大鼠皮肤移植及生化位点的研究

尤金炜, 董敏, 吴正林, 梁磊, 田小芸

2021, 38(1):  13. 

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摘要:目的 探讨近交系同系异体自发性先天性白内障( TSC)大鼠皮肤移植反应的影响以及生化标记基因位点的测定。 方法 选用 TSC 大鼠 10 只,6 ~ 8 周龄,体质量 170 ~ 200 g,雌雄各半,采用背-背皮肤移植法进行自体和异体皮肤移植,一周后拆除包扎,观察皮片生长情况。 取基础群 F29 代的同一窝群 TSC 大鼠 6 只,6 ~ 8 周龄,体质量200 ~ 220 g,雌雄各半。 按照中华人民共和国国家标准 GB / 14923—2010 实验动物哺乳类实验动物的遗传质量控制、GB / T 14927. 1—2008 实验动物近交系小、大鼠生化标记检测法测定。 结果 皮肤移植 TSC 大鼠连续观察 100 d皮片成活生长。 11 个生化标记基因位点基因型为:酯酶-1 为 a,酯酶-3 为 a,酯酶-4 为 b,酯酶-6 为 b,酯酶-8 为 b,酯酶-9 为 c,酯酶-10 为 a,血红蛋白 β 链为 b,过氧化氢酶-1 为 a,碱性磷酸酶-1 为 a,血清碱性磷酸酶-1 为 b,参照目前常用的近交系大鼠品系的生化遗传概貌,未发现与 TSC 大鼠的生化标记基因位点完全相同的,TSC 大鼠具有独特的遗传特征。 结论 皮肤移植无排斥,说明 TSC 大鼠的组织相容性基因是一致的;酯酶-1 等 11 个生化标记位点结果均为纯合型,符合近交系质量标准规定。

孕期营养补充剂对妊娠母鼠和仔鼠行为学影响

张长勇, 白兢毳, 暴国, 何嘉玲, 李楠, 王尚明, 张斌, 张树成, 孙德明, 王宁, 王天奇

2021, 38(1):  17. 

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摘要:目的 观察孕期添加多种维生素和矿物质营养补充剂对母鼠和仔鼠自主活动与探究行为的影响,以及对仔鼠发育的影响。 方法 SPF 级昆明小鼠交配见栓后随机分为低剂量组、中剂量组、高剂量组和溶剂对照组,孕期添加营养补充剂(孕早期、孕中期、孕晚期 3 个阶段的产品)按人体推荐日摄入量 2 g / d 换算小鼠的等效剂量,以等效剂量的 0. 5 倍、1 倍、2 倍作为低、中、高 3 个剂量组的药物剂量,分别为 150 mg / ( kg· d) 、300 mg / ( kg· d) 、600 mg /( kg· d) ,连续灌胃 6 d,休息 1 d 后使用下一阶段产品,直至生产;观察仔鼠出生体质量、离乳体质量和离乳一周体质量;同时对离乳后一周母鼠及仔鼠进行旷场实验,观察其行为学差异。 结果 仔鼠出生体质量 3 个剂量组较溶剂对照组均增加,其中高剂量组与溶剂对照组比较差异有统计学意义( P< 0. 05) 。 离乳当天仔鼠体质量较溶剂对照组显著增加( P<0. 05 ~ 0. 01) 。 离乳后一周仔鼠体质量 3 个剂量组较溶剂对照组显著增加( P< 0. 01) 。 产后母鼠在水平运动和垂直运动两项分析指标无明显变化( P> 0. 05) ,在中央区停留时间及穿越中央区次数两项分析指标有增加的趋势。 离乳后一周雌性仔鼠水平运动和垂直运动指标无明显差异( P> 0. 05) ,但水平运动指标显示在中剂量和高剂量组分别增加 5. 16%和 14. 79% ;在中剂量和高剂量组中央区停留时间分别增加 4. 59% 和 72. 95% ,高剂量组明显增加( P<0. 01) ;穿越中央区次数分别增加 8. 58%和 56. 89% ,高剂量组明显增加( P< 0. 05) 。 在雄性仔鼠中,三组实验组与溶剂对照组比较,在垂直运动次数、水平运动时间和水平运动次数指标上都有所增加,其中高剂量组的垂直运动次数与溶剂对照组比较差异有统计学意义( P<0. 05) 。 结论 妊娠期母鼠添加营养补充剂能够增加仔鼠的体质量,利于仔鼠的生长发育,并且能够在不增加实验动物自主活动的情况下,增加其探索行为。

miRNA-125a 靶向调控 Bcl-2 对癫痫大鼠神经元凋亡的影响

裴静, 陈明, 高华, 白杨, 王萍

2021, 38(1):  23. 

