当期目录

2013年 第30卷 第01期    刊出日期：2013-02-28

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研究 论著

仙台病毒抗原的制备及初步应用

刘先菊, 佟巍, 向志光, 张丽芳, 李雨函, 王艳蓉, 魏强

2013, 30(01):  1-4. 

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摘要: 目的纯化和制备仙台病毒( Sendai Virus，SeV) 抗原，初步应用于间接酶联免疫吸附试验( ELISA) 及免疫印 迹( Western-blot) 试验对SeV 抗体进行检测。方法通过鸡胚尿囊腔及BHK-21 细胞增殖法培养增殖SeV，低温冻 融去除细胞碎片后，用差速离心及超声破碎法纯化并制备SeV 抗原，以SDS-PAGE 电泳进行纯度鉴定; 优化确定间 接SeV-ELISA 抗原的最佳包被浓度，对比检测间接免疫荧光试验( IFA) 初筛小鼠SeV 阳性血清，同时用Westernblot 检测法进行特异性验证。结果用BHK-21 细胞培养增殖的SeV，病毒滴度HA 为1∶ 128，SeV 抗原的电泳纯度 达80% ; 确定SeV-ELISA 抗原最佳包被浓度为2. 5 μg /mL 时，测得小鼠SeV 抗体ELISA 与IFA 的阳性符合率为 100% ，并由Western-blot 检测法得到了证实。结论通过BHK-21 细胞增殖和差速离心及超声破碎法制备的SeV 抗原，可用于ELISA 及Western-blot 法对小鼠SeV 抗体的检测，进而验证了SeV 具有较强的抗原特异性及蛋白 活性。

慢病毒载体转染犬睾丸生殖细胞

王洪军, 马啸, 赵明, 杜小燕, 李益琛, 陈振文

2013, 30(01):  6-10. 

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摘要: 目的观察慢病毒载体( Lentiviral vector，LV) 对犬生殖细胞的转染，为基于LV 的精子介导法制备转基因动 物提供依据。方法采用睾丸打点注射法，向比格犬两侧睾丸分别注入滴度为5 × 108、1 × 108、2 × 107 TU /mL 的 慢病毒液组成3 个剂量组，每点注射量为每只犬0. 2 mL。于注射后第2 周开始采集精液，通过精液DNA 的PCR 检 测和精子荧光镜检评估绿色荧光蛋白( green fluorescent protein，GFP) 基因的整合及表达。结果1) 在高剂量组，整 合并表达GFP 基因的精子于第4 周首现并持续至第17 周; 在中、低剂量组于第5 周首现，分别持续到第14 周、12 周。2) GFP 表达的高峰期在注射后第7 周～ 10 周。3) GFP 表达于整个精子，以顶体后区和精子尾颈部表达最强。 4) 注射后第2 周～ 6 周，中剂量组犬采精困难，高低剂量组犬精子畸形率有上升的趋势。5) 在GFP 表达的高峰期， 绿色荧光精子的百分率在高、中、低剂量组分别为43. 33% 、35. 53% 和4. 55% ，具有明显的差异。结论基于LV 的 精子介导转基因法( Sperm-mediated gene transfer，SMGT) 可成功获得转基因犬精子，转基因阳性率、表达的强度与 持续时间与慢病毒滴度相关。

无毛突变基因对无毛小鼠免疫器官结构及功能的影响

史崇敏, 杜春燕, 王君敏, 朱奎成

2013, 30(01):  11-14. 

