当期目录

2020年 第37卷 第04期    刊出日期：2020-08-28

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研究报告

中国地鼠的剖宫产净化

张锐虎， 王晨阳， 王 璐，余婧婧， 王文桃， 陈朝阳

2020, 37(04):  1. 

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目的 通过生物净化使中国地鼠的微生物、寄生虫质量控制级别达到清洁级标准。 方法 普通级中国地鼠剖宫产后获得的仔鼠由清洁级 ICR 小鼠代乳,记录仔鼠 0 ~ 30 日龄的体质量变化和存活情况,对离乳后的仔鼠进行微生物、寄生虫质量检测。 结果 本次实验对 24 窝普通级中国地鼠进行剖宫产手术,共获得新生仔鼠 109 只,其中 5 只死胎仔,最终代乳成活 56 只,代乳成功率为 53. 85%,离乳后的地鼠经随机检测均达到清洁级国家标准。 结论 本研究对中国地鼠进行了生物净化,进一步完善了中国地鼠的质量标准化,为中国地鼠的生产、应用提供了质量保障。

北京地区实验大鼠金黄色葡萄球菌的 检测结果及 MLST 分型分析

冯育芳，邢 进，张雪青， 岳秉飞， 赵德明

2020, 37(04):  5. 

摘要 ( )  

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目的 了解北京地区实验大鼠金黄色葡萄球菌的携带情况及分子特征,为实验大鼠金黄色葡萄球菌的防控 提供基础信息。 方法 按照 GB / T 14926. 14—2001 实验动物金黄色葡萄球菌检测方法,对 2008—2017 年北京地区 实验大鼠进行检测,并按年份和季节对检出情况进行分析;然后,对其中主要菌株进行 MLST 分型及分析。 结果 2008—2017 年在北京地区实验大鼠中检测到金黄色葡萄球菌 165 株,阳性率为 8. 44% ;2013 年达到金葡菌阳性峰 值(39 株,18. 48% ) ,而阳性率在季节间的差异不明显。 MLST 分型将 148 株金黄色葡萄球菌分为 7 个型别( ST8、 ST3、ST1、ST6、ST2871、ST88 及 ST641) ,其中 ST1 占比最大( 51. 35% ) ,其次是 ST2871( 30. 41% ) ,其余 ST 型别占比 都低于 10% ;进一步分析发现其具有显著的时空分布特点,并存在进化相关性。 结论 本研究为实验大鼠金黄色 葡萄球菌的防控提供了基础信息。

特异性脱敏法治疗柳树花粉引起的 过敏性鼻炎的实验研究

罗兆莉，轩 冉，莘琳琳，孙其玉， 董晏榕， 任其奎，杨 帆，田兆菊

2020, 37(04):  10. 

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目的 建立柳树花粉引起的过敏性鼻炎小鼠模型,并对其进行特异性脱敏治疗。 方法 提取柳树花粉蛋白, 对小鼠腹腔注射并滴鼻激发,建立过敏性鼻炎小鼠模型;通过递增变应原剂量对小鼠皮下注射,观察小鼠行为学症 状、鼻黏膜组织形态学变化和检测血清 sIgE 的含量,探索特异性脱敏疗法的效果。 结果 治疗前小鼠出现搔鼻、打 喷嚏、流鼻涕等过敏症状,鼻黏膜中嗜酸性粒细胞明显多于对照组,血清 sIgE 含量高于激发前,成功建立了过敏性 鼻炎小鼠模型;治疗后小鼠过敏症状 逐 渐 减 轻 至 消 失,鼻 黏 膜 中 嗜 酸 性 粒 细 胞 逐 渐 减 少,血 清 sIgE 含 量 减 少。 结论 柳树花粉能够建立过敏性鼻炎小鼠模型,且特异性脱敏法可将其治疗。

七氟醚预处理对肺移植缺血再灌注损伤大鼠的 保护作用及对氧化应激指标的影响

陈文娟， 薛永耐

2020, 37(04):  15. 

