当期目录

2021年 第38卷 第3期    刊出日期：2021-08-06

上一期    下一期

研究报告

二乙基亚硝胺诱导小鼠肝纤维化动态模型的建立及病理机制初探

王明亮, 彭蕴茹

2021, 38(3):  1. 

摘要 ( )  

相关文章 | 计量指标

摘要:目的 为 探 究 肝 纤 维 化 的 发 生 发 展 机 制 及 病 理 病 因 的 特 点, 本 研 究 通 过 建 立 二 乙 基 亚 硝 胺( diethylnitrosamine,DEN)诱导的肝纤维化动态小鼠模型,动态监测上述小鼠模型的血清生化指标,推断肝纤维化阶段。 方法 雄性 C57BL / 6 小鼠按梯度剂量每周 2 次腹腔注射 DEN,连续 8 周。 分别在第 2、4、6 和 8 周收集小鼠的血清和肝组织,通过检测相应血清生化指标、肝组织羟脯氨酸含量以及组织病理学检查监测和评估小鼠肝纤维化的发病进程。 采用 Western blot 检测 TGF-β1、α-SMA 和 TLR4 / MyD88 / NF-κB 信号通路相关蛋白以探究肝纤维化的发病机制。 结果 从第 4 周开始,与 对 照 组 相 比, DEN 诱 导 小 鼠 的 肝 功 能 相 关 血 清 生 化 指 标 ( AST、 ALT、 ALP、T-BIL、A / G 等)出现显著变化,且体质量出现明显下降。 肝脏指数出现明显下降,组织中羟脯氨酸含量均显著升高(P<0. 01) ,组织病理学结果显示 DEN 诱导组小鼠肝组织开始出现轻微胶原沉积。 Western blot 结果表明模型组小鼠肝组织中TGF-β1 和 α-SMA 表达显著上调,TLR4、MyD88、TRAF6 及细胞核 NF-κB p65 蛋白表达水平显著升高,细胞质 p65 NF-κB 表达显著下调。 结论 研究结果表明,肝纤维化的发生机制与肝损伤后激活 TLR4 / MyD88 / NF-κB 信号通路相关,而 TLR4 炎症通路的激活又进一步促进分泌 TGF-β1 并激活肝星状细胞从而导致大量细胞外基质沉积。 本研究表明,通过 DEN 诱导的小鼠肝纤维化发病机制可能与炎症相关,且可通过结合多个血清生化指标初步判断肝纤维化阶段。




CD40 免疫检查点人源化小鼠的制备及在抗体药物研究中的应用 

张静, 张赞, 赵磊, 郭雅南, 黄蕤, 许立达

2021, 38(3):  10. 

摘要 ( )  

相关文章 | 计量指标

摘要:目的 实验动物模型是生物药物开发领域包括肿瘤学研究、抗体药物开发、临床前药效及安全评价等的一种重要工具。 制备 CD40 人源化小鼠能够为 CD40 抗体的临床前 药 效、药 理 研 究 和 安 全 性 评 价 提 供 更 多 的 可 能。方法利用 CRISPER / Cas9 系统制备获得 CD40 人源化小鼠后,通过 RT-PCR 以及流式细胞术检测 CD40 人源化小鼠表达人 CD40 情况。 基于 CD40 人源化小鼠建立肿瘤模型并评价 CD40 激动剂单克隆抗体的药效作用和安全性。结果CD40 人源化小鼠只表达人 CD40,并且各淋巴细胞比例与野生型小鼠对比没有明显改变。 CD40 单克隆抗体作用后能够显著抑制肿瘤生长,发挥药效同时引起的小鼠体质量下降可能与药物作用后引起的小鼠肝脏和肾脏毒副作用有关。 结论 本研究成功制备了 CD40 人源化小鼠,是 CD40 抗体药物作用效果和安全性评价的一种有效动物模型。






耐辐射奇球菌急性毒性研究

许琴, 宋来阳, 张蕾, 李佳佳, 马娜, 江俊峰, 刘爱中, 蒲凤萍, 邓培, 刘江伟, 王玮

2021, 38(3):  17. 

