当期目录

2020年 第37卷 第03期    刊出日期：2020-06-28

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研究报告

CAV-1感染MDCK中各IFN及受体分子表达谱的差异

孟兴,佟相慧,陈洪岩,韩凌霞

2020, 37(03):  1. 

摘要 ( )  

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目的 分析犬肾细胞系(MDCK)感染犬腺病毒1型(CAV-1)后各种干扰素(IFN)亚型及其受体分子转录水平的表达情况。方法 建立犬 IFN-β、IFN-β 受体(IFNAR1)、IFN-λ1、IFN-λ1 受体(IFN-λ1R)、IFN-λ3 和 IFN-λ3 受 体(IFN-λ3R)的染料法定量PCR方法，分析了 MDCK在Poly I：C处理和接种CAV-1后细胞内各IFN及受体分子转录水平的相对含量。结果 正常MDCK细胞内存在较高含量的IFN-X3R且含量显著高于其他IFN及受体分子的 转录水平；用Poly I：C处理MDCK细胞24 h后，IFN-X1R、IFN-X3和IFN-X3R的表达量均显著性上调，而IFN-λ1R、IFN-λ3和IFN-λ3R几乎没变化；接种CAV-1后，IFN-α的含量急剧上升至6倍。结论 MDCK细胞存在不同水平浓度的 IFN分子及其受体转录产物，且在Poly I：C刺激和腺病毒感染时受体分子的表达谱不同。

大鼠颈总动脉球囊拉伤模型的制作研究

王 威，张颖倩，李中轩，周 瑾，陈韵岱

2020, 37(03):  6. 

摘要 ( )  

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目的 通过对大鼠颈总动脉球囊拉伤模型制作技术的创新和探索，不断优化策略提高动物模型的成活率 和成材率，形成稳定的造模技术，为经皮冠状动脉腔内成形术术后并发症的预防和治疗提供实验基础。方法 将25只Sprague-Dawley（SD）大鼠随机分为三组,分别为大球囊组（球囊直径2.0 mm）11只、小球囊组（球囊直径 1.5 mm） 11只、假手术组3只，大球囊组和小球囊组应用不同大小的球囊进行模型制作，术后14 d通过伊凡氏蓝 染色进行验证，动脉拉伤后颈总动脉内膜成功着色者为造模成功。结果小球囊组造模成功10例（成功率 90.9%，10/11），大球囊组造模成功5例（成功率45.5%，5/11），两组造模成功率差异具有统计学意义，两组内膜 损伤面积无显著差异。结论 应用1. 5 mm球囊可以实现对内膜的有效损伤，且造模成功率较2. 0 mm球囊显著升高。

积雪草苷调控miR-342-5p/AQP3轴保护IL-1β诱导的软骨细胞损伤

付涟桥，郭焱雄，李坚，周新林

2020, 37(03):  10. 

摘要 ( )  

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目的 探讨积雪草昔(Ass)对白细胞介素1B(IL-1B)诱导的软骨细胞损伤的影响及作用机制。方法 不同 浓度的Ass作用IL-1B诱导软骨细胞24 h,流式细胞仪检测细胞凋亡，酶联免疫吸附法检测细胞培养上清液中白细 胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平，实时荧光定量PCR检测细胞中miR-342-5p和水通道蛋白3 (AQP3)mRNA表达水平,Western Blot法检测B淋巴细胞瘤-2 (Bcl-2)、B淋巴细胞瘤-2相关蛋白(Bax)和AQP3蛋 白表达水平。双荧光素酶报告基因实验验证miR-342-5p与AQP3靶向关系。转染miR-342-5p抑制剂或AQP3过表达载体至软骨细胞，上述相同方法检测抑制miR-342-5p表达或AQP3过表达对IL-1β诱导的软骨细胞凋亡及IL- 6和TNF-α表达的影响。结果 Ass可抑制IL-1β诱导的软骨细胞凋亡率、Bax蛋白、IL-6和TNF-α表达及miR- 342-5p表达(P <0. 05),促进Bcl-2蛋白、AQP3 mRNA和蛋白表达(P <0.05)。miR-342-5p在软骨细胞中负调控 AQP3表达。抑制miR-342-5p或AQP3过表达后，IL-1&诱导的软骨细胞凋亡率、Bax蛋白、IL-6和TNF-α表达降低 (P <0. 05) ,Bcl-2蛋白表达升高(P <0.05)。抑制AQP3表达逆转了抑制miR-342-5p对IL-1β诱导的软骨细胞凋 亡、Bax和Bcl-2蛋白及IL-6和TNF-α表达的影响。结论 Ass可抑制IL-1β诱导软骨细胞凋亡和炎症反应,其可 能通过调控miR-342-5p/AQP3保护软骨细胞损伤。

腹主动脉缩窄法建立大鼠心衰模型的研究

谭巍，任澎

2020, 37(03):  19. 

