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2015年 第32卷 第01期    刊出日期：2015-02-28

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研究 论著

猫细小病毒 PCR 检测方法的建立及初步应用

王 吉，付 瑞，卫 礼，李晓波，王淑菁，巩 薇，岳秉飞，贺争鸣

2015, 32(01):  1-6. 

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摘要: 目的 建立猫细小病毒 PCR 检测方法，应用于猫临床样本中 FPV 的快速检测。方法 根据已发表的 FPV VP2 基因序列设计合成引物，并以此建立 FPV 的 PCR 检测方法，并对方法的特异性、敏感性、稳定性等进行验证。 用建立的方法对 33 份猫临床样品进行检测。结果 建立的 FPV PCR 检测方法与猫疱疹病毒Ⅰ型(FHV-1)、猫冠 状病毒(FeCV)、猫合胞体病毒(FeSFV)、猫免疫缺陷病毒(FIV)均无交叉反应;可检测病毒最小滴度为 5lgTCID50 / mL，相应的 DNA 模板浓度为 4. 9 × 102 拷贝/μL;FPV DNA 在 － 30℃冰箱放置 12 个月仍可检测出目的条带。应用 该方法从 33 份猫临床样本中检测出 21 份 FPV 核酸阳性。结论 建立的 FPV PCR 检测方法具有特异、敏感及稳定 的特点，适合于临床 FPV 的感染检测。

大鼠脊髓不同平面双侧半横切损伤模型的建立及评价

陈 斌，武 庚，黄 喆，王一更，韩 旭，罗元烨，郭 亮，赵富生

2015, 32(01):  7-11. 

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摘要: 目的 建立一种新型大鼠脊髓切割损伤模型，为临床脊髓不同平面损伤研究提供适宜的动物模型。方法 45 只 SD 大鼠随机分为脊髓不同平面双侧半横切组(A 组，n = 15)、脊髓全横切组(B 组，n = 15)和假手术组(C 组， n = 15)。术后观察、记录各组大鼠活动、进食水、排尿排便、切口感染等并发症和死亡情况，采用 BBB 运动功能评分 和斜板试验评价大鼠行为学功能。结果 术后 A 组大鼠活动、进食水量减少，53. 33% 大鼠出现尿潴留，40. 00% 大 鼠于术后 1 ～ 4 周死亡;B 组大鼠活动、进食水量明显减少，66. 67% 大鼠出现尿潴留，60. 00% 大鼠于术后 1 ～ 4 周死 亡;C 组大鼠活动、进食水量无明显变化，无并发症及死亡发生。BBB 运动功能评分及斜板维持最大角度值检测显 示，A、B 组均低于 C 组(P ＜ 0. 05)，而这些评价指标在 A 组和 B 组之间无显著差异。结论 脊髓不同平面双侧半 横切损伤模型大鼠尿潴留及死亡率低，行为学评价与脊髓全横切损伤模型类似，适于脊髓不同平面双侧损伤修复的研究。

Apelin-13 侧脑室注射对大鼠脑缺血再灌注损伤的 影响及机制研究

周 全，李熠明，张 璐，汤 球

2015, 32(01):  12-16. 

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摘要: 目的 研究 Apelin-13 侧脑室注射对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及相关机制。方法 侧脑室埋管后， 采用线栓法制备大鼠大脑中动脉栓塞模型，脑缺血 2 h 后侧脑室注射给药。再灌注 24 h 后进行 Zea-Longa 神经功 能评分;TTC 染色法测定大鼠脑梗死面积;试剂盒测定大鼠脑组织内诱导型一氧化氮合酶( inducible nitric oxide synthase，iNOS)和谷胱甘肽过氧化物酶( glutathione peroxidase，GSH-PX) 的活性;Western blot 法测大鼠脑组织 Bcl-2、Bax 和 Caspase-3 三种蛋白的表达水平。结果 Apelin-13(1. 0 μg·kg － 1 )侧脑室给药能改善大脑的神经功能， 减少脑缺血面积，降低 iNOS 活性，增加 GSH-PX 活性，增加 Bcl-2 的表达，减少 Bax 和 Caspase-3 的表达。结论 Apelin-13 对缺血再灌注脑组织保护的可能机制包括降低 NO 水平，加强自由基清除，以及调节凋亡相关蛋白表达。

蒺藜总螺甾皂苷对人卵巢透明细胞癌荷瘤裸鼠肿瘤抑制作用的实验研究

伍锡栋，褚 芳，黎砚书，胡 蓉

2015, 32(01):  17-24. 

