摘要: 摘要: 目的分析在α-亚麻酸( ALA,C18: 3) 干预后,胰岛素抵抗HepG2( insulin resistance HepG2, IR-HepG2) 细胞模型脂类合成关键基因表达水平的变化。方法HepG2 细胞造模期分为两组,由无血清培养基培养的对照组( normal control group,NC) 以及含有0. 25 mmol /L 软脂酸的无血清培养基培养的软脂酸组( palmitic acid,PA) ,培养24 h 后鉴定细胞胰岛素敏感性并测定细胞内胆固醇( total cholesterol,TCH) 、甘油三酯( Tryglyceride,TG) 水平,然后用ALA 替代20%的PA 培养12 h,再次鉴定细胞胰岛素敏感性并检测细胞内TCH、TG 水平, real time qPCR 检测TG、TCH 合成关键基因mRNA 水平,Western blot 检测TG、TCH 合成关键基因蛋白表达量。结果IR-HepG2 细胞模型建立成功,并且PA 组TCH 水平显著高于NC 组( P = 0. 0016) ,出现了脂代谢紊乱; ALA 干预IR-HepG2 细胞 12 h后,细胞活性有所恢复,与PA 组相比,ALA 组胰岛素诱导基因( insulin induced genes,INSIGs) 及脂类合成关键蛋白的mRNA 表达无明显变化; 与基因表达结果不一致的是,ALA 干预后可以特异性提升细胞内INSIG-2 蛋白相对表达量,但对INSIG-1 蛋白相对表达量没有明显影响。同时,ALA 可以显著抑制55kDa 固醇调节元件结合蛋白-2( sterol regulatory element-binding protein-2,SREBP-2 ) 、HMG-CoA 还原酶( 3-hydroxy-3-methyl glutaryl coen-zyme Areductase,HMGCR) 及脂肪酸合酶( fatty acid synthase,FASN) 蛋白的表达,且ALA 组细胞内TG 水平显著降低( P =0. 0119) 。结论0. 05 mmol /L ALA 干预IR-HepG2 细胞后,通过提升INSIG-2 蛋白的表达,抑制SREBP-2 从内质网到高尔基体的剪切成熟活化,降低细胞内55kDa SREBP-2 水平及HMGCR 的表达,并且抑制FASN 表达,从而抑制了TG/TCH 的合成。
中图分类号: