实验动物科学

小肠结肠炎耶尔森氏菌、假结核耶尔森氏菌、志贺氏菌和空肠弯曲菌多重PCＲ方法的建立

冯育芳, 邢进, 岳秉飞, 贺争鸣

2016, 33(01): 1-6.

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摘要: 目的为实验动物微生物检测提供一种简便、灵敏、快速，并且特异性强的小肠结肠炎耶尔森氏菌、假结核耶尔森氏菌、志贺氏菌和空肠弯曲菌多重PCＲ检测方法。方法根据小肠结肠炎耶尔森氏菌fox 基因、假结核耶尔森氏菌inv 基因、志贺氏菌ipaH 基因及空肠弯曲菌gyrA 基因设计并筛选出特异性引物; 优化退火温度等条件，分析多重PCＲ的特异性、敏感性，使用该多重PCＲ方法检测小鼠和豚鼠样品。结果多重PCＲ扩增出了预计的PCＲ产物，即小肠结肠炎耶尔森氏菌( 511 bp) 、假结核耶尔森氏菌( 779 bp) 、志贺氏菌( 290 bp) 和空肠弯曲菌( 156 bp) 。该方法的灵敏度为1 × 10 － 3 ng /μL( 小肠结肠炎耶尔森氏菌、假结核耶尔森氏菌、志贺氏菌) 和1 × 10 － 2 ng /μL( 空肠弯曲菌) 。特异性检测未从其他菌中检测出阳性条带。使用该方法从样品中检测出不等的阳性样品数。结论该多重PCＲ方法对实验动物微生物检测具有很好的应用和开发前景。

潘婷强韧防掉发洗发露的Ames 试验研究

宗卫峰, 汪玉馨, 陆益红

2016, 33(01): 7-9.

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摘要: 目的应用Ames 试验探讨潘婷强韧防掉发洗发露是否具有致突变性。方法采用组氨酸缺陷型鼠伤寒沙门氏菌TA97，TA98，TA100 和TA102 进行潘婷强韧防掉发洗发露微生物回复突变试验。结果在1. 25 ～ 0. 156mg /皿剂量范围内，在加S9mix 和不加S9mix 平行条件下测试，试验结果为阴性。结论潘婷强韧防掉发洗发露在本实验中未见致突变性。

C57 － ras 转基因小鼠模型的血液生理生化指标比较分析

王洪, 魏杰, 巩薇, 于鹏丽, 岳秉飞

2016, 33(01): 10-14.

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摘要: 目的测定C57 － ras 转基因小鼠的血液生理生化正常值，对成年动物两性的正常值进行比较，并比较4 周龄和8 周龄的血液生理生化正常值。方法将20 只8 周龄和20 只4 周龄的近交系C57 － ras 转基因小鼠，采血后，用日本光电MEK － 7222K 血球分析仪测定血液生理指标，用OLYMPUS AU400 全自动生化分析仪测定血清生化指标。结果8 周龄动物血液生化指标中，ALB、GLU 和CHO，3 项指标雌雄间比较有显著性差异( P ＜ 0. 05) ，血液生理指标中WBC和LYM 这2 个指标雌雄差异有显著性( P ＜ 0. 05) ; 在4 周龄和8 周龄的血液生化指标比较，其中ALT、TP、ALB、ALP、P、CHO 和T． Bili，7 项有显著性差异( P ＜ 0. 05) ; 血液生理指标4 周龄和8 周龄比较，WBC、ＲBC、HGB、HCT、MCV、MCHC、ＲDW、PLT、PCT、MPV、NEUT 和LYM 12 项指标有显著性差异( P ＜ 0. 05) 。结论成年的C57 － ras 转基因小鼠的血液生理生化值，部分指标两性间测定值有差异; 4 周龄和8 周龄C57 － ras 转基因小鼠的血液生理生化值中多数指标差异显著; 年龄对C57 － ras 转基因小鼠的血液生理生化值的影响比性别对其影响要大。

胚胎－胎仔发育毒性试验中阳性模型的建立

孙昌华, 卜文, 祝清芬

2016, 33(01): 15-19.