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摘要: 目的 研究蒺藜总螺甾皂苷对人卵巢透明细胞癌荷瘤裸鼠肿瘤的抑制作用。方法 采用人卵巢透明细胞癌 接种裸鼠待长出实体瘤后，用第二代实体瘤按每鼠约 1 mm3 瘤组织块移植裸鼠皮下建立人卵巢透明细胞癌裸鼠模 型;用蒺藜总螺甾皂苷(高剂量 0. 42 mg /mL、中剂量 0. 21 mg /mL)分别给实验组裸鼠灌胃 0. 3 mL/10 g，对照组只给 饮用水，每日 1 次，连续 30 d。每周测量体质量和肿瘤大小 2 次，给药 30 d 后处死小鼠，解剖称肿瘤重量，计算抑瘤 率，评价蒺藜总螺甾皂苷(高剂量、中剂量)对裸鼠荷瘤的抑制作用;结果 蒺藜总螺甾皂苷高剂量和蒺藜总螺甾皂 苷中剂量对人卵巢透明细胞癌荷瘤裸鼠有抑制肿瘤作用，抑瘤率分别 87. 61% 和 95. 26% ，其中中剂量抑制肿瘤与 对照组比较有显著性差异(P ＜ 0. 01)，高剂量组有统计学意义(P ＜ 0. 05);结论 蒺藜总螺甾皂苷(高剂量、中剂 量)均能抑制人卵巢透明细胞癌荷瘤裸鼠肿瘤作用。

联苯双酯和齐墩果酸对 ANIT 致小鼠、大鼠 肝损伤的作用研究

肖小华，姚 闽，徐丽瑛，李 艳，黎砚书，丁 琦，余 华

2015, 32(01):  20-24. 

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摘要: 目的 观察联苯双酯和齐墩果酸对异硫氰酸-1-萘酯(α-naphthyl isothiocyanate，ANIT)橄榄油溶液致肝损伤小 鼠、大鼠的保 护 作 用。方 法 先 给 予 小 鼠、大鼠联苯双酯和齐墩果酸，然 后 对 小 鼠、大鼠分别灌胃给以 100 mg·kg － 1 、80 mg·kg － 1 ANIT 造成肝损伤，48 h 后测其空腹血清中的 ALT、AST、TBIL、DBIL、GGT、ALP，并剖取肝、 脾，称湿重，计算其脏器指数。结果 齐墩果酸具有降低小鼠 ALT、AST 和 TB 值，联苯双酯反而增加小鼠 ALT、AST 和 TB 值。联苯双酯具有降低大鼠 ALT、AST 和 ALP 值，齐墩果酸则不降低大鼠 ALT 和 AST 值。结论 齐墩果酸 对 ANIT 致肝损伤小鼠具有保肝作用，联苯双酯对 ANIT 致肝损伤大鼠具有保肝作用。

2013 年昆明地区实验用小鼠及豚鼠寄生虫及病毒感染情况调查

叶尤松，李哲丽，念 昕，李太斌，唐东红

2015, 32(01):  25-29. 

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摘要: 目的 分别调查昆明市三家单位提供的共 90 只实验用 ICR 小鼠和 45 只实验用豚鼠的体内、外寄生虫感染 情况，以及小鼠及豚鼠仙台病毒(SeV)、小鼠肝炎病毒(MHV)、豚鼠淋巴细胞脉络丛脑膜炎(LCMV) 的感染情况， 为实验动物质量管理提供一定的参考依据。方法 根据现行国家标准所描述的方法及病毒检测试剂盒说明书的 说明，对昆明市三家单位随机提供的共 90 只 ICR 小鼠和 45 只豚鼠样本，分别进行体内、外寄生虫、小鼠 MHV 及小 鼠 SeV、豚鼠 LCMV 及豚鼠 SeV 的检测。结果 昆明地区实验用小鼠及实验用豚鼠均检出体内、外寄生虫;3 只小 鼠检测出体外寄生虫，检出率为 3. 3% ;20 只小鼠检测出体内寄生虫卵，检出率为 22. 2% ; 4 只豚鼠检测出体外寄 生虫，检出率为 8. 9% ;9 只豚鼠检测出体内寄生虫卵，检出率为 20. 0% ;小鼠 MHV 及 SeV 血清学检测无阳性; 豚 鼠 LCMV、SeV 血清学检测无阳性。结论 实验动物质量监测是实验动物质量控制的有效手段，对医学及生命科学 的研究至关重要，昆明地区实验动物的寄生虫质量控制有待加强。

不同强度耐力运动对大鼠心肌的氧化损伤效应

杨 毅，杨 阳

2015, 32(01):  30-33. 