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目的 探讨七氟醚预处理对大鼠肺移植缺血再灌注损伤( Ischemia-reperfusion injury,IRI) 的保护作用及其对 氧化应激指标的影响。 方法 选择雄性 SD 大鼠 18 只,依据随机数字的方法分为 3 组,每组 6 只。 A 组仅开胸,不 做肺部移植;B 组左肺移植后开放再灌注 2 h;C 组在肺移植前用 1. 5%七氟醚预处理供体大鼠 30 min。 3 组大鼠再 灌注后 2 h 收集移植肺和股动脉血。 分析动脉血氧合指数( PaO2 / FiO2 ) 、肺内分流率( Qs / Qt) ,计算肺湿干比。 碘 化丙啶染色观察肺组织细胞凋亡;免疫组化 SP 法检测自噬蛋白 Beclin-1 水平;Western-blot 检测自噬蛋白 LC3-Ⅱ 和 LC3-Ⅰ 表达水平;ELISA 法检测肺组织和血清中超氧化物岐化酶( SOD) 、谷胱甘肽过氧化物酶( GSH-Px) 、过氧化氢 酶( CAT) 、活性氧( ROS)和丙二醛( MDA) 。 结果 3 组的 PaO2 / FiO2、 Qs / Qt、肺湿干比、HE 染色肺病理损伤评分、 肺组织细胞凋亡率、Beclin-1 阳性细胞数、LC3-Ⅱ / LC3-Ⅰ 、肺组织匀浆液和血清中的 SOD、GSH-Px、CAT、ROS、MDA 数据差异均具有统计学意义( F = 23. 335、21. 056、17. 756、15. 323、18. 866、15. 336、22. 253、14. 536、15. 097、25. 337, P<0. 05) ,PaO2 / FiO2 、Beclin-1 阳性细胞数、LC3-Ⅱ / LC3-Ⅰ 、肺组织匀浆液和血清中的 SOD、GSH-Px、CAT 的数值为 A 组高于 C 组,C 组高于 B 组( P<0. 05) ,Qs / Qt、肺湿干比、HE 染色肺病理损伤评分、肺组织细胞凋亡率、肺组织匀 浆液和血清中的 ROS、MDA 的数值均为 B 组高于 C 组,C 组高于 A 组( P< 0. 05) 。 结论 七氟醚预处理对肺移植 IRI 有一定保护作用,并且可以明显改善移植肺组织和外周血清中氧化应激指标的水平。

仙台病毒荧光定量 PCR 检测方法的建立及初步应用

黄宗文，王 吉，马 宏

2020, 37(04):  21. 

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目的 建立敏感特异的仙台病毒( SeV)荧光定量 PCR 检测方法,并初步应用。 方法 将不同株 SeV 病毒序 列进行比对,选择对保守区域设计合成引物。 人工合成 SeV 基因组 12 181 ~ 12 480 DNA 序列,转入质粒中,作为仙 台病毒质粒标准品,建立 SYBR 染料法荧光定量 PCR 方法,并对样本进行 SeV 测定。 结果 建立了特异性的检测 SeV 的 SYBR 荧光定量 PCR 方法,该方法对 SeV 最低检测限度为 10 copies / μL。 将所建立的实时荧光定量 PCR 方 法用于 40 只 SPF 小鼠和 58 只裸鼹鼠的肺组织样本的检测,检测结果为仙台病毒核酸阴性;检测 4 只成年屏障环 境饲养黄鼠肺组织和 5 只清洁级小鼠肺组织,检测结果为仙台病毒核酸阳性率 100% 。 结论 该研究建立的 SYBR Green 染料法荧光定量 PCR 方法能特异敏感地检测仙台病毒。

超声造影观察小鼠两种皮下移植瘤的血管生成

李爱静， 林雪君，尹 玲， 寇卜心， 柴梦音， 陈德喜，刘晓霓， 孟繁坤

2020, 37(04):  27. 

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目的 应用高频小动物超声观察人 BT-B 膀胱癌和人 Huh7 肝癌两种皮下移植瘤的血管生成情况,探讨超声 造影评价肿瘤血管生成情况的价值。 方法 采用皮下注射建立人 BT-B 膀胱癌和人 Huh7 肝癌两种皮下移植瘤模 型,采用高频小动物超声成像系统的多种超声模式观察两种肿瘤内部结构和血管特性;采用探头式活体激光共聚 焦观察肿瘤的小血管数量和大小;采用免疫组化法观察肿瘤的血管标志物 CD31 表达,计算微血管密度。 结果 两 组裸鼠均成功荷瘤。 B 超模式显示 Huh7 与 BT-B 皮下瘤均为不均质低回声结节;彩色多普勒模式及频谱多普勒模 式显示 BT-B 皮下瘤血流信号和血流速度多于 Huh7 皮下瘤;超声造影显示 Huh7 肝癌组血管分布紊乱,BT-B 膀胱 癌组血管分布呈“分支状” ,与探头式活体激光共聚焦结果及病理结果一致。 超声造影参数峰值强度( PI) 与 MVD 呈正相关( r = 0. 844,P<0. 05) 。 结论 超声造影可以更好地显示肿瘤血管的分布情况,且 PI 与病理 MVD 呈正相 关,可提示肿瘤血管的增殖情况,可以作为无创评价肿瘤血管生成的可靠方法。

犬皮肤毛囊的肿瘤病理诊断及分析

李 杰 杨利峰 赵德明 周向梅

2020, 37(04):  33. 