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摘要: 目的探讨SD 大鼠胚胎－胎仔发育毒性试验中，皮下给予不同剂量的环磷酰胺进行其剂量相关性的比较研究，建立阳性模型，积累实验室背景数据。方法取健康受孕SD 大鼠100 只，按体质量随机分为溶媒对照组( Veh:7. 5 mg·kg － 1 氯化钠注射液) 、环磷酰胺低( L: 7 mg·kg － 1 ) 、中( M: 10 mg·kg － 1 ) 、高( H: 15 mg·kg － 1 ) 剂量组，每孕鼠组不少于20 只，按程序皮下注射给药，观察临床表现，统计各剂量组孕鼠的体质量、摄食量、窝质量、黄体数、着床数、活胎数、死胎数和吸收胎数等指标，以及胎鼠的性别、体质量、身长、外观畸形、内脏畸形和骨骼畸形等指标。结果环磷酰胺低、中、高各剂量组对大鼠胚胎－胎仔发育均有毒性作用且具有明显的量效关系。结论皮下给予不同剂量的环磷酰胺对大鼠胚胎－胎仔发育毒性均产生影响且具有明显的量效关系，三种给药剂量均可建立胚胎－胎仔发育毒性试验阳性模型。

犬耳部肿物病理诊断及分析

黎砚书, 武世珍, 宋志琦, 岳瑞超, 杨利锋, 赵德明, 周向梅

2016, 33(01): 20-23.

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摘要: 目的对32 例犬耳部肿物进行病理学诊断和分析，探讨犬耳部肿瘤发生的规律。方法将中国农业大学教学动物医院2009 ～ 2015 年进行过手术治疗的32 例犬耳部肿物，制成切片，根据病理学观察进行诊断并对其组织来源、年龄、发生部位及品种进行分析。结果犬耳部毛母细胞瘤和组织细胞瘤发生比率均各占26. 7%; 犬耳部肿瘤在0 ～ 4. 9 岁个体中发生率占20%，5 ～ 9. 9 岁占40%，≥10 岁占40%; 肿瘤均发生于外耳，中耳和内耳未见; 在品种方面，发生率较高的是可卡犬共8 例，其余品种均为2 ～ 3 例。结论犬耳部好发毛母细胞瘤和组织细胞瘤，且发病率随年龄增长呈上升趋势，但组织细胞瘤例外。耳部肿瘤易发在可卡犬品种，均发生在外耳。

H1N1 流感病毒感染小鼠在免疫学研究中的初步应用

赵化阳, 刘金华, 刘云才

2016, 33(01): 24-28.

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摘要: 目的研究H1N1 流感病毒感染能力及机体免疫应答反应。方法利用0. 1LD50剂量A/PＲ/8 /34 ( H1N1) 病毒感染C57BL/6 小鼠，利用ELISA 和流式细胞术等方法检测IL-5、IL-6 水平和CD4 + 效应性T 淋巴细胞比例。结果3dpi 小鼠肺脏病毒复制达到高峰，为107EID50 /g，7dpi 肺脏组织病理学观察呈间质性肺炎、炎性细胞浸润; 5dpi 时IL-6 水平达到峰值，为122pg /mL; 7dpi 时IL-5 达到峰值，为680pg /mL; 与未感染组相比，感染组CD4 + CD44 +CD62L －效应T 细胞比例显著升高。结论结果表明PＲ8 流感病毒感染小鼠，肺脏病毒复制水平高，机体免疫应答强，适合用于进一步的免疫学研究。

ApoE － / －小鼠的繁殖与鉴定

鲁晓丽, 杨文, 徐璐, 李红兵, 冉林武

2016, 33(01): 29-32.

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摘要: 目的繁殖和鉴定ApoE － / －小鼠，建立血管损伤模型，为进一步研究动脉粥样硬化奠定基础。方法将引进的小鼠采用1 只雌性与1 只雄性同笼的方式进行繁殖。从子代小鼠尾巴中提取DNA，用PCＲ法和琼脂糖凝胶电泳法鉴定小鼠的基因型。获取ApoE － / －纯合子小鼠，并绘制其0 ～ 20 周龄生长曲线。采用油红O 脂类染色法从血管形态学方面观察ApoE － / －小鼠。结果成功繁育出的ApoE － / －纯合小鼠较C57 小鼠生长缓慢，且20 周龄ApoE － / －小鼠血管有明显损伤。结论利用ApoE － / －纯合子小鼠能够建立良好的血管损伤模型。

实验动物质量检测信息资源的建设与共享

陈梅丽, 刘万策

2016, 33(01): 33-37.

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摘要: 实验动物质量检测信息资源共享是我国实验动物管理工作顺应社会信息化潮流的趋势所在。文章在正确认识实验动物质量检测信息资源内涵、具体分析实验动物质量检测信息资源共享现状的基础上，系统论述了实现实验动物质量检测信息资源的共享协调解决机制。

实验动物机构认可制度助力实验动物质量保障体系的建设与完善

史光华

2016, 33(01): 38-40.