摘要 ( )  

相关文章 | 计量指标

摘要:目的 探讨耐辐射奇球菌( Deinococcus radiodurans,DR)活菌及细菌破碎物的急性毒性。 方法 分别将 DR 高浓度 1×10⁹ / mL(高浓度活菌组) 、低浓度 1×10⁷ / mL(低浓度活菌组) 、细菌破碎物高浓度 1× 10⁹ / mL( 高浓度细菌破碎物组) 、低浓度 1×10⁷ / mL(低浓度细菌破碎物组) 以 0. 4 mL / 10 g 灌胃 KM 小鼠,TGY 培养基组灌胃相同体积的胰蛋白胨葡萄糖酵母琼脂培养基( tryptone glucose yeast agar medium) ,间隔 8 h,灌胃 2 次后,观察 14 d,以小鼠行为学、脏器系数、体质量、血常规(白细胞、淋巴细胞、红细胞、血红蛋白、红细胞压积、平均红细胞体积、血小板) 以及血浆生化指标(谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总蛋白、肌酐、肌酸激酶、镁、磷、肌酸激酶 MB 型同工酶、乳酸脱氢酶) 变化作为评判依据,比较分析耐辐射奇球菌的毒性。 结果 不同剂量组的小鼠,均未见分泌物、大小便、呼吸及运动异常,灌胃后 0. 5 h 至实验结束,未观察到反应迟钝、瞳孔改变、眼球凸出、眼睑下垂、皮肤颜色改变等异常,受试小鼠体质量、血常规和血液生化指标与 TGY 培养基组比较,无显著差异,脾脏系数在低浓度细菌破碎物组有显著增大,病理学检查,未见实质性病变。 结论 DR 活菌及其细菌破碎物对小鼠无急性毒性,为 DR 在临床中的拓展应用提供实验依据。




CB6F1-Tg( HRAS) Nifdc 小鼠与 CByB6F1-Tg( HRAS)2Jic 小鼠的脏器及血液生理指标测定与比较分析

刘甦苏, 魏杰, 王辰飞, 岳秉飞, 范昌发

2021, 38(3):  23. 

摘要 ( )  

相关文章 | 计量指标

目 的 比 较 自 主 建 立 的 C57BL / 6J-Tg ( HRAS) 转 基 因 小 鼠 与 BALB / cJ 小 鼠 的 杂 交 1 代 小 鼠 CB6F1-Tg( HRAS) Nifdc(简称 CB6F1-NIFDC)与日本转基因小鼠模型杂交 1 代小鼠 CByB6F1-Tg( HRAS) 2Jic( 简称 CB6F1-CIEA)的脏器及血液生理指标异同,丰富自建模型的基础数据。 方法 选取 8 周龄的 CB6F1-NIFDC 及 CB6F1-CIEA 各 10 只,雌雄各半,活体称体质量,随后解剖并测定其主要脏器质量及血液生理指标。 结果 自主建立的CB6F1-NIFDC 及日本引进的 CB6F1-CIEA 小鼠模型的部分脏器质量和血生理参数有差异性,脏器质量结果表明,雌性小鼠的心、肝、肺、左右肾等指标存在一定差异;雄性小鼠的肝、肺、左右肾、胸腺、左右睾丸指标质量有差异。 22项血液生理指标方面,雌性小鼠在 RBC、HGB 等 7 项指标差异极显著( P<0. 01) ;而雄性小鼠在 RBC、HCT 等 5 项指标差异极显著( P<0. 01) 。 结论 本文测定了两种模型脏器指标及生理指标,为自建模型在新药安全评价实验中的应用提供参考。




黄芪甲苷对糖尿病性白内障 SD 大鼠晶状体组织的MDA、SOD 及 GSH-Px 水平的影响研究

解艳艳, 孙雅彬

2021, 38(3):  29. 

摘要 ( )  