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摘要: 目的探讨无毛突变基因的作用，对无毛小鼠、有毛小鼠的免疫器官结构及功能进行了对比研究。方法比 较无毛小鼠和有毛小鼠主要免疫器官组织学变化，以及血清白介素－ 2 受体、淋巴细胞亚群、淋巴细胞增殖等方面 的差别。结果发现无毛小鼠和有毛小鼠免疫器官结构及功能均有一定的差异。结论研究结果提示无毛突变 基因不仅影响被毛结构，对免疫器官及功能也有一定的影响。该基因在杂合状态时也有一定的作用，表明该突变 基因具有一定的共显性。

2012 年秋季北京地区啮齿类实验动物健康状况的病理学调查和分析

王继宏, 姚皓, 宋志琦, 袁振, 刘春法, 薛志新, 付永瑶, 吕悦, 朱婷, 周洋, 杨利峰, 尹晓敏, 赵德明, 周向梅

2013, 30(01):  15-18. 

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摘要: 随着现代科技的发展，实验动物在多方面起着越来越重要的作用。2012 年10 月，本实验室参与了北京市实 验动物管理办公室组织的北京市啮齿类实验动物健康状况调查。采集心、肝、脾、肺、肾、大肠和小肠进行组织病理 学观察，通过石蜡切片HE 染色、冰冻切片油红O 染色、PAS 染色等方法对啮齿类实验动物的健康状况进行鉴定。 结果显示，部分动物肝脏表现出不同程度的肝细胞肿胀、轻度肺脏病变，少数表现出肾脏管型、肾小囊腔蛋白样物 质渗出和大肠寄生虫感染，但是啮齿类实验动物总体水平属健康状况。以上病变的出现可能与动物的生存环境、 饲料营养成分和运输处死过程中的应激有关。

非诺贝特对非酒精性脂肪肝大鼠肝损伤作用的实验研究

徐丽瑛, 肖小鹏, 郑国安, 丁琦, 李良, 肖小华

2013, 30(01):  19-21. 

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摘要: 目的观察非诺贝特对大鼠非酒精性脂肪肝模型的影响。方法采用灌胃高糖高脂乳剂建立大鼠非酒精性 脂肪肝模型，观察非诺贝特对模型大鼠血脂、肝脂等指标的影响。结果非诺贝特0. 05 g / kg 剂量组能显著增加大 鼠肝系数，降低脂肪肝模型大鼠血清和肝组织甘油三酯( triglyceride，TG) ，增加血清总胆固醇( total cholesterol， TCH) 、低密度脂蛋白( low-density lipoprotein，LDL) ，降低血清高密度脂蛋白( high density lipoprotein，HDL) ( P ＜ 0. 05 和P ＜ 0. 01) ，加重肝细胞的损伤。结论非诺贝特具有降脂作用( TG) ，同时却加重脂肪肝模型大鼠肝脏损伤。

多房棘球蚴不同方法接种灰仓鼠感染效果观察*

廖力夫, 刘斌, 徐艺玫, 燕顺生, 史深

2013, 30(01):  22-25. 

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摘要: 目的观察将多房棘球蚴( Echinococcus muhilocularis 简称Em) 接种灰仓鼠腹腔、前肢腋下、心脏和肝脏组织 的感染效果，为探索建立多组织或器官包虫病动物模型提供依据。方法按1000 个头节/只剂量经腹腔和前肢腋 下接种灰仓鼠，经腹膜穿刺肝脏和经胸腔穿刺心脏接种灰仓鼠，按计划解剖检查包囊发育状况和包囊寄生部位，计 算包囊系数( 包囊质量/ 体质量× 100% ) 和感染率。结果100 d 处理腹腔接种29 只，腹腔100% 感染，包囊系数 7. 1%，300 d 处理7 只，除腹腔都有包囊寄生外，包囊浸润肝脏3 只，浸润脾脏和肾脏各2 只，总包囊系数51. 7% 。 前肢腋下接种的分别于116 d 和290 d 处理19 只和5 只，腋下均有包囊寄生，包囊系数分别为3. 27% 和22. 95% 。 100d 处理肝脏接种的17 只，共10 只有包囊，包囊系数7. 1% ，包囊寄生部位为腹腔8 只，肝脏5 只，心脏1 只，肺部 3 只。115 d 处理心脏接种26 只，包囊寄生部位为心脏6 只，肺部9 只，胸腔1 只，其中有两只同时心脏和肺脏寄生 包囊，共13 只寄生包囊，包囊系数2. 91% 。结论腹腔环境适宜Em 生长发育，适合做周期短的动物模型，接种 300 d 包囊有向实体器官浸润的现象。Em 在前肢腋下发育缓慢，适合做Em 保种。由于动物模型中的心脏和肝脏 接种感染率低，接种技术和方法需改进，以便提高感染率． 关键词: 多房棘球蚴( Em) ; 灰仓鼠; 动物模型; 包囊系数; 器官