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摘要: 实验动物福利和伦理已经成为实验动物质量保障体系构建过程中需关注的重要内容。本文在介绍部分国外发达国家实验动物管理的核心、管理模式和管理方法的基础上，对构建适合我国国情的实验动物管理模式提出了设想和展望，并介绍了我国目前正在构建的实验动物机构认可制度的研究进展及认可示范情况。

检测和校准实验室能力认可准则在实验动物检测领域应用说明的详解

刘忠华, 陶雨风, 唐丹舟, 朱蕾, 李根平

2016, 33(01): 41-44.

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摘要: 实验动物检测是中国合格评定国家认可委员会( CNAS) 对实验室的认可领域之一。在该领域，实验动物作为检测对象和实验对象，广泛应用于食品、医药、卫生防疫、生物安全、动物检疫、农业、化工、环境保护等学科。为了进一步规范该领域实验室认可活动的一致性、有效性，CNAS 特制定了检测和校准实验室能力认可准则在实验动物检测领域应用说明( CNAS-CL58) 。本文对该应用说明的相关要求进行了重点解读，包括组织、服务和供应品的采购、记录的控制、管理评审的管理要素和人员、设施和环境条件、方法、检测和校准物品( 样品) 的处置、检测和校准结果质量保证的技术要素。

2013 ～ 2015 年实验动物质量检测机构实验室能力验证结果分析

王洪,贺争鸣,魏杰,李晓波,冯育芳,邢进,付瑞,王吉,巩薇,岳秉飞

2016, 33(01): 45-48.

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摘要: 目的通过整理2013 ～ 2015 年实验动物质量检测机构能力验证活动的结果，发现实验室存在的问题，促进实验室检测水平的提升。方法按照ISO/IEC17043 实施能力验证，统计定性实验的结果，对实验室的能力进行评价。结果全国各实验室累计174 次参加了2013 ～ 2015 年的9 个能力验证项目，提交了171 个结果，其中满意结果为151 个，整体满意率为88. 3%。9 个项目的满意率分别为94. 1%、80. 0%、88. 9%、85. 0%、78. 6%、90. 0%、100. 0%、93. 3%和80. 0%。结论通过参加2013 ～ 2015 年的能力验证活动，实验室提升了实验动物质量检测能力，加强了实验动物质量评价体系的建设。

病理学监测在实验动物质量评价中的地位

宋志琦, 李超, 董浩迪, 王春雨, 程广宇, 杨利峰, 周向梅, 赵德明

2016, 33(01): 49-53.

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摘要: 目的从病理学角度评价啮齿类实验动物的健康情况，为实验动物质量评价提供依据。方法采集不同等级啮齿类实验动物的心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、大肠和小肠，经10% 中性福尔马林固定液固定，通过石蜡切片、HE 染色、PAS 染色、冰冻切片、油红O 染色后于显微镜下观察。结果虽然被检测动物的微生物学、寄生虫学和遗传学等指标都能达到或符合国家质量标准，但是病理学监测中都能观察到不同程度的组织病理学损伤，主要出现在肝脏、肺脏和肾脏，有时也发生在心脏、消化道和淋巴器官等。结论该结果说明，虽然啮齿类实验动物符合国家微生物学等标准，但仍有部分实验动物处于亚健康状态。病理学监测在实验动物质量评价中有着不可替代的重要作用。相关监管部门应该尽快制定实验动物病理学诊断的国家及地方标准，完善实验动物质量监测体系。

中国疾病预防控制中心实验动物从业人员岗位培训机制的研究

刘艳, 王珑, 赵赤鸿

2016, 33(01): 54-58.

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摘要: 通过对中国疾病预防控制中心实验动物从业人员现状调查，分析实验动物从业人员培训中存在的问题，建立和完善适合本中心实验动物从业人员岗位培训机制。重视从业人员上岗培训和人才队伍的建设，提高实验动物人才队伍专业素质和专业技术水平，促进实验动物工作的快速发展。

毛囊干细胞及Noggin 对其调控作用的研究进展

马雨楠, 曾林

2016, 33(01): 59-64.

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摘要: 毛囊干细胞( HFSC) 通常能够分化为角质细胞、皮脂腺细胞和短暂扩充祖细胞，因其快速增殖的能力，HFSC为细胞的治疗提供了构建干细胞来源的基础。本综述将系统描述HFSC 的定位、培养以及分子标志物，为鉴定、分离细胞提供有力的参考。同时针对HFSC 增殖和分化调控的关键基因Noggin，从基因发现、分子功能等进行全面阐述，并结合BMP 信号通路叙述Noggin 调控HFSC 研究的最新进展。

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