相关文章 | 计量指标

目的 探讨黄芪甲苷对糖尿病性白内障大鼠晶状体组织氧化应激损伤的保护作用。 方法 将 120 只 SD 大鼠随机选取 30 只作为对照组,剩余 90 只大鼠腹腔注射 55 mg / kg 链脲佐菌素( STZ)溶液建立糖尿病模型。 建模成功后,随机分为模型 组、低 剂 量 干 预 组 及 高 剂 量 干 预 组,每 组 30 只。 低 剂 量 干 预 组 和 高 剂 量 干 预 组 分 别 给 予120 mg / kg 和 240 mg / kg 黄芪甲苷,连续灌胃 12 周。 分别于第 18 周和第 24 周对大鼠进行晶状体透明度检测,并于第 24 周结束 后,取 大 鼠 的 晶 状 体 组 织,检 测 晶 状 体 组 织 中 丙 二 醛 ( malondialdehyde, MDA ) 、 超 氧 化 物 歧 化 酶( superoxide dismutase, SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶( glutathione peroxidase, GSH-Px) 的水平。 结果 第 18 周和第24 周,检测发现糖尿病模型组较对照组晶状体混浊程度明显加重( P<0. 05) ,干预组大鼠晶状体混浊程度明显低于糖尿病性白内障模型组大鼠( P<0. 05) ,高剂量干预组大鼠晶状体混浊程度明显低于低剂量干预组大鼠( P< 0. 05) 。第 24 周结束后,检测发现已经形成白内障的模型组大鼠晶状体 MDA 含量较正常对照组大鼠明显升高( P< 0. 05) ,晶状体 SOD 及 GSH-Px 含量较对照组明显降低( P<0. 05) ;两干预组较模型组大鼠晶状体 MDA 含量显著降低( P<0. 05) ,SOD 及 GSH-Px 含量显著增加( P < 0. 05) ;高剂量干预组较低剂量干预组大鼠晶状体 MDA 含量显著降低(P<0. 05) ,SOD 及 GSH-Px 含量显著增加( P<0. 05) 。 结论 黄芪甲苷能增强糖尿病性白内障大鼠晶状体组织中SOD 及 GSH-Px 活性,清除晶状体组织中的氧自由基,抑制脂质过氧化反应,降低 MDA 水平,并且对于预防糖尿病性白内障大鼠晶状体混浊也具有一定的作用,且高剂量的黄芪甲苷较低剂量的黄芪甲苷作用更加明显。




氢吗啡酮对炎性痛大鼠脊髓 ERK1 / 2 信号通路的影响 

石晓玲, 贾伟

2021, 38(3):  34. 

摘要 ( )  

相关文章 | 计量指标

摘要:目的 探讨氢吗啡酮对炎性痛大鼠脊髓 ERK1 / 2 信号通路的影响。 方法 选择 SPF 级雄性大鼠 30 只,随机分为 3 组,正常组、模型组和氢吗啡酮组;检测各组大鼠热痛阈和机械痛阈;ELISA 检测血清中 TNF-α、IL-6 和 IL-10的含量;Western blot 检测各组大鼠脊髓中 ERK1 / 2 和 p-ERK1 / 2 蛋白表达水平;qRT-PCR 法检测各组大鼠脊髓中ERK1 / 2 mRNA 表达水平。 结果 与正常组相比,模型组大鼠血清炎症细胞因子 TNF-α 和 IL-6 含量明显增高,IL-10 含量明显降低,且术侧后肢热痛 阈 显 著 缩 短 及 机 械 痛 域 明 显 降 低,差 异 均 有 统 计 学 意 义 ( P < 0. 05) ;脊 髓 中ERK1 / 2 mRNA 表达水平、ERK1 / 2 及 p-ERK1 / 2 蛋白表达水平均显著升高,差异有统计学意义( P< 0. 05) 。 注射氢吗啡酮后,与模型组相比,大鼠血清 TNF-α 和 IL-6 含量显著降低而 IL-10 含量显著升高,热痛阈显著延长及机械痛域明显升高,差异均具有统计学意义( P<0. 05) ;氢吗啡酮组 ERK1 / 2 mRNA 表达水平、ERK1 / 2 和 p-ERK1 / 2 蛋白表达水平均明显降低( P<0. 05) 。 结论 氢吗啡酮可有效改善弗氏完全佐剂诱导的大鼠炎性疼痛,其抗炎镇痛机制与降低大鼠机体炎性因子的产生,并抑制 ERK1 / 2 信号通路的活化有关。




四氯化碳致大鼠肝纤维化动物模型的文献再评价 

李高辉, 吕文良, 闫 暾, 李娟梅, 武庆娟, 赵 婷

2021, 38(3):  39. 

摘要 ( )  

相关文章 | 计量指标

摘要:目的 通过相关文献阅读分析,比较目前利用四氯化碳( CCl4 )诱导肝纤维化的造模方法,制订出最佳的造模方案,为科学研究提供参考借鉴。 方法 计算机检索数据库(中国知网、万方数据知识服务平台、维普网) 获取近五年相关文献,选取实验病理结果和血清学检查谷丙转氨酶( ALT) 、谷草转氨酶( AST)对文献进行评分。 对相关实验影响因素做出评价,进而制定出模型诱导的标准。 结果 模型组病理结果均显示出正常肝小叶结构被破坏和小叶间纤维间隔形成,血清检查 ALT 和 AST 指标较空白对照组均有明显的增长。 结论四氯化碳油剂诱导肝纤维化模型是可靠的实验方案,且动物品系、药物作用途径、四氯化碳浓度等因素均对实验结果产生影响。





不同干预方式对 ASD 大鼠认知能力的影响及机制探讨

魏渼淇, 刘忠民, 冯广智

2021, 38(3):  47. 