核桃楸皮粗多糖的急性毒性实验研究

王光1, 吴宜艳, 雷涛

2013, 30(01):  26-27. 

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40 mL / kg每天3 次灌胃，20 mL / kg 每天2 次腹腔注射，给药1 d 后，连续观察7 d。结果实验期间，小鼠的活动与 饮食情况未见异常，未出现死亡。尸检各脏器无异常。小鼠的核桃楸皮粗多糖每天最大给药量: 腹腔注射 2. 16 mg /10 g，灌胃6. 48 mg /10 g。结论通过两种给药方法证明，核桃楸皮粗多糖对小鼠的毒性作用较低。

应用伊维菌素驱杀实验动物体内外寄生虫

曲平, 景海江, 仇志华

2013, 30(01):  28-30. 

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摘要: 目的寻找一种安全有效的驱杀实验动物体内外寄生虫的药物。方法将携带鼠癣螨雄性小鼠随机分为3 组，雌鼠也随机分为3 组; 将携带鼠隐匿管状线虫卵雄性小鼠随机分为3 组，雌鼠也随机分为3 组。通过3 周饮用 浓度分别为0. 1% 、0. 5% 和1. 0% 的伊维菌素来观察驱杀效果。结果3 个浓度的伊维菌素对实验动物鼠癣螨和 鼠隐匿管状线虫均有较好的驱杀效果。结论伊维菌素可作为一种安全有效驱杀实验动物体内外寄生虫的药物 使用。

心血管疾病研究者对动物实验伦理认知度调查与分析

崔永春, 田忠, 唐跃, 孙嘉康, 吴爱丽, 刘晓鹏, 罗富良

2013, 30(01):  31-34. 

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摘要: 目的了解不同层次心血管疾病研究者对于现有实验动物福利保护和动物伦理知识的认知，为动物实验伦 理培训提供新策略，为进一步完善实验动物福利保护措施和伦理规制提供依据。方法选择从2009 年1 月1 日至 2012 年6 月30 日在中国医学科学院阜外心血管病医院动物实验中心开展动物实验的197 名研究者开展问卷调 查，根据《北京市实验动物福利伦理审查指南》自行设计调查问卷，并对结果进行分析。结果对动物福利与伦理 知识的认知得分，54. 3% 良好，35. 5% 合格，10. 2% 不合格，不合格者均为年龄20 ～ 30 岁之间无动物实验科研经历 的研究生。结论研究者对动物福利与伦理认知度参差不齐，有必要加强实验动物伦理培训，尤其是对有动物实 验需求的新入学的研究生。

膨化饲料中粗脂肪含量测定方法的研究

王满红, 张海峰, 刘建国, 黄卫东

2013, 30(01):  35-37. 

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摘要: 目的探讨膨化饲料中粗脂肪含量最适的测定方法。方法采用酸水解法和索氏抽提法分别测定膨化猴 料、膨化犬料、颗粒鼠料和颗粒兔料的加工前粉料及其成品料中粗脂肪的含量。结果酸水解法测定的膨化猴料 粗脂肪含量极显著高于索氏抽提法的测定结果( P ＜ 0. 001) ，膨化犬料粗脂肪含量的测定值酸水解法显著高于索氏 抽提法( P ＜ 0. 05) 。而对于膨化前的犬混合粉料和猴混合粉料，两种方法的脂肪含量测定结果均差异不显著( P ＞ 0. 05) 。索氏抽提法和酸水解法测定颗粒料加工前粉料及加工后成品料中粗脂肪含量值均差异不显著( P ＞ 0. 05) 。 酸水解法测定的饲料加工前后粗脂肪损失率均低于索氏抽提法的测定值。结论酸水解法能更准确的测定膨化

实验动物资源数据库数据质量建设的探讨*

王晓明, 刘万策, 陈梅丽, 李会萍, 黄韧

2013, 30(01):  38-41. 

