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2020年 第37卷 第05期    刊出日期：2020-10-28

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研究报告

实验兔和猫在降压物质检查中的比较研究

黎家敏，马佳丽，杨 春，邓 林,马文静， 荣祖元

2020, 37(05):  1. 

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摘要:目的 通过比较实验兔和猫对组胺标准品的降压反应,探讨实验兔应用于药品降压物质检查的可行性。方法 取普通级的新西兰兔、日本大耳白兔、青紫蓝兔和猫各 6 只,雌雄各半,经戊巴比妥钠麻醉后通过静脉分别注射 0. 05 ~ 5. 0 μg / kg(实验兔) 、0. 05 ~ 1. 0 μg / kg( 猫) 的组胺标准品溶液以及 0. 5 mL / kg 和 1. 0 mL / kg 的生脉注射液。 首先通过比较 3 种实验兔对组胺标准品降压反应的敏感性、重现性和血压稳定性等指标,再比较实验兔和猫对组胺灵敏度 试 验 结 果 与 《 中 国 药 典》 要 求 的 符 合 性 及 其 对 组 胺 标 准 品 与 生 脉 注 射 液 降 压 反 应 的 差 异 性。结果 3 种实验兔对组胺标准品降压反应的敏感性和重现性均比较一致,品种间没有显著性差异,但在实验过程中新西兰兔血压较为稳定且操作方便;与猫相比较,实验兔对组胺降压反应极不敏感,其降压反应值约为猫的 1 / 8,且其灵敏度试验结果不符合药典的要求,但对生 脉 注 射 液 却 和 猫 一 样 具 有 明 显 的 降 压 反 应,降 压 值 约 为 猫 2 / 3。结论 实验兔对组胺物质的降压反应不敏感,暂时无法用于降压物质检查,但对生脉注射液仍较敏感,说明组胺对动物的降压作用具有明显的动物种属选择性。

犬细小病毒免疫球蛋白的有效性评价

姜 旭，赵 健，倪婷婷，刘彦超，黄 宇，陈宪平，石 晶

2020, 37(05):  9. 

摘要 ( )  

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摘要:目的 探究犬细小病毒免疫球蛋白注射液的有效性。 方法 将实验犬分为模型对照组、对症治疗组与球蛋白治疗组,所有犬同时进行人工感染犬细小病毒,在实验犬发病后根据每日的状态,对症治疗组与球蛋白治疗组进行相应的治疗,球蛋白治疗组除进行与对症治疗组相同的治疗外,加入犬细小病毒免疫球蛋白的注射治疗。每日观察临床症状并进行评分,采集肛拭子用胶体金抗原检测试纸判断粪便排毒情况;每日采血,进行血常规及血液生化检测,对检测结果及实验犬死亡后解剖结果进行分析，根据模型对照组对另外 2 个治疗组的治疗效果进行对比。结果 所有实验犬发病率 100% ,模型对照组的好转率为 20% ,对症治疗组的好转率为 40% ,球蛋白治疗组的好转率为 80% 。 结论 通过人工感染模型与治疗组间的治疗效果对比,证实了犬细小免疫球蛋白注射液具有治疗犬细小病毒病的效果。

参附注射液对内毒素休克大鼠肺组织表达PPARγ和TNFα的干预作用

褚春薇, 艾飞, 陈向云, 郭俊峰, 杨毅, 刘霞

2020, 37(05):  14. 