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摘要:目的 探讨 miRNA-125a 靶向调控 Bcl-2 对癫痫大鼠神经元凋亡的影响。 方法 选择清洁级 SD 雄性大鼠32 只随机分为正常对照组( A 组) 、癫痫组( B 组) 、miRNA-125a antagomir control 组( C 组) 和 miRNA-125a antagomir组( D 组) 。 qRT-PCR 检测各组大鼠脑组织 miRNA-125a 表达水平;HE 检测各组大鼠脑海马组织 CA-1 区病理形态学改变;TUNEL 法检测脑海马 CA-1 区神经元细胞凋亡数;Western blot 和 qRT-PCR 法检测各组大鼠脑组织中 Bcl-2的表达水平;荧光素酶活性检测 miRNA-125a 与 Bcl-2 的靶向关系。 结果 与 A 组相比,B 组和 C 组大鼠脑组织miRNA-125a 表达升高,差异具有统计学意义( P<0. 05) ;A 组海马细胞排列整齐,细胞形态结构及层次清晰完整,核仁明显,间质无水肿;B 组可见坏死灶,细胞排列紊乱,细胞核固缩,核仁消失,细胞间隙增宽出现水肿;TUNEL 结果显示,B 组、C 组和 D 组脑海马神经元凋亡细胞数明显高于 A 组,而大鼠脑组织 Bcl-2 mRNA 及蛋白表达降低。 D 组miRNA-125a 表达与 C 组相比降低而 Bcl-2 表达增加( P<0. 05) ,且 D 组大鼠脑组织水肿现象明显减轻,海马细胞排列紊乱现象有所改善。 荧光素酶报告基因实验结果显示,miRNA-125a 和 Bcl-2 能够靶向结合。 结论 癫痫模型大鼠脑组织 miRNA-125a 可通过调控 Bcl-2 表达,进一步导致脑海马神经元损伤及大量神经元细胞凋亡;抑制 miRNA-125a 的表达水平可改善癫痫大鼠神经元损伤。

应用 COMT 基因 SNP 位点鉴别拉布拉多和金毛猎犬胆量行为的研究

白静, 马雪娜, 陈舒婷, 雒东, 周子娟, 王靖宇, 王福金

2021, 38(1):  29. 

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摘要:目的 检测拉布拉多和金毛猎犬儿茶酚-O-甲基转移酶( Catechol-O-methyltransferase,COMT)基因 SNP 位点的多态性,并统计分析 SNP 位点的基因型及单倍型与犬胆量行为间的关联性,以期为工作犬培训的前期筛选提供有效的遗传学分子标记。 方法 选取 91 只拉布拉多和 27 只金毛猎犬,共计 118 只,采用犬胆量评估( dog courage assessment,DCA)测试方法对犬的胆量行为进行评估,用高分辨率熔解曲线法( high resolution melting,HRM) 对该118 只犬的 COMT 基因的 4 个 SNP 位点:-1 666 bp C>G、c. 39 A>G、c. 216 G>A 和 c. 482 G>A 进行基因型鉴定,应用SPSS 19. 0 和 PHASE 2. 1 软件统计分析 4 个 SNP 位点的基因型和单倍型与犬胆量行为之间的相关性。 结果 拉布拉多和金毛猎犬的品种、性别和年龄与犬的胆量行为之间没有显著关联性( P>0. 05) 。 COMT 基因的 4 个 SNP 位点的基因型与拉布拉多和金毛猎犬的胆量行为之间存在显著相关性( P< 0. 01) 。 COMT 基因 4 个 SNP 位点的单倍型与拉布拉多和金毛猎犬的胆小性情显著相关( P<0. 01) ,并且 c. 216 G>A 和 c. 482 G>A 位点的 A 等位基因在犬的胆小行为上起主导作用。 结论 COMT 基因的 4 个 SNP 位点的基因型和单倍型与拉布拉多和金毛猎犬的胆量行为之间存在显著相关性,提示 COMT 基因对犬的胆量行为具有显著的影响,可作为胆小犬早期鉴定的有效遗传学分子标记。

HEV 经输血感染兔模型研究

梁春南, 刘志国, 黄维金, 赵晨燕, 邢进, 付瑞, 王佑春, 佘锐萍

2021, 38(1):  35. 