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目的 犬皮肤毛囊肿瘤是兽医临床中最常见的肿瘤之一,可能也是送往诊断实验室最常见的组织病理学标 本,经常被送检要求进行组织病理学评估。 单纯靠临床特征进行诊断具有局限性,本文旨在对此类肿物进行系统 的组织病理学分类,以期和临床大体特征结合,进行更准确更高效的诊断。 方法 对 2018—2019 年不同单位送检 的犬皮肤毛囊的肿瘤(共 39 例)进行病理学诊断和分析,并对犬的品种、年龄、性别、肿瘤类别和性质等方面进行分 析,旨在探讨犬皮肤毛囊的肿瘤发生的规律和病理学特点。 结果 皮肤毛囊的肿瘤中,发病率最高的为毛母细胞 瘤,占比 73% ,在犬中最常见的类型为缎带型。 从发生的肿瘤性质来看,良性肿瘤发生率很高,占比 97% 。 从发病 年龄来看,发病率随着年龄的增长而有升高的趋势,即老年犬多发。 从发病性别来看,肿瘤的发生没有表现出明显 的性别偏好性。 结论 为今后犬皮肤毛囊的肿瘤诊断与鉴别诊断提供参考。

季节性流感病毒裂解疫苗在小鼠中的 安全性和免疫原性研究

鹿双双，荣 蓉，庞 帅，师晓萌，王昕昉， 刘 哲， 刘晓宇

2020, 37(04):  44. 

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目的 评价季节性流感病毒裂解疫苗在动物体内的安全性和免疫原性。 方法 按《 中国药典》 三部( 2015 版)方法进行 BALB / c 小鼠异常毒性试验。 免疫原性试验将 BALB / c 小鼠随机分为 2 组,试验组每只小鼠肌肉注射 0. 1 mL 测试疫苗,空白对照组注射 0. 1 mL PBS。 接种后连续观察 49 d,每天记录动物的活动、饮食及体质量情况。 分别于接种后 0、14、28、35 和 49 d,采血并分离血清,红细胞凝集抑制试验( hemagglutination inhibition,HI)检测血清 抗体水平。 结果 异常毒性试验结果提示该疫苗的安全性良好,对小鼠的生长无影响,符合《中国药典》 三部( 2015 版)判定标准。 免疫原性试验结果显示,BALB / c 小鼠免疫后 28 d,血清抗 A( H1N1) pam09 和 A( H3N2) HI 抗体阳 转率均达到了 100% ;免疫后 35 d,抗 B( Victoria 系) 的抗体阳转率达到 70% 。 BALB / c 小鼠抗 A( H1N1) pam09、A ( H3N2)和 B( Victoria 系)抗体水平均达到峰值。 结果表明,该季节性流感病毒裂解疫苗对小鼠进行一次性免疫, 即能达到良好的免疫效果。 结论 该流感病毒裂解疫苗在 BALB / c 小鼠中具有良好的安全性和免疫原性。

Protectin DX 对老年大鼠肺损伤相关炎性因子 和氧化损伤的保护作用

魏敬军， 魏崇莉， 张永霞， 戴沛军

2020, 37(04):  49. 

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目的 初步探讨 Protectin DX (保护素 DX,PDX)对老年大鼠肺叶切除术后肺损伤相关炎性介质及氧化因子 的调控及保护作用。 方法 将 30 只 SPF 级健康的老年雄性 SD 大鼠(10 月龄)随机分为假手术组( n = 10) 、手术组 ( n = 10) 、PDX 处理组( n = 10) 。 假手术组和手术组在造模 1 h 后腹腔注射 300 μL 生理盐水,PDX 处理组于造模 1 h 后腹腔注射 300 μL PDX(500 ng) 。 将所有大鼠于造模 24 h 后采用过度麻醉的方法处死,收集标本。 采用 HE 染色观察各组肺标本病理形态变化,评价各组大鼠肺标本的干湿质量比( W / D) ;检测肺泡灌洗液中蛋白浓度及相 关炎症因子的含量;检测肺组织中 MDA、ROS、SOD 的含量以及 HO-1、核因子 NF-κB 的蛋白表达量。 结果 假手术 组肺组织结构清晰,未见炎症细胞浸润;手术组老年大鼠肺组织结构紊乱,伴有大量炎症细胞浸润;PDX 处理组大 鼠肺组织结构不清晰,存在少量的炎症细胞浸润。 与假手术组相比较,手术组老年大鼠肺损伤评分及肺组织 W / D 显著增高( P<0. 01) ,肺泡灌洗液中蛋白浓度及 IL-1β、IL-6 和 TNF-α 含量明显增加( P< 0. 01) ,肺组织中 MDA、ROS 含量及 NF-κB 蛋白表达显著升高,SOD 活性及 HO-1 蛋白表达明显降低( P< 0. 05) 。 与手术组相比较,PDX 处理组 老年大鼠肺损伤评分及肺组织 W / D 显著降低( P<0. 01) ,肺泡灌洗液中蛋白浓度及 IL-1β、IL-6 和 TNF-α 含量明显 下降( P<0. 01) ,肺组织中 MDA、ROS 含量及 NF-κB 蛋白表达显著降低,SOD 活性及 HO-1 蛋白表达明显升高( P < 0. 05) 。 结论 PDX 能够明显减低老年大鼠肺叶切除术后的肺损伤程度,这种作用可能与其调节肺组织中 HO-1、 NF-κB 蛋白的表达从而抑制肺部的氧化应激反应和炎症反应相关。

