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2012年 第29卷 第05期    刊出日期：2012-10-30

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研究 论著

一种简便、高效的实时荧光PCR 相对定量方法的建立

陈军, 王银, 李慧玲, 董建一, 王福金, 王爱国, 王靖宇

2012, 29(05):  1-5. 

摘要 ( )  

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摘要: 目的建立一种简便、高效的实时荧光PCR 相对定量方法。方法采用严格一致的引物参数，对Fabp5、 Ppar-α 及β-Actin 三个基因分别设计特异性扩增引物，制备相应的质粒标准品，10 倍梯度稀释后制作标准曲线。并以这三个标准曲线分别单独定量正常小鼠肝组织、H-ras12V 转基因小鼠肝肿瘤周围组织和肿瘤组织中的Fabp5、Ppar-α 和β-Actin 的表达水平，以β-Actin 为内参，分别采用双标准曲线法、2 － △△Ct 法和单标准曲线法对Fabp5 和Ppar-α 的表达进行相对定量分析。结果单标准曲线法与双标准曲线法测定的Fabp5 和Ppar-α 差异性表达的相对定量值没有显著差异，而用2 － △△Ct法获得的相对定量值与双标准曲线法相比，波动较大。结论在引物参数严 格一致的基础上，单标准曲线法是一种可行、简便、高效的实时荧光PCR 相对定量方法。