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摘要: 目的 观察不同强度耐力训练对雄性大鼠的心肌氧化损伤及凋亡的影响，探讨增强心肌抗氧化能力的适宜 训练方式。方法 选用 6 周龄健康雄性大鼠 48 只，建立大鼠耐力跑台模型。将选取的大鼠随机分为 4 组:安静对 照组(C 组，12 只);低强度组(L 组，12 只);中等强度组(M 组，12 只);高强度组(H 组，12 只)。4 组大鼠进行为期 6 周的跑台实验后，用生化方法分别检测各组大鼠的氧化应激相关指标，内容包括:心肌组织的超氧化物歧化酶 (SOD)活力、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力以及丙二醛(MDA)的含量。结果 4 组大鼠经不同强度耐力运 动训练 6 周后，结果发现，与安静对照组相比，心肌组织的 SOD 活力在中强度组显著上升，而在高强度组显著下降 (P ＜ 0． 01);GSH-Px 活力在低强度组和中等强度组显著上升，而在高强度组显著下降(P ＜ 0． 05 或 P ＜ 0． 01);与安 静对照组相比，高强度组的心肌组织 MDA 水平显著增高(P ＜ 0． 01)。结论 低中强度的耐力训练能有效提高心肌 的抗氧化能力，尤其是中等强度的耐力训练。

屏障设施中安装使用脉动真空灭菌器常见问题及解决办法

李红兵，孙博凡，王 雷，汪 辉，陈健茂，杨 文，冉林武

2015, 32(01):  34-36. 

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摘要: 介绍新华脉动真空灭菌器的工作原理，并对其安装、日常灭菌工作中经常出现故障的排除及维护进行了总 结，为从事实验动物工作的有关人员提供参考。

动物实验活动中病原微生物危害风险评估体系的建立

刘 艳，王 珑

2015, 32(01):  37-40. 

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摘要: 动物实验活动中存在着诸多潜在的危险因素，且涉及多种病原微生物。因此，从生物安全角度出发，对动物 实验活动要进行危害风险评估。本文就病原微生物危害风险评估要素、风险评估过程以及评估体系分析等相关问 题进行探讨。建立了以风险评估为基础的安全监测与预警系统，确保动物实验人员和环境的安全。

基因工程小鼠的饲养管理

马元元，孔申申，陶迎红，杨国生

2015, 32(01):  41-44. 

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旨在对实验动物使用设施如何引进和基因工程小鼠饲育管理进行交流。

浅谈多质量体系条件下质量文件的整合与制订

黄小红，黄红坤，许惠英，饶子亮，唐小江

2015, 32(01):  45-47. 

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摘要: 质量文件是实验室建设的重要软件内容之一。质量文件的高度整合与规范制订是实验室多个质量体系得以 同时顺利运行的关键。本文介绍了 CNAS、CMA、CMAF、GLP 质量体系及其对质量文件的要求，以及笔者所在实验 室结合实际对质量文件进行整合与制订，实现多个质量体系同时顺利运行的具体做法和经验。

轮状病毒感染实验动物模型的研究进展

罗 军，孙晓梅，宋志忠，代解杰

2015, 32(01):  48-50. 

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摘要: 目的 了解轮状病毒实验动物模型的研究进展，为进一步完善轮状病毒实验动物模型提供依据。方法 查 阅近几年国内外有关轮状病毒感染动物模型研究文献，对不同类型的动物模型进行综述。结果 经对该类实验动 物模型研究进展进行总结分析，以期能为科学合理地选择轮状病毒动物模型进行科学研究提供一定的参考。结论 实验动物疾病动物模型对开展轮状病毒感染疫病的发生、发展机制与药物研发具有不可或缺且极其重要的作用。

牛棒状杆菌感染及其防治措施

白 玉，尹良宏，卢胜明

2015, 32(01):  51-54. 

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摘要: 本文简述了牛棒状杆菌感染的主要病因、发病机制、临床症状、传播方式及诊断，同时结合国内外关于牛棒状 杆菌感染的最新研究情况，对可行的预防措施、日常观察及病情判断，以及感染后的处理措施进行了探讨，以期为 牛棒状杆菌的防治提供参考。

AP 动物模型制作方法的研究新进展

高菡静，唐 杰

2015, 32(01):  55-58. 

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摘要: 急性胰腺炎(AP)发病机制复杂，临床过程凶险且缺乏特效药物治疗，动物模型在该病的基础研究中有着重 要的替代作用。已有多种经典的 AP 造模方法。近年来根据不同致病因素制作 AP 模型成为研究热点，本文将对 AP 动物模型制作相关研究进展作一综述。

通过调节免疫系统功能治疗癌症

董浩迪，杨利峰，赵德明，周向梅

2015, 32(01):  59-60. 

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摘要: 目前，对癌症的治疗除采取手术和化疗方法外，还没有发现可靠的治疗方法。科学研究表明，CTLA－4 和 PD－1是体内的两种蛋白，他们能抑制免疫系统发挥免疫攻击能力，从而导致肿瘤的形成。通过针对这两种蛋白制 备的单克隆抗体，可以破坏他们的抑制作用从而激活免疫系统，发挥抗肿瘤生长作用。此外，通过对 T 细胞进行基 因修饰可以使其将肿瘤细胞作为靶细胞。这种免疫疗法可被用于癌症的治疗并且已经取得了初步的成功。本文对以上两种方法的基本情况作了简要论述。为该领域的研究实践提供一定的参考。