研究简报

可伸缩的疾病动物模型检索技术

丘文峰， 胡金芳， 陈梅丽， 邓少嫦

2020, 37(04):  55. 

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疾病动物模型是开展医学研究及药物研发的重要支撑工具。 本文将可伸缩的大数据检索技术应用于疾病动 物模型检索,提出一种基于 ElasticSearch 的疾病动物检索平台技术方案。 系统包含采集服务、基础数据库、弹性检 索、用户数据库及第三方应用开发四部分。 结果表明,相对于传统关系型数据库构建文献检索,该技术能够提供灵 活、快速、高效的海量数据检索解决方案,并为后续智能挖掘提供便利。

恒河猴自发性脂肪瘤的病例分析

杨凤梅，李艳艳 ，刘 权， 陈丽雄， 王俊斌， 赵 远， 马 进， 徐鸿界， 禹文海， 和占龙

2020, 37(04):  59. 

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在人工饲养猴场中发现一只雄性恒河猴腹部有一隆起肿块,采食、饮水、排便等皆正常。 对其进行保定触诊, 肿块皮肤完整,肿块组织边界清楚,质地硬,实质感较强,不规则形,直径约 10 cm,触诊无明显痛感;用针管刺入肿 块组织抽取无液体样内容物。 经 B 超检测该肿块内组织形状规则,边界清晰,包膜回声及少许血流信号,呈纤维素 样变;检查体温正常;血液生理及生化指标检测,结果与正常猴比较:ALP 升高,TP、ALB、TC、RBC、HCT 降低;实施 肿块切除手术,取肿块组织切片镜检,确诊为脂肪瘤。 经手术后经过术后护理,该恒河猴预后良好。

我国实验动物科技工作发展的政策支撑与思考

王锡乐， 巩 薇，胡建武，武文卿， 陆 静，袁 宝，温泽锋， 于海波， 吴 瑕， 柳全明， 贺争鸣，李根平

2020, 37(04):  64. 

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实验动物是生命科学研究的基础材料和支撑条件,是重要的战略性科技资源,也是国家科技基础条件平台建 设的重要组成部分。 十三五国家科技创新规划提出:“开展实验动物新资源和新品种培育,加快人源化和复杂疾病 动物模型创制与应用,新增一批新品种、新品系,资源总量接近发达国家水平;… … ” 。 因此,本文从我国实验动物 法律法规、标准体系、管理制度等方面梳理我国实验动物科技工作发展的相关政策,浅谈这些政策对我国实验动物 资源建设与共享的导向作用,以及完善相关政策法规与落实管理措施的思考与建议。

研究进展

针刀治疗第三腰椎横突综合征的动物实验研究现状及展望

曾 林，唐宏图

2020, 37(04):  69. 

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目的 通过对近些年针刀对第三腰椎横突综合征基础研究的文献进行综述,了解针刀对第三腰椎横突综合 征动物实验的主要效应机制。 方法 基于目前针刀对第三腰椎横突综合征模型动物的基础研究现状,从造模方法 和从不同的效应机制方面对针刀治疗第三腰椎横突综合征动物实验研究的概况展开综述。 结果 通过对比实验 研究结果,在一定程度上肯定了针刀对第三腰椎横突综合征的治疗作用,也为临床研究及应用提供了参考和依据。

肠道菌群调控脂质代谢的分子机制

于子婷

2020, 37(04):  74. 

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人类肠道菌群基因组又被称为“人类第二基因组” ,其在人体脂肪的分解合成过程中起到了重要的调控作用。 体内肠道菌群的失调,会引起肥胖、糖尿病等在内的代谢综合症的发生。 本文从肠道菌群通过调控在脂质代谢中 起重要作用的酶类和调控因子从而为机体提供能量、减脂和改善健康状况的研究进展方面进行了综述。

小型猪糖尿病模型研究进展

赵玉琼， 陈 华

2020, 37(04):  78. 

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猪的代谢机制与人类十分相似,是糖尿病研究的理想模型动物。 本文综述了小型猪糖尿病模型的研究进展, 包括 1 型糖尿病模型、2 型糖尿病模型、遗传修饰猪糖尿病模型和糖尿病易感猪。