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摘要:目的 观察内毒素休克大鼠肺组织中过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)和肿瘤坏死因子α(TNFα)的表达情况及参附注射液的干预作用。方法 经腹腔注射脂多糖(LPS)建立内毒素休克SD大鼠模型,用低、中、高剂量参附注射液进行治疗,观察肺组织病L改变,检测肺组织中PPARγ和TNFα的表达量,同时检测血浆中TNFα和IL-1β的水平。结果 模型组大鼠具有典型的急性肺损伤表现;肺组织中PPARγ的转录和表达(P<0.01)量均显著下调,TNFα的表达明显增加(P<0.01);血浆中TNFα和IL-1β水平明显上升(P<0.01)。与模型组比较,参附注射液改善肺组织充血、水肿及炎性细胞浸润;呈剂量依赖性上调肺组织中PPARγ的转录和表达,下调TNFα的表达;同时抑制血浆中炎症介质TNFα和IL-1β水平(P<0.01)。结论 参附注射液保护内毒素休克大鼠肺组织,其作用机制可能与上调PPARγ从而抑制炎症介质的产生有关。

犬表皮肿瘤病理诊断及分析

赵梦洋，李 杰，赵德明，周向梅，杨利峰

2020, 37(05):  19. 

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摘要:目的 对 39 例犬表皮肿瘤病例的背景信息、病理学诊断结果进行分析,探讨犬表皮肿瘤发生规律和病理学特点。 方法 收集 39 例患犬的表皮肿瘤,制成切片后进行 HE 染色,利用光学显微镜进行病理学观察并作出诊断,根据诊断结果,对病例的肿瘤类型、发病年龄、性别、发病部位等进行统计分析。 结果 结果显示,犬最常发的表皮肿瘤为鳞状细胞癌,占全部表皮肿瘤病例的 46% ,多为中分化程度的鳞状细胞癌。 其次为占比 39%的乳头状瘤,以 外生性乳头状瘤为主。 基底样鳞状细胞癌较少发生。 乳头状瘤多发于 0 ~ 3 岁幼龄犬,鳞状细胞癌以及基底样鳞状细胞癌多发于 7 岁以上的老龄犬。 雄性的发病率略高于雌性。 表皮肿瘤的发病部位主要位于头面部。 结论 本文总结了犬表皮肿瘤的流行特点及组织病理学特征,为今后该类肿瘤的诊断和鉴别诊断提供参考。

封闭群比格犬微卫星的筛选及初步应用

蒋 辉，李银银，李长龙， 郭 萌，李方正， 王冬冬， 杜小燕， 陈振文

2020, 37(05):  24. 

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摘要:目的 筛选可用于比格犬遗传检测的微卫星位点,并对小型比格犬群体进行了遗传结构分析。 方法 选取来自文献的微卫星位点 120 个,包括比格犬位点 23 个和其他犬类遗传检测的位点 97 个。 用 DNA 池对这些位点进行 PCR 条件优化后,挑选扩增效果优良的位点对常用比格犬群体进行荧光标记 STR 扫描和群体遗传结构分析,依据期望杂合度( He)和香农指数挑选符合要求微卫星位点计算群体遗传参数。 结果 在候选的 120 个位点中共有73 个位点扩增效果优良,STR 扫描后选用 49 个位点进行遗传分析,结果显示该群体有效等位基因数、期望杂合度、平均杂合度、香农指数、多态性信息含量分别为 4. 9230、0. 7574、0. 7375、1. 6625、0. 7038,证明该群体遗传多态信息丰富,群体遗传多样性高。 结论 所选 49 个微卫星位点可用于比格犬遗传检测,这些位点还需用更多群体进行验证和优化。

<非洲绿猴和食蟹猴主要肠道细菌的实时定量 PCR 检测及分析

周小军，尚艳姣，王 进，王 爽，邱业峰

2020, 37(05):  31. 

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摘要:目的 非洲绿猴具有不同于食蟹猴和恒河猴等猕猴的生物学特征,如脂质代谢、自发性高血压、SIV 感染不引起获得性免疫缺陷综合症( AIDS)等,本研究拟对食蟹猴和非洲绿猴肠道细菌的相对含量进行比较研究。 方法随机选取 SIV 抗体阴性的成年食蟹猴和非洲绿猴各 12 只,排除肥胖和疾病个体,收集其新鲜粪便样本,按 200 mg每份等分后进行液氮速冻,-80 ℃ 保存。 其中 1 份进行肠道细菌的实时定量 PCR 分析。 结果 与食蟹猴相比,非洲绿猴双歧杆菌、乳酸菌以及肠杆菌相对含量显著偏低( P<0. 05) ,而普氏菌以及丁酸盐产生菌 ———普拉梭菌和真细菌相对含量更高( P<0. 05) 。 结论 非洲绿猴产丁酸盐的细菌相对含量更高,反映出其肠道免疫细胞稳态和黏膜完整性具有不同于食蟹猴的进化适应特征,为深入研究非洲绿猴对 SIV 感染不致病的相关机制奠定了基础。