摘要 ( )  

相关文章 | 计量指标

摘要:目的 观察有氧运动、丰富环境及二者结合对孤独症谱系障碍( ASD) 大鼠认知功能和海马组织中 ASD 易感基因 NRXN1、NL3 和 Shank3 表达的影响,探讨其纠正自闭症异常行为的效果及其可能机制。 方法 采用向 Wistar孕鼠腹腔注射丙戊酸钠建立 ASD 大鼠模型,选取 40 只成功建模的子代大鼠随机分为有氧运动组、丰富环境组、有氧+环境组以及 ASD 模型组,每组 10 只;在常规饲养的母鼠所产子代中随机挑选 10 只作为空白对照组。 有氧运动组大鼠接受持续 8 周、6 次 / 周、每次在同一时间段、持续 90 min 的游泳运动干预;丰富环境组大鼠饲养于内有各种玩具、可供大鼠嬉戏玩耍的丰富环境饲养笼;运动+环境组接受运动干预,同时在丰富环境中饲养;ASD 模型组和空白对照组不予干预。 干预后,采用旷场实验和 Morris 水迷宫实验观察其行为学表现与改变;采用 Western blot 检测大鼠海马组织中 NRXN1、NL3 和 Shank3 蛋白表达情况;采用 RT-PCR 检测大鼠海马组织中 NRXN1、NL3 和 Shank3的 mRNA 表达水平。 结果 与空白组比较,ASD 模型组、有氧运动组、丰富环境组及有氧 +环境组的穿格次数少( P<0. 05) 、逃避潜伏期长( P<0. 05) 、原平台象限活动时间缩短( P<0. 05) ,NL3、NRXN1 和 Shank3 蛋白的 mRNA 表达均明显降低( P<0. 05) ;与 ASD 模型组比较,有氧运动组、丰富环境组及有氧+环境组的穿格次数明显增加( P<0. 05) 、逃避潜伏期明显缩短( P<0. 05) 、原平台象限活动时间延长( P<0. 05) ,大鼠海马组织中 NL3、NRXN1、Shank3蛋白的 mRNA 表达均明显升高( P<0. 05,有氧+环境组 P< 0. 01) ;有氧运动组、丰富环境组及有氧+环境组相互比较,其穿格次数、逃避潜伏期、原平台象限活动时间与 NL3、NRXN1 和 Shank3 蛋白的 mRNA 表达均无显著性差异( P>0. 05) 。 结论 有氧运动、丰富环境及二者结合均可提高丙戊酸钠诱导的 ASD 模型大鼠的认知能力,一定程度纠正其异常行为,有氧运动结合丰富环境的干预效果优于单纯的有氧运动、单纯的有氧运动优于单纯的丰富环境。其作用机制可能与 NRXN-NLGN-SHANK 通路有关。




基于 VB 的实验动物环境设施参数快速计算器开发与应用初探

刘巍, 赵明海, 侯丰田, 张潇, 刘志国, 张心妍, 梁春南

2021, 38(3):  54. 

摘要 ( )  

相关文章 | 计量指标

摘要:实验动物设施环境检测是设施建设验收及实验动物行政许可制度实施的组成部分,也是设施使用单位监测了解设施运行状况的重要手段。 中国食品药品检定研究院作为实验动物设施环境检测业务提供单位,在获得大量的现场检测数据后,有必要尽快完成数据的计算和报告制作,以实现对客户在质量和效率上的承诺。 本文介绍了一款由中检院设施环境检测团队基于 VB 编程设计的实验动物设施环境参数快速计算器的主要功能和关编程逻辑图。




研究简报

SD 大鼠凝血四项检查正常参考值范围探讨 

刘珍清, 赵媛媛, 任一冉, 张美龄, 刘颖

2021, 38(3):  59. 

摘要 ( )  

相关文章 | 计量指标

摘要:目的 建立北京中医药大学北京中医药研究院医学检验实验室 SD 大鼠血浆中凝血四项正常参考值范围。方法 利用全自动凝血分析仪测定 40 只 SD 大鼠血浆中的凝血酶原时间( PT) 、活化部分凝血酶时间( APTT) 、凝血酶时间( TT)和纤维蛋白原( FIB)水平。 结果 正常 SD 大鼠血浆中的凝血四项参数比较稳定,PT 的参考值范围为 14. 96 ~ 15. 86 s,APTT 为 15. 25 ~ 18. 83 s,TT 为 43. 06 ~ 53. 18 s 及 FIB 为 1. 94 ~ 2. 21 g / L。 结论 建立了该实验室正常 SD 大鼠的凝血四项检查参考值范围,为药理实验提供参考数值,对其安全性毒理学评价有重要意义。




大鼠脑缺血再灌注模型制作流程详述及经验总结 

吴琳, 吴芳, 刘娅楠, 张娜, 陶成斌, 张延英, 徐晓艳

2021, 38(3):  62. 

