当期目录

2012年 第29卷 第06期    刊出日期：2012-12-30

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研究 论著

2012 年春北京抽检的啮齿类实验动物健康状况的病理学调查和分析

刘进, 姚皓, 王敏, 林竹, 王继宏, 彭云, 宋志琦, 康静静, 潘博, 王运盛, 杨利峰, 尹晓敏, 周向梅, 赵德明

2012, 29(06):  1-3. 

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病理学观察，通过石蜡切片HE 染色、冰冻切片油红O 染色、PAS 染色等方法对啮齿类实验动物的健康状况进行鉴 定。结果显示，绝大多数啮齿类实验动物为健康状态，部分非健康动物主要有肝脏脂肪变性、轻度肺脏病变、心脏 颗粒变性和肾脏蛋白管型。这可能与饲养环境、饲料状况以及采样运输的应激有关，通过加强饲养管理可以使这 种情况改善。

猕猴肉瘤病毒SV40 T-ag-C 基因克隆及序列分析

叶尤松, 罕圆圆, 李跟党, 匡德宣, 唐东红

2012, 29(06):  5-9. 

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摘要: 目的对来源于一株自然感染猕猴肉瘤病毒SV40 的猴肾细胞培养物进行大T 抗原C-羧基端( T-ag-C) 基因 克隆及核苷酸序列分析。方法采用PCR 法分别从一株自然感染SV40 病毒的猴肾细胞培养物和SV40776 标准 株接种的vero 细胞培养物提取的总DNA 中扩增出441bp 的SV40 大T 抗原C-羧基端( T-ag-C) 基因片段，分别将其 克隆到PMD18-T 载体中，转化至JM109 感受态大肠杆菌细胞后，挑取阳性克隆进行测序鉴定，并对获得的目的基 因核苷酸序列进行序列分析及同源性分析。结果来源于猴肾细胞培养物的SV40 大T 抗原片段与本实验室来源 于云南野生猴群的猕猴外周血所得到的SV40 大T 抗原片段同源性为97. 31% ，与GenBank 中登录号为NC _ 001669. 1 序列进行比对，同源性为96. 33% ; 与SV40-776 标准株接种的vero 细胞培养物所扩增的大T 抗原片段同 源性为97. 55% 。结论对大T 抗原基因克隆和序列分析是了解和掌握SV40 病毒分子流行病学及其变异趋势的 重要手段。

脑组织特异性表达胰岛素样生长因子-1 转基因小鼠制备*

吴连连, 袁红花, 朱孝荣

2012, 29(06):  10-12. 

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摘要: 目的制备脑组织特异性表达胰岛素样生长因子-1( Insulin-Like Growth Factors 1，IGF-1) 转基因小鼠。方法 采用精子为载体法进行基因转导，出生后小鼠PCR 检测，建立转基因小鼠系，用Western blot 和免疫荧光法分别 检测转基因小鼠海马齿状回亚粒状区( subgranular zone ，SGZ) IGF-1 表达量和报告基因EGFP 阳性细胞数。结果 获得3 只阳性小鼠，2只外源基因能稳定遗传，并建立了转基因小鼠系，转基因鼠SGZ 区域IGF-1 表达量显著高 于正常鼠，EGFP 也在此区域表达。结论成功制备IGF-1 转基因小鼠。

三种癌裸鼠移植瘤肝脾转移的比较研究

褚芳, 余华, 方铝, 周艳艳, 郑国安, 范其坤, 丁琦

2012, 29(06):  17-21. 

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摘要: 目的利用人卵巢癌、胃癌、结肠癌裸鼠移植瘤动物模型观察比较肝脾转移情况。方法分别将人卵巢癌、 胃癌、结肠癌实体瘤移植到裸鼠皮下，在建立人卵巢癌、胃癌、结肠癌裸鼠实体瘤模型的基础上，观察裸鼠实体瘤生 长速度、存活时间及肝脾转移病理形态学变化。结果人卵巢癌、胃癌、结肠癌实体瘤移植到裸鼠皮下，移植成瘤 率、肝转移率皆为100% ; 卵巢癌脾转移100% ; 胃癌脾转移62. 5% ; 结肠癌脾转移75% 。人卵巢癌裸鼠实体瘤生 长速度高于胃癌、结肠癌裸鼠实体瘤，且肝脾转移快，存活时间短; 三种癌裸鼠移植瘤肝脾转移病理形态均有差异。 结论建立的人卵巢癌、胃癌、结肠癌裸鼠移植瘤肝脾转移完整地再现了人卵巢癌、胃癌、结肠癌患者肝脾转移的 临床过程，为探讨人卵巢癌、胃癌、结肠癌肝脾转移生物学机制和抗转移提供参考，三种癌裸鼠移植瘤肝脾转移癌 均有差异。

长爪沙鼠高脂血症造模方法的比较*

韦永芳, 钟欢妹, 刘寒英, 梁成结

2012, 29(06):  22-25. 

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摘要: 目的比较长爪沙鼠高脂血症模型的4 种造模方法。方法选取用于复制大鼠高脂血症动物模型的4 种配 方饲料，饲喂长爪沙鼠60 d，分别在0 d、30 d、60 d 空腹12 h 后眼眶取血，测定血清中甘油三酯( TG) 、总胆固醇 ( TC) 、高密度脂蛋白胆固醇( HDL-C) 和低密度脂蛋白胆固醇( LDL-C) 的含量，观察肝组织的形态学变化。结果 4 种高脂配方饲料在30 d、60 d 均使长爪沙鼠血清的TC、HDL-C、LDL-C 的值明显高于对照组，以TC 升高最为明 显，并且LDL-C 的增加幅度明显大于HDL-C 的增加，并出现不同程度的脂肪肝。结论4 种高脂配方饲料均可复 制长爪沙鼠高脂血症模型。

屏障系统大耳白、新西兰兔血液学指标测定分

杨锋, 艾应先, 谢晓娟, 余晓君, 王红星

2012, 29(06):  26-29. 

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摘要: 目的了解在屏障环境繁育的不同品系实验兔的生理指标特性。方法采用SPF 级大耳白和新西兰兔各10 只，通过心脏采血获得检测样本。用血细胞分析仪、血液生化仪及凝血仪检测其生理指标。结果大耳白实验兔 部分指标有差异( P ＜ 0. 05) ，而新西兰实验兔部分指标也存在差异( P ＜ 0. 05) 。结论不同品系的SPF 兔生理指标 有着明显的差异，这对选择生理指标稳定的实验动物、保证动物实验顺利进行有着非常重要的意义。

利凡诺方法分离纯化犬血浆蛋白络合及解离条件探讨

隋丽华, 陈旖, 李瑞生, 刘宏伟, 赵彦斌, 张小飞, 黄永莉, 刘红燕, 刘永梅, 叶华虎

2012, 29(06):  30-33. 

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摘要: 目的普通犬血浆和高免血清分别是白蛋白和特异性免疫球蛋白分离纯化的原材料，针对不同的血浆确立 相应的络合条件和解离条件，以分离纯化白蛋白和丙种球蛋白。方法血浆按1 ∶ 1 体积加入利凡诺溶液，用2% Na2 CO3调pH 值，使犬血浆与利凡诺进行充分络合; 上清液两次络合后解离，获得丙种球蛋白; 沉淀解离获得白蛋 白。分别对上清液、两次解离液进行蛋白浓度、纯度的测定。结果确定pH 8. 5，室温络合2 h，利凡诺浓度在 2. 3% 时为白蛋白的最佳络合条件; pH 6. 0，室温络合2 h，利凡诺浓度2. 3% 为丙种球蛋白最佳络合条件。0. 6% 氯化钠，0. 25% 辛酸钠，pH 1. 37 为白蛋白解离最佳条件; 0. 85% 氯化钠，1. 3% 甘氨酸，pH 6. 8 为丙种球蛋白的最佳 解离条件。结论利用利凡诺方法，可以成功分离和纯化犬白蛋白和丙种球蛋白。

我国实验动物垫料质量控制的研究

白玉, 尹良宏, 车路平, 卢胜明

2012, 29(06):  34-38. 

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摘要: 目的对北京地区大量使用的不同材质、不同产地的实验动物垫料进行研究，了解不同材质垫料有害物质水 平，为实验动物垫料地方标准的制定提供参考。方法按照现行方法，对垫料原材料进行物理特性、化学污染物及 微生物污染物水平检测。结果若依据《GB 14924. 2-2001 实验动物配合饲料卫生标准》的规定，各产地的玉米芯 垫料及刨花垫料都符合对重金属、有机磷、有机氯农药及其它有机农药污染的要求，而微生物污染，都有不同程度 的超标。结论本实验结果可作为制定实验动物垫料地方标准的参考。

简报

电子芯片在树鼩管理中的应用

江勤芳, 匡德宣, 孙晓梅, 仝品芬, 代解杰

2012, 29(06):  39-41. 

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摘要: 目的树鼩具有灵活、多动的行为特性，建立一种适合树鼩个体标记简单易行的方法，对于树鼩种群的科学 化管理十分必要。方法随机挑选自繁F1 代的幼龄树鼩和成年树鼩各40 只，采用2. 12 mm × 12 mm，质量为 0. 09 g的电子芯片，通过注射植入树鼩颈背部皮下; 观察芯片植入部位情况并定期复查。结果在注射芯片10 个 月之后，对动物复检结果显示，对大笼内群养树鼩标记有效率为90% ; 单笼饲养树鼩的有效率达到95% 。结论对 树鼩个体采用电子芯片标记技术是一种简单、有效和持久的方法。

定喘颗粒止咳平喘作用研究

2012, 29(06):  42-44. 