 Hartley 豚鼠生物净化群体建立及微卫星遗传质量分析


范 涛，武卫国，冯 宾，刘佐民，柳全明

2020, 37(05):  36. 

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摘要:目的 对现有 Hartley 豚鼠种群进行剖腹产净化,通过遗传检测,确认净化后的种群符合封闭群遗传特征。 方法 生产群中不同繁殖单元广泛选择雌、雄个体,按 1 ∶ 1 比例合笼交配,于合笼后 70 d 实施剖腹产手术,仔鼠人工乳饲喂。 用循环交配法繁殖一代,从 F1 代中选取 30 个个体采集耳部组织样本,提取 DNA,应用 18 个豚鼠基因组微卫星位点进行 遗 传 检 测。 结 果 剖 腹 产 共 获 得 85 只 仔 鼠,成 活 56 只,离 乳 47 只 ( 23 雄、24 雌) ,成 活 率65. 9% ,离乳率 83. 9 % ;18 个豚鼠微卫星位点共检测到 81 个等位基因,平均杂合度 0. 5747,平均多态信息含量( PIC)0. 5216。 Hardy-Weinberg 遗传平衡检测,14 个位点符合 H-W 遗传平衡,3 个位点显著偏离 H-W 遗传平衡,1个位点呈现纯合状态。 结论 通过剖腹产对豚鼠种群进行了净化,净化后的群体具备较理想杂合度,属高度多态性群体,符合封闭群实验动物遗传特征。

137 Cs-γ 辐照对实验红鲫 AFLP 多态性的影响

廖小立，陶宏婷，吴端生， 姚 峰，陈科洁

2020, 37(05):  42. 

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摘要:目的 观察137 Cs-γ 辐照对实验红鲫 AFLP 的变化,探讨不同剂量137 Cs-γ 辐照对实验红鲫 DNA 多态性的影响。 方法 根据前期实验结果,将实验红鲫 C1HD 系随机分为 5 组,10 尾 / 组,即空白对照组、1 / 16 LD50 、1 / 8 LD50 、1 / 4 LD50 、1 / 2 LD504 个辐照组,设置 1. 94 Gy、3. 88 Gy、7. 76 Gy、15. 53 Gy4 个辐照剂量组和一个空白对照组,用生物辐照仪对实验红鲫进行一次性辐照。 提取辐照前和辐照后的实验红鲫血液 DNA,经 AFLP-PCR 扩增,并进行多态性信息含量( PIC) 、基因杂合度( H) 、香农信息指数( I) 分析。 结果 实验红鲫在137 Cs-γ 辐照处理前的 PIC、H 和 I分别为 45. 20% 、0. 19 和 0. 28,经137 Cs-γ 辐 照 处 理 后 分 别 为 72. 27% 、0. 28 和 0. 41,且 遗 传 学 指 数 升 高。 结 论经137 Cs-γ 辐照处理后,实验红鲫的 AFLP 多态性信息含量增加,基因杂合度升高。 AFLP 标记实验红鲫 C1HD 系可用于监测核辐射污染。

安神补脑液对抑郁症睡眠障碍大鼠下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴的影响

王琦伟，许文杰，许春立,蒋瑞冲

2020, 37(05):  50. 