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摘要: 数据质量是数据资源共享的生命，是实现数据资源价值的必要保证。在实验动物资源数据库的建设中，数据 质量的保证，着重在数据测定和采集规范的制定及数据入库流程的规范化建设上。本文探讨实验动物资源数据库 数据质量的建设，介绍数据采集的制度建设和数据入库的审核流程设计，也提出了一些在数据库的后期运行中对 提升数据质量有帮助的思考，给正在从事或将要开展数据信息化建设的人员提供一些借鉴。

研究简报

四川省实验动物产业发展现状及对策思考

邹弈星, 蒋佳, 王敬东

2013, 30(01):  42-45. 

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摘要: 实验动物科学是生命科学的基础学科，又是生物医学、药学、生命科学等学科和领域发展的重要支撑条件。 本文在系统分析四川省实验动物行业结构、生产使用情况和产业发展存在问题的基础上，提出了相应的对策建议， 为促进全省实验动物产业健康持续发展提供参考。

医院实验动物管理与使用委员会的筹建与运作

许虎峰, 刘云波, 李学勇, 张仲民, 谢苗荣, 尤红, 葛如军, 张冰

2013, 30(01):  46-49. 

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摘要: 实验动物福利与伦理在国内日益受到重视，结合医院实验动物工作的特色，借鉴管理学五个“M”的理念，探 讨了医院实验动物管理与使用委员会( IACUC) 的筹建和运作。

实验动物从业人员的职业安全及个人防护

周淑佩, 田枫, 贾光

2013, 30(01):  50-54. 

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摘要: 目的保障实验动物从业人员职业安全，加强个人防护。方法及结果参考本单位工作经验，对实验动物从 业人员劳动过程进行分析，预测可能存在的有害因素及对健康的危害，结合我国相应的管理制度和标准化操作规 程，提出有效的防护措施。防止了劳动过程中的事故，减少职业危害。结论对实验动物从业人员的职业安全及 个人防护措施应给予重视。

研究进展

树鼩应用于丙型肝炎病毒相关领域的研究进展*

匡德宣, 江勤芳, 孙晓梅, 仝品芬, 高家红, 陆彩霞, 代解杰

2013, 30(01):  55-60. 

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摘要: 丙型肝炎病毒慢性感染已成为世界范围的公共健康问题，由于缺少合适的丙型肝炎病毒研究模型，所以对丙 肝病毒感染机制、生活周期和致病机制的研究进展较为缓慢。树鼩属于低等的灵长类动物，许多生物学特性近似 于人类。近年来引起医学生物界和相关管理部门的重视和关注，国内外的学者在树鼩是否可作为丙型肝炎病毒感 染的动物模型方面作过十分有益的尝试。本文介绍了国内外树鼩应用于丙型肝炎病毒模型研究的进展情况及应 用前景。

实验动物脑血栓模型建模方法及评价

尧雪洲, 解宇环, 许轫, 郭欣, 冯玮

2013, 30(01):  61-63. 

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摘要: 建立实验动物脑血栓模型，对探讨缺血性脑损伤的发生机制及对防治脑血栓、脑缺血的相关研究有理论和实 践价值。本文对脑血栓动物模型的建模原理及方法进行综述，并对各类模型的优缺点和适用范围等方面进行了初 步的分析。力求为选择和建立适于各类脑血栓疾病相关研究的实验动物模型提供参考。