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目的 通过研究不同程度缩窄腹主动脉对Wistar大鼠心脏功能的影响，建立大鼠心衰模型。方法 将Wistar 大鼠随机分成3组,A组为假手术组,B组缩窄腹主动脉直径至0. 45 mm,C组缩窄腹主动脉直径至0. 7 mm,术后观察大鼠生存情况、精神状态等一般情况，在4周和8周分别应用超声心动图检测舒张末期室间隔厚度（IVSd）、舒张 末期左室后壁厚度（LVPWd）、左室舒张末期内径（LVEDd）、左室收缩末期内径（LVEDs）和射血分数（LVEF）,并取 标本测量左心室质量指数LVWI、心/体比、肺/体比，评价心功能的变化。结果 术后A组存活率为100%、B组存活率为55%、C组存活率为70%>；4周时B组IVSD、LVPWd、LVEDd、LVEDs、LVEF与A组和C组均有显著差异（P 0. 05）。8周时B、C两 组IVSD、LVPWd、LVEDd、LVEDs、LVEF与A组相比差异显著（P <0. 05） ；8周时LVWI、心/体比、肺/体比B组和C 组分别与A组相比均有极显著差异（P<0.01），C组与B组相比LVWI、心/体比有显著差异（P <0. 05），肺/体比差 异极显著（P<0.01）。结论 腹主动脉缩窄至直径0. 45 mm比缩窄至0. 7 mm心衰成模所需时间短，成模效率高， 是建立大鼠心衰模型的理想方法。

探究左旋甲状腺素治疗孕期母鼠亚临床甲减的最佳时期

王鑫，罗才全，李小兰，唐雪

2020, 37(03):  25. 

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目的 分析左旋甲状腺素（L-T4）治疗孕期母鼠亚临床甲减的最佳时期。方法 选取150只SPF级Wistar雌鼠按数字表法随机分为6组（n = 25）:①对照组；②甲减组；③亚甲减组；④亚甲减治疗A组；⑤亚甲减治疗B组；@ 亚甲减治疗C组。采用酶联免疫法测定孕鼠血清促甲状腺激素（TSH）、总甲状腺素（TT4）水平含量；采用Nissl染 色法观察大脑皮质和海马形态学变化；采用Morris水迷宫实验法检测仔鼠学习记忆能力。探究L-T〈治疗孕期母鼠 亚临床甲减最佳时期。结果 P3、P7、P40时亚甲减组仔鼠体质量低于对照组（P<0.05）,其中P3时甲减组仔鼠体 质量低于亚甲减组（P<0. 05） ；P7时甲减组仔鼠体质量显著低于亚甲减治疗A组、B组（P<0. 05）；P40时甲减组仔 鼠体质量低于亚甲减治疗B组、C组（P<0. 05）,差异有统计学意义。对照组较其他各组仔鼠逃避潜伏时间下降趋 势明显，且呈稳定进行性下降。亚甲减组、亚甲减治疗C组与甲减组仔鼠皮质及海马各层神经细胞排列紊乱，且锥体细胞较小。结论 亚临床加减可明显影响Wistar雌鼠体质量正常发育，降低后代学习记忆能力，若在E13之前给予L-T4治疗可逆转该损害，改善妊娠不良结局。

复方山楂煎剂对非酒精性脂肪肝大鼠模型的影响

李月，李想

2020, 37(03):  31. 

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目的 研究复方山楂煎剂对非酒精性脂肪肝的治疗作用及其作用机制。方法 将60只Wistar大鼠随机分 为空白对照组、模型对照组、复方山楂煎剂(低剂量14. 85 g生药/kg、中剂量29.7 g生药/kg、高剂量59.4 g生药/ kg)组，脂必妥对照组，除空白对照组外其余各组采用高脂饲料喂养大鼠8周，造模后空白对照组、模型对照组灌胃给予蒸馏水，其余各组灌胃给予相应药物，治疗6周。实验结束后，检测各组大鼠血清丙二醛(MDA)、超氧化物歧 化酶(SOD)、谷丙氨酸转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)以及肝组织中的甘油三酯(TG)和肝体比，并采用HE染色 观察肝组织脂肪变性程度，采用免疫组化法检测肝组织中肝细胞生长因子(HGF)及结缔组织生长因子(CTGF)的 表达。结果 复方山楂煎剂可显著降低脂肪肝模型大鼠肝体比、血清MDA、ALT以及肝脏TG含量(P<0.05或P< 0.01)和结缔组织生长因子(CTGF)在脂肪肝模型大鼠肝组织中的表达(P<0.05)。复方山楂煎剂中剂量组、高剂量组可显著降低脂肪肝模型大鼠血清AST含量(P<0. 05或P<0. 01)、显著提高脂肪肝模型大鼠血清SOD的活性 (P<0. 05或P<0.01)和显著降低肝细胞生长因子(HGF)在脂肪肝模型大鼠肝组织中的表达(P <0.05)。复方山楂 煎剂可显著降低高脂饮食诱发的肝细胞脂肪变性程度。结论复方山楂煎剂可有效地用于非酒精性脂肪肝的治疗。

麦秸秆用于实验动物垫料物理化学特性比较研究

胡建武，赵德明，周向梅

2020, 37(03):  37. 

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目的 比较研究麦秸(气爆处理后) 、玉米芯、刨花及纸质四种垫料含水量、吸水性、保温性、重金属和有机农 药残留等物理化学特性以及微生物污染情况,为新型麦秸实验动物垫料开发应用提供科学依据。 方法 依照北京 地方标准,对麦秸垫料与其他三种垫料的含水量、吸水性、重金属及农药残留情况等进行测试与比较分析,通过升、 降温实验比较四种垫料的保温性。 结果 麦秸垫料含水量、吸水性、重金属及有机农药残留符合北京地方标准。 结论 麦秸垫料吸水性显著优于其他三种垫料,保温性能好,微生物含量少,具有来源广、价格低、易保存等优点, 并且可减少林木资源消耗,利于环境保护,可作为产业化推广应用。

药物致横纹肌溶解的动物实验研究

裴 佩， 鹿双双，汪聿坤， 胡艳欣， 卢选成，王 锐， 路 凯

2020, 37(03):  43. 

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目的 探索他汀类药物、贝特类药物联合给药在大鼠、小鼠中导致横纹肌溶解的情况,为后续进行哈夫病等 病因不明的横纹肌溶解综合征研究提供参考。 方法 采用辛伐他汀、吉非罗齐联合给药及单独给药对 Wistar 大鼠 (5 周龄) 、ICR 小鼠(5 周龄)连续灌胃给药 14 d,测定血清肌酸激酶( CK) 、肌红蛋白( MYO) 、谷草转氨酶( AST) 、谷 丙转氨酶( ALT)的含量,对其肌肉损伤指标变化趋势进行分析。 在实验结束后取后肢肌肉组织进行苏木精-伊红 ( HE)染色病理切片检查。 结果 辛伐他汀、吉非罗齐连续联合给药 10 d 后 Wistar 大鼠 CK、ALT、AST 升高,与给药 前及对照组对比差异显著( P<0. 05) ,肌肉组织病理检查显示肌纤维坏死。 ICR 小鼠给药前后,与对照组相比,各生 化指标无显著性差异。 结论 Wistar 大鼠在药物作用下可发生横纹肌溶解,提示在后续进行哈夫病等不明原因横 纹肌溶解动物实验研究时,可考虑使用 Wistar 大鼠。

研究简报

我国实验动物机构认可制度的建立与实施

史光华， 贺争鸣， 李根平，高 诚， 荣瑞章， 卢胜明

2020, 37(03):  53. 

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实验动物机构认可制度是以实验动物福利伦理为核心评价内容的国家认可制度。 本文从我国实验动物机构 认可制度研究建立的社会经济背景谈起,介绍了我国实验动物机构认可制度研究建立的历史过程、取得的主要研 究成果、实验动物机构认可评价体系框架及其相关支持文件的内容以及制度实施运作的情况。 采用比较分析的方 式,分析和强调了我国实验动物机构认可制度在制度设计、评审内容、评审结果以及配套服务方面的特点和优势。 截至目前,我国已经有八家实验室获得了该项制度的认可资格,该项制度虽然刚刚起步,但已显示出它对强化我国 实验动物的福利伦理、推动实验动物科技发展方面的独特作用。

猕猴进行遥测系统植入子植入手术的经验体会

卢祺炯，徐 聪，陈灵芳，杨 倩，夏丽娟， 杨红忠， 郑高利

2020, 37(03):  60. 