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摘要:目的 探讨安神补脑液对抑郁症睡眠障碍大鼠下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴的调节作用。方法 选择清洁级SD雄性大鼠40只并随机分成4组:正常对照组、抑郁症睡眠障碍模型组、安神补脑液低剂量组、安神补脑液高剂量组,每组10只。分别于造模后、药物干预后7 d、14 d采用OFT法检测大鼠行为学(水平运动和垂直运动);麻醉处死大鼠取下丘脑进行称质量;采用 ELISA法检测血清中促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质醇(CORT)的含量;采用免疫组化及 RT-PCR法检测脑组织 β-内啡肽(β-EP)和水通道蛋白 4(AQP4)的表达水平。结果 与正常对照组相比,模型组大鼠在造模后,体质量明显降低,但下丘脑相对质量显著升高,水平活动与垂直活动得分显著降低;血清中CRH、ACTH、CORT表达水平显著升高,脑组织β-EP和AQP4的表达水平显著降低,差异均具有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,补脑液低剂量组大鼠体质量虽有上升,但差异无统计学意义(P>0.05),而下丘脑相对质量显著降低(P<0.05);补脑液高剂量组大鼠体质量显著升高,下丘脑相对质量显著降低(P<0.05)。安神补脑液治疗后第7天,补脑液高剂量组大鼠水平活动与垂直活动得分较模型组均显著升高(P<0.05),补脑液低剂量组大鼠水平活动与垂直活动得分较模型组虽有升高但差异无统计学意义(P>0.05);治疗 14 d后,两治疗组大鼠水平活动与垂直活动与模型组比较均有明显改善(P<0.05)。两治疗组大鼠血清CRH、ACTH、CORT表达水平与模型组相比显著降低(P<0.05),而脑组织β-EP和AQP4的表达水平与模型组相比明显上升,且补脑液高剂量组β-EP和AQP4的表达水平高于补脑液低剂量组(P<0.05)。结论 安神补脑液可通过调节β-EP、AQP4的表达,抑制抑郁症睡眠障碍大鼠下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴功能亢进。

逐瘀通脉胶囊对大鼠慢性低灌注诱发脑缺血损伤的影响

杨贇昀，吴虓飞，胡宇驰

2020, 37(05):  57. 

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摘要:目的 观察逐瘀通脉胶囊对大鼠慢性低灌注诱发脑缺血损伤的影响。方法 参考文献方法,永久性结扎大鼠双侧颈总动脉建立慢性低灌注性脑缺血损伤模型。造模后选取状态较好,手术创口愈合较好的动物分6组:模型组、维脑路通片组(100 mg/kg)、步长脑心通胶囊组(800 mg/kg)、逐瘀通脉胶囊组(200、100、50 mg/kg),并设立假手术组。给药14 d后,利用Morris水迷宫进行空间探索实验,对各组动物学习记忆能力进行检测。实验结束后取脑测定脑湿质量、干质量、脑系数及脑组织含水量。结果 与模型组比较,逐瘀通脉胶囊(200 mg/kg)组动物在有效区停留时间和游经距离显著增加(P<0.05),经过平台次数显著增加(P<0.05),脑湿质量、脑含水量、脑系数均显著下降(P<0.05),显示其对慢性低灌注脑缺血大鼠空间探索能力的下降有明显改善作用,并能减轻大鼠脑水肿。结论 逐瘀通脉胶囊对慢性低灌注脑缺血所致学习记忆能力减弱有一定的改善作用。

关节腔内注射碘乙酸快速建立小鼠骨关节炎模型

钟宇辰，王诗淳，赵 峰，张婷婷，陈 萌，施 萍， 庞希宁

2020, 37(05):  61. 

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摘要:目的 观察分析不同剂量碘乙酸(M IA)对于小鼠软骨和骨组织的损害,找出适合不同程度的骨关节炎小鼠模型的浓度。方法 C57BL/6小鼠随机分为4组,每组左右腿互为对照注射不同剂量的碘乙酸和对照用PBS,1,2,4周后测量膝关节宽度,进行相关评分,分析病变情况。结果 注射后出现不同程度病L变化。实验组关节评分明显大于对照组(P<0.05),且实验组中表现出较大剂量组(≥0.1 mg)与较小剂量组(<0.1 mg)两对组间差异。结论 推荐0.1 mg为较大剂量组代表剂量,产生明显软骨组织破坏和炎症反应,0.05 mg为较小剂量组代表剂量,产生轻度软骨组织的破坏和可逆炎症反应。

研究简报

刍议药包材的异常毒性检查和实验动物福利

高保栓，康 莉， 刁立琴,付 钊

2020, 37(05):  66. 