摘要 ( )  

相关文章 | 计量指标

摘要:目前制作大鼠大脑中动脉缺血以及缺血再灌注实验动物模型方法多样,改良线栓法在实验过程中选用较多,此法已经被证明有手术创伤小、相对操作简单等特点。 即便如此,此法造模成功率仍较低,因此,一篇描述改良线栓法注意事项及细节的文章很有必要,为将来进行大鼠大脑缺血再灌注造模的实验人员提供经验指导,也为更多的实验者交流提供参考。 为此,通过实验,摸索总结出实验详细过程,并指出实验过程中需要关注的细节,为即将造模的实验者提供捷径。




巴马小型猪胰腺解剖学特点

赵玉琼, 戴鑫, 陈华

2021, 38(3):  66. 

摘要 ( )  

相关文章 | 计量指标

摘要:胰腺是重要的消化器官。 以往关于猪胰腺的解剖组织学研究,主要侧重于血管和导管的分布。 本研究利用本课题和其他课题中的 24 头对照组动物,观察和测定巴马小型猪胰腺的组织形态学数据。 结果表明:巴马小型猪的胰腺形态变异较大,大体结构可分为 3 个叶,即脾叶、十二指肠叶和连接叶;初步分为 3 种类型,即标准型、纤细型和粗壮型;24 头猪中,3 种类型分别占比 16 / 24、6 / 24 和 2 / 24。 胰腺占比体质量的 0. 09% ~ 0. 15%。 巴马小型猪的胰岛普遍较小,以超小胰岛居多。 胰岛占比胰腺的 1. 52% ~ 4. 98%。 胰岛 β 细胞占比体质量的 0. 012‰ ~ 0. 024‰。




单操作者大鼠腹腔异位心脏移植模型的建立与改良 

曾顺, 刘达兴

2021, 38(3):  70. 

摘要 ( )  

相关文章 | 计量指标

摘要:目的 学习并改良大鼠腹腔异位心脏移植模型的建立过程,降低手术难度,减短学习周期,使模型易建立以供于移植免疫、病理、药理等方面的研究。 方法 建立大鼠腹部异位心脏移植模型,归纳总结整个过程中的操作技巧。 结果 正式实验 30 例,存活 29 例,存活率 96. 7% 。 术中刺伤心脏,开放后无法止血死亡 1 例,供心阻断时间为(24. 2±5. 0) min,手术时间为(59. 8±10. 0) min。 结论 单操作者大鼠腹腔异位心脏移植模型的操作方法经过改良后,缩短了手术时间,降低了手术难度,提高了手术成功率。




研究进展

实验动物病理学检测与实施成果 

赖梦雨, 周向梅, 赵德明, 杨利峰

2021, 38(3):  75. 

摘要 ( )  

相关文章 | 计量指标

摘要:实验动物是生物医药发展不可或缺的重要基石与工具,实验动物质量密切关系到科学实验结果的可靠性、准确性及相关产品使用的安全性。 因此,对实验动物质量进行严格的控制势在必行。 病理学是动物疾病诊断的“ 金标准” 。 因此,病理学检查是实验动物质量控制不可或缺的技术手段,通过临床病理学、大体病理学和组织病理学的检查,能够对实验动物的健康状况有一个系统而全面的认识,也为规范实验动物管理和保障实验动物质量提供重要的依据。




椎间盘退变动物模型的研究进展

张欣怡, 杨艳妮, 姬笑颜, 李含笑, 刘西纺

2021, 38(3):  79. 

摘要 ( )  

相关文章 | 计量指标

摘要:椎间盘退变是各种脊柱退变性疾病发生的前提条件和病理基础,影响患病人群的身体健康和降低他们的生活质量,同时给家庭和社会带来负担。 虽然国内外关于椎间盘退变研究较多,但其退变原因尚未十分清晰,使用相关动物模型对研究其退变机制及治疗手段具有重要意义。 针对目前椎间盘退变动物模型的研究现状,本文就实验动物的选择及造模方法进行归纳总结。