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目的 探讨猕猴应用遥测技术进行植入子在植入手术围手术期内遇到的各类状况以及处理措施。 方法 对 本机构 8 例猕猴的植入子植入手术过程中出现的问题进行归类、分析和总结。 对出现的术前麻醉与备皮、给药困 难,术中出血量、麻醉程度,术后切口淤肿、动物自主破坏缝线或植入子导线等问题分析产生原因,提出预防或解决 方法并予以实施,通过手术前后体质量、体温、血常规、生化指标的检测结果确认无感染或炎症等不良预后,通过检 测术后心血管系统各指标并与猴白昼基础值进行比较确认术后生理状态良好。 结果 通过标准化的手术过程与 完善的应对异常的预案,成功实施了植入子植入手术,手术成功进行并且术后恢复良好,受术猴的体质量、血常规、 生化、心电、呼吸、血压、体温等指标显示手术前后基本无差别。 结论 通过猕猴遥测系统植入子植入手术实例,成 功实施猴应用遥测系统的手术流程,提高了遥测动物模型建模的成功率,对国内机构使用植入式遥测系统建立大 动物模型在安全药理学研究的应用中起到一定的借鉴作用。

遗传工程小鼠冻存卵巢异体原位移植比较研究

左 琴，王劲松， 范 涛 ，朱婉月， 刘秋菊， 刘佐民

2020, 37(03):  65. 

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目的 对 C57BL / 6 J 为背景的遗传工程小鼠卵巢冷冻及复苏后原位移植进行研究,建立遗传工程小鼠卵巢 冷冻方法,弥补小鼠资源保种体系。 方法 采用 DAP213 方法冷冻保存了 C57BL / 6 J 及 SCARB2、PSGL1、IGB3S 三 个遗传工程小鼠 10 日龄幼鼠的卵巢,将四个品系 10 日龄幼鼠的新鲜卵巢及冻存复苏卵巢原位移植到 4 周龄 C57BL / 6 J 及 C57BL / 6 J( Cg) —Tyrc- 2 J / J( B6 albino)受体雌鼠,术后饲养 5 周与 10 周龄性成熟 C57BL / 6 J 雄鼠交 配,观察移植出生幼仔。 结果 C57BL / 6 J 新鲜卵巢和冻存卵巢,三个品系遗传工程小鼠的冻存卵巢原位移植到 C57BL / 6 J 和 B6 albino 受体中,均可以恢复正常功能,交配后得到仔鼠。 结论 采用 DAP213 方法冻存 C57BL / 6 J 及以 C57BL / 6 J 为背景的遗传工程小鼠卵巢,复苏后原位移植到 C57BL / 6 J 和 B6 albino,交配后产仔,卵巢冻存方 式是小鼠资源库保存的一个重要补充。

研究进展

野生小鼠的实验动物化及研究进展

管 彤，徐 渴

2020, 37(03):  69. 

摘要 ( )  

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开展野生小鼠实验动物化以丰富现有实验小鼠品系的基因库,对遗传学、医学等生命科学和人类健康具有重 要意义,国内外学者对此进行了不懈的努力。 本文拟就野生小鼠实验动物化的重要意义、国内外实验动物工作者 近交化培育的成果及对野生来源实验小鼠的研究进展进行阐述。

啮齿类动物子宫内膜异位症模型的研究进展

时 光， 赵瑞华

2020, 37(03):  72. 

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子宫内膜异位症为妇科的常见病、多发病。 约 5% ~ 10%的育龄期女性患有子宫内膜异位症,且达 50% 的内 异症患者合并不孕。 子宫内膜异位症的发病机制尚不清楚,阐明子宫内膜异位症的发病机制尤为重要。 已有很多 报道利用动物模型对子宫内膜异位症的发病机制进行研究。 本篇综述主要介绍啮齿类动物子宫内膜异位症的模 型建立方法、应用及模型的特点。

糖尿病小鼠的周围神经病变检测

赵钺沁，杨丽芬，周怡昆

2020, 37(03):  78. 

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糖尿病周围神经病变是糖尿病常见并发症之一,其诊断及治疗仍是糖尿病慢性并发症研究的难点,这与其发 病机制尚不完全清楚有关。 长期以来,糖尿病动物模型首选大鼠,但是随着技术的进步,小鼠逐渐成为糖尿病神经 病变研究的重要工具。 目前,关于糖尿病小鼠周围神经病变的筛查方法很多,但尚无统一标准。 本文通过总结常 用的糖尿病小鼠模型和相关的周围神经病变检查方法,为进行糖尿病小鼠神经病变研究的科研工作者提供科学 参考。