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摘要:目的 研究2015版国家药包材标准(简称 YBB标准)中异常毒性试验的变化,旨在关注实验动物福利。方法 比较新旧YBB标准。结果 发现2015版YBB标准除了滴眼剂瓶和聚乙烯/铝/聚乙烯复合药用软膏管外,其他塑料瓶和复合膜类均新增加了空白对照,而药用铝箔和硬片类、药用低密度聚乙烯膜、袋均未增加空白对照。结论 药包材的异常毒性检查应按非生物制品试验,认为不需要设立空白对照。建议在相关的药包材标准修订时考虑舍去异常毒性试验的空白对照。

制作简易实验动物雾化箱建立小鼠哮喘模型研究

田 丹，许虎峰

2020, 37(05):  71. 

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摘要:目的 应用简单易操作的方法将家用型医疗雾化吸入装置改造为实验动物雾化箱,为实验动物呼吸道疾病的研究提供便利。 方法 利用家用型雾化器和动物实验室常见的独立通气鼠笼组合改造为实验动物雾化箱。 应用自制实验动物雾化箱和鸡卵清白蛋白建立小鼠过敏性哮喘模型。 结果 实验动物雾化箱能同时为 1 ~ 20 只小鼠实验快速稳定地产出雾化吸入气体,利用该雾化箱成功建立起小鼠过敏性哮喘模型。 结论 我们利用该实验动物雾化箱建立小鼠过敏性哮喘模型并观察到明显的肺组织炎症表现。 该方法为简便和低成本地进行实验动物雾化实验提供具有操作性的指导。

研究进展

MRI在小鼠急性脑卒中模型中的应用

翟亚南，李 梦，卢静

2020, 37(05):  74. 

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摘要:磁共振成像(MRI)在临床应用于急性脑卒中(AS)检测,对于该病诊断与治疗决策以及预后影响都有较为重要的作用。在疾病动物模型中,MRI能够较好地反映急性脑卒中病L以及生L改变情况,较传统的检测方法更快捷、更直观地显示病灶区域及程度,其在活体上非侵入性成像,更成为研究该疾病的重要工具。近几年MRI也逐步应用于小鼠AS模型的建立、评价中。本文将就MRI在小鼠AS模型评价和建立这两方面中的作用以及其日后的发展趋势进行阐述。

新型冠状病毒感染实验动物的风险评估

李永超，李韵峰，关雅伦， 黄忠强， 刘书华， 李雪娇， 李 舸， 张 钰

2020, 37(05):  78. 

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摘要:目的 2019 年 12 月暴发的新型冠状病毒( SARS-CoV-2) 迅速传播,严重影响了社会生活正常运行。 由于新型冠状病毒受体血管紧张素转化酶( ACE2)在人及动物中的保守性,有必要对常见家畜及实验动物的易感性进行评估。 方法 基于 ACE2 的氨基酸序列,分析其在人、实验动物及家畜等动物中进化关系;根据冠状病毒受体结合结构域( Receptor binding domain,RBD)与 ACE2 的结合位点,比较其在物种间的变化,推测不同物种对新型冠状病毒的易感性。 结果 新型冠状病毒与 ACE2 的结合位点在不同物种间较为保守,且 ACE2 受体与新型冠状病毒RBD 的结合位点在人、猴和仓鼠的完全一致。 结论 基于位点比较和 SARS-CoV-2 感染动物特性分析,猴和仓鼠可能对新型冠状病毒较为易感,可以优先选择它们作为 SARS-CoV-2 感染动物模型。