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摘要:目的 建立输血感染戊型肝炎病毒( hepatitis E virus，HEV) 兔模型,了解 HEV 全血输注传播的可能性,并观察感染后的指标动态。 方法 以兔 HEV 接种 4 只 SPF 兔,经腹腔静脉窦采集抗凝血,然后立即以约 10 mL / kg 经耳缘静脉注射输血方式分别给予正常 SPF 受体兔 5 只,每周监测受体兔粪便和血清抗原、抗体和核酸,连续 13 周。结果静脉输血后,5 只受体兔均出现粪便排毒,其中 3 只受体兔引起慢性戊肝,排毒时间超过 13 周,同时出现病毒血症和 HEV 抗原阳性,HEV 抗体阴性或弱阳性;2 只受体兔引起急性戊肝,排毒时间均小于 6 周,同时 HEV 抗体检测 Sample / Cut-off( S / CO)值均大于 13、HEV 抗原阴性、无病毒血症。 结论通过输全血方式可以感染兔,并引起急性或慢性 HEV 感染。

研究简报

国内外不同体制下实验动物管理政策体系和标准体系的分析与启示

巩薇, 卢胜明, 陈洪岩, 陈振文, 范春, 赵德明, 李根平, 贺争鸣

2021, 38(1):  43. 

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摘要:目的 阐述我国实验动物管理制度的优势,找出存在的短板,提出完善与强化我国实验动物管理政策体系和标准体系的对策与建议。 方法 分析国内外实验动物管理政策体系和标准体系架构。 结果 我国还没有一部实验动物管理的法律,与国际上的通用要求存在较大差距;与国际先进标准相比较,我国实验动物标准内容相对滞后,标准之间缺乏系统性和协调性。 结论 加强实验动物工作法制化管理,推动《条例》 修订和地方标准的制定与实施效果,为进一步提升实验动物为我国科技创发展的服务能力奠定基础。




新媒体环境下实验动物科普传播模式的探析

李会萍, 王晓明, 杨锦淳, 温金银, 陈梅丽

2021, 38(1):  49. 

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摘要:本文对新媒体的优势及特点进 行 了 分 析,阐 述 了 实 验 动 物 科 普 传 播 的 重 要 性,并 且 以 广 东 省 实 验 动 物监测所打造的实验动物网络平台、实验动物微信公众 号 平 台、数 字 化 科 普 展 览 平 台、 “ 趣 味 实 验 式 ” “ 科 学 家直播式” 、线上线下科普讲座与视频传播等新媒体形式开展的传播活动为例,研究和探析“ 互联网+新媒体+实验动物” 的科普传播模式,以期能够为行业内其他主体在新媒体环境下广泛开展实验动物科普传播活动提供经验和参考。





实验动物设施废气处理设备工艺选择

刁瑞国, 张文明, 李 娜

2021, 38(1):  53. 

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摘要:目的 废气处理设备工艺对环境的影响。 方法 通过对水喷淋吸收法、光氧化、低温等离子分解法和水喷淋加药法吸收分解的实验与分析,找出实验动物设施废气处理的设备最佳方案,通过检测进入和排出设备气体中氨、硫化氢、臭气浓度对比,筛选出最有效的除臭方法。 结果 通过测试表明,除臭喷淋水投加次氯酸钠或采用光氧化等离子除臭,排放的气体中氨、硫化氢、臭气浓度均优于《 恶臭污染物排放标准》 ( GB 14554—93) ,且经济可行。结论 采用喷淋水中投入次氯酸钠方法或采用光氧化等离子除臭与水喷淋除臭组合,均可满足动物设施排风除臭的需求,从经济和技术角度可行。 可减少实验动物设施排风中臭气的含量,有效地解决设施周边臭气的问题,高效、节能,可以在实验动物设施中推广应用。




一种改良的兔经胃给药方法

李彦锦, 蔡贤华, 丰瑞兵, 陈 芳

2021, 38(1):  56. 