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摘要: 目的研究定喘颗粒的止咳平喘作用，为其临床应用提供药理学依据。方法采用豚鼠离体气管条法、乙酰 胆碱和磷酸组胺混合液致豚鼠哮喘、二氧化硫引咳小鼠和拘橼酸引咳豚鼠等模型，观察定喘颗粒的止咳平喘作用。 结果定喘颗粒能明显抑制磷酸组胺、乙酰胆碱所致豚鼠离体气管条收缩，显著延长豚鼠哮喘潜伏期以及减少小 鼠和豚鼠的咳嗽次数。结论定喘颗粒具有明显的止咳平喘作用。

一种复合型戊巴比妥钠麻醉药对大鼠的麻醉效果

杨悦, 杨丹, 安巍巍, 张彦龙, 姬宏飞

2012, 29(06):  45-47. 

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摘要: 目的通过对现有戊巴比妥钠的配制方法进行改进，获得复合型戊巴比妥钠，比较并分析其与普通戊巴比妥 钠、水合氯醛对大鼠的麻醉效果。方法选用120 只Wistar 大鼠，随机分为3 组，应用普通戊巴比妥钠、复合型戊巴 比妥钠及水合氯醛3 种麻醉剂分别对相应大鼠进行腹腔注射麻醉，观察大鼠状态，记录麻醉起效时间及麻醉时间， 并进行分析。结果3 种麻醉剂对大鼠的麻醉起效时间及麻醉时间均无显著性差异，但复合型戊巴比妥钠组内的 大鼠之间的起效时间及麻醉时间差异小于其他两组的大鼠，具有统计学意义，并且复合型戊巴比妥钠组中的大鼠 首次麻醉成功的例数高于其他两组。结论研究表明复合型戊巴比妥钠对大鼠的麻醉作用稳定，麻醉效果优于普 通戊巴比妥钠和水合氯醛。

兽医在实验动物工作中的主要作用

杜小燕, 王超, 陈振文

2012, 29(06):  48-51. 

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摘要: 全面概述了兽医在实验动物工作中的作用，重点阐述了兽医在实验动物设施建设、运行与管理中的作用，包 括兽医在实验动物设施设计、设施运行管理及国内、国际的实验动物认证中发挥的重要作用。同时阐明了兽医工 作在实验动物健康保障和护理、运输管理、动物实验的设计与实施、实验动物福利监督与管理、生物安全的评价与 管理中的作用以及兽医对实验动物各种药品和废弃物管理中的作用。

综述 进展

免疫系统人源化小鼠模型的现状及应用

孙丽娜, 孙晨鸣, 赵勇

2012, 29(06):  52-55. 

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摘要: 实验动物模型在医学生命科学发展中发挥着重要作用。某些病原微生物仅仅特异对人类具有易感性及致病 性。由于缺乏理想的实验动物模型限制了人们对疾病发病机理的理解及预防治疗。因动物种属差异，许多对小鼠 有效的药物及疫苗不能有效地用于人类疾病的治疗或预防。通过将人的胚胎胸腺、造血干细胞等移植到免疫缺陷 小鼠可有效地建立人类天然与适应性免疫系统，即免疫系统人源化小鼠。该小鼠的成功建立为免疫系统相关疾病 研究及免疫药物研发提供了良好实验模型。本文主要对免疫系统人源化小鼠模型的建立、发展及其在感染等研究 中的应用进行简要综述。

五种常用的实验兔椎间盘退变模型评价

邢会杰, 傅江南, 宋琳亮, 方梅霞

2012, 29(06):  56-59. 

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摘要: 椎间盘退行性变疾病是一类具有高发病率及高致残率的疾病，是临床上引起腰背痛致使工作能力丧失的最 主要病因。建立经济、可靠、重复性好的椎间盘退变动物模型，是实验研究椎间盘退变病理生理学变化的首要前 提。因此，综合分析和评价近年来常用的实验兔椎间盘退变模型构建方法，对制备椎间盘退行性变模型在实践上 具有参考意义。

皮肤致敏反应体外替代方法的研究现状

洪丽玲, 周庆云

2012, 29(06):  60-63. 

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摘要: 皮肤是人体最大的器官，也是外源化学物入侵机体的第一道天然屏障。化学物作用于皮肤常常导致接触性 过敏性皮炎。传统上常常采用豚鼠致敏试验来评价化学物的致敏性。然而，动物试验周期长，结果主观性强，变异 程度大，加之如今动物保护主义对动物福利的呼声高涨，替代试验成为必然的发展趋势。本文拟就近年来在皮肤 变态反应研究中的替代试验方法进行综述。