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摘要:目的 介绍一种行之有效的兔实验给药方法。 方法 作者在既往实验经验的基础上,提出一种改良的经胃给药方法,并与前述方法作初步比较。 结果 与前述方法相比,该改良经胃给药方法操作简单、学习时间短、对兔伤害小、效率高、可单人完成。 结论 改良的经胃给药方法符合实验动物“ 3R” 原则,有利于开展大样本实验的给药操作。




SPF 小鼠上呼吸道常见细菌的分离鉴定及携带率分析

魏天文, 胡芹宝, 宣俊文, 李晨江, 周小江, 吕铭, 张新创

2021, 38(1):  59. 

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摘要:目的 对 SPF 小鼠上呼吸道分离到的细菌进行鉴定及携带状况分析。 方法 按常规检测流程进行细菌分离培养、染色、镜检、生化反应、Vitek 2 compact 全自动细菌鉴定。 结果 SPF 小鼠上呼吸道常见细菌有 8 种,按细菌携带率分四类,第一类:毗邻颗粒链菌,携带率 98. 6% ;第二类:松鼠葡萄球菌和木糖葡萄球菌,携带率 45% ~ 65% ;第三类:阴沟肠杆菌、大肠埃希氏菌、奇异变性杆菌,携带率 25% ~ 45% ;第四类:不动杆菌、肺炎克雷伯菌等,携带率10%以下。 结论 用细菌分离培养方法,经 Vitek 2 compact 全自动细菌鉴定得出 SPF 小鼠上呼吸道常见细菌及其携带率。 为 SPF 小鼠群体的微生物质量评估及相关科研项目选择使用 SPF 小鼠时提供支持。


研究进展

妊娠糖尿病大鼠造模方法研究进展

江心泳, 葛莉, 庞书勤, 谢勇, 赖玉婷, 黄萍萍, 王冠东, 陈 凡

2021, 38(1):  63. 

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摘要:妊娠糖尿病( gestational diabetes mellitus,GDM)动物模型是研究 GDM 发生发展、治疗与护理机制的实验基础, GDM 大鼠造模方法是否符合人类 GDM 发病机制与其成模率和死亡率至关重要。 本文综合比较国内外文献中GDM 大鼠的造模方法,发现目前 GDM 大鼠常用的造模方法主要有药物诱导、饮食诱导和药物联合饮食诱导三种类别,但各造模方法所用药物和饮食剂量差别大,缺乏统一的 GDM 大鼠成模标准和不同造模方法间的比较且忽视了活动量因素对 GDM 大鼠模型的影响。




禽源沙门氏菌快速检测方法研究进展

方焕新, 李智丽, 黄淑坚, 何诚, 袁生

2021, 38(1):  69. 

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摘要:沙门氏菌病是一种重要的人畜共患病,一直威胁着畜禽健康和食品安全。 当前正值我国大力推进沙门氏菌、淋巴白血病的种禽净化政策,但传统检测方法存在检测时间长、血清型和致病力无法区分的技术瓶颈,严重制约了沙门氏菌净化效率和净化进程,也限制了食品安全检测的准确性。 针对沙门氏菌临床快速检测存在的技术壁垒,本文对细菌分离、血清学诊断、PCR 诊断技术、基因芯片诊断等技术进展进行文献综述,旨在为禽源沙门氏菌新型检测技术的建立与应用提供借鉴。




遗传修饰小鼠模型基因型鉴定技术要点介绍

刘甦苏, 王辰飞, 岳秉飞, 李冠名, 范昌发

2021, 38(1):  74. 

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摘要:近年来,随着生物医学研究及基因编辑技术的发展,出现了越来越多的动物模型。 由于制作方法的不同,其基因型鉴定技术方法也不一样,导致基因型鉴定的工作存在混乱无序的现象。 本文根据遗传修饰小鼠模型制作方法进行分类,介绍了随机转基因小鼠、条件性基因敲入小鼠、基因敲除小鼠三类常见模型的基因型鉴定技术要点,规范遗传修饰小鼠模型基因型鉴定方法,保证动物实验材料的准确性,从而推动动物模型在基础和应用科技领域的应用与发展。