当期目录

2011年 第28卷 第02期    刊出日期：2011-04-28

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研究 论著

基于Cre／Loxp系统Tyr03、Axi受体酪氨酸激酶转基因小鼠的建立

张淑静, 江其辉, 卢清君, 王宁利, 陈振文, 卢清显

2011, 28(02):  1-05. 

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目的采用大肠杆菌B-半乳糖酶基因LaeZ作为报告基因。建立Tyr03、Axl受体酪氨酸激酶含有loxp位点的 转基因小鼠。与不同组织特异性Cre小鼠杂交，获得时空性表达Tyr03、Axl的转基因小鼠，为研究其在各个组织中 的功能奠定基础。方法构建含有Ioxp位点的Tyr03、Axl受体酪氨酸激酶质粒，测序正确后，通过显微注射法将插 入CAG启动子下游的Geo·STOP—msAxl及Geo—STOP—msTyr03基因的转基因载体注射人BDFI供体鼠受精卵，移植 受精卵至ICR受体鼠，待产仔后，通过双引物PCR鉴定F。以及Fn代小鼠的基因型。RT-PCR，X．gal染色观察小鼠 组织中LacZ基因，运用WB(Western Blot)检测转基因小鼠和野生型小鼠体内目的蛋白表达的差异。结果获得了 含有目的基因的转基因阳性小鼠；通过RT-PCR对阳性小鼠证明LacZ基因的存在；对存在LacZ基因的小鼠进行x． gal染色，在Geo-STOP-msTyr03的脑、睾丸、胸腺中观察到蓝色沉淀，在Geo-STOP-msAxl的脑、心、肾中观察到蓝色 沉淀，间接说明目的基因能表达的组织和器官；对双阳性的Geo-STOP．msTyr03、Geo-STOP—msAxl转基因小鼠和野生 型小鼠，WB检验证实Tym3、Axl基因的表达没有差异，说明在加入stop序列之后，Tym3基因确实存在，而且表达 受到抑制。结论成功建立Geo—STOP—msAxI及Geo-STOP-msTyr03酪氨酸受体转基因小鼠。

补体C3基因敲除小鼠的繁育及子代基因型鉴定

郑静, 刘阳, 胡松, 李敏惠, 李丽梅, 阳泰, 杨淑霞, 邹强

2011, 28(02):  7-9. 

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目的探讨繁殖和鉴定补体C3基因敲除小鼠的实验方法。方法将所引进的补体C3基因敲除杂合子小鼠 (C3+／一)进行饲养并繁殖，其子代出现三种基因型的小鼠。即纯合子C3一／一、杂合子c3+／一、野生型c3+／+， 采用ELISA与PCR相结合对子代小鼠基因型进行鉴定。结果繁育出135只子代小鼠，经鉴定，o+／+、a+／一、 c3一／一各为38只、68只、29只，经x2检验，子代小鼠分离比例符合盂德尔遗传规律。结论正确的饲养繁殖以及 子代鉴定是从杂合子小鼠中获得补体C3基因敲除小鼠的有效途径。

近交系小鼠8个遗传生化标记杂合位点的研究

王洪, 刘双环, 王淑菁, 岳秉飞

2011, 28(02):  10-14. 

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目的为了更加准确有效地监测近交系小鼠的遗传质量，对近交系小鼠的8个遗传生化标记杂合位点进行 研究。方法将近交系小鼠CBA／Ca与BALB／c交配得到杂交Fl代动物CCBFI，同时将近交系小鼠CBA／Ca与 C57BL／6交配得到杂交Fl代动物B6CBFI，对CCBFI和BbCBFI进行遗传生化标记检测。结果找到近交系小鼠 8个遗传生化标记的杂合位点。结论近交系小鼠的8个遗传生化标记位点相对应的等位基因均为共显性。杂合 位点的图谱可以作为监测近交系小鼠质量的判定标准。

维生素E对硫丹染毒小鼠脾细胞因子基因转录的影响

贾静, 周欢女, 周显青, 王迎

2011, 28(02):  15-19. 

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目的为了探讨维生素E对硫丹染毒ICR小鼠脾细胞因子白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介索-6(IL-6)和^r· 干扰素(IFN．1)基因转录的影响，我们设计了该实验。方法将24只ICB小鼠随机分成对照组、硫丹染毒组(染 毒组)和染毒同时给予维生索E(VE)组(实验组)，所用硫丹和维生素E的剂量分别是：0 mr／(kg·d)和 0 me,／(kg·d)(对照组)、0．8 mr,／(kg·d)和0 mr,／(kg·d)(染毒组)和0．8 ms／(kg·d)和100 ms／(kg·d)(实验组)。 灌胃21 d后，取其脾，用Real—Time PCR法检测其脾脏IL-2、IL-6、IFN-Y基因转录的变化。结果染毒组小鼠脾细 胞因子IL-2和1L-6 mRNA水平与对照组相比明显升高，IFN-1 mRNA水平虽有升高趋势，但无显著变化。实验组 小鼠脾IL-2和IL-6 mRNA水平明显低于染毒组，IFN·1 mRNA水平虽有降低趋势，但与染毒组相比无显著变化。 结论上述结果说明，硫丹能促进小鼠脾脏细胞因子IL-2和IL-6的基因转录，但对IFN-^y基因转录没有显著影响； 维生素E能缓解或部分缓解硫丹的作用。

小鼠精原细胞体外培养分化的研究·

杨丹彤, 杨晓梅, 邱毅, 贾颐舫

2011, 28(02):  20-22. 

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目的探讨小鼠精原细胞的分离纯化及体外培养条件。方法采用组合酶消化法分离纯化小鼠精原细胞和 支持细胞，在添加FSHC和TC的基本培养基中进行体外培养。采用反转录PCR方法检测精子细胞特异性基因过 渡蛋白9(Tnp2)的表达以对分化细胞进行鉴定。结果培养5 d后有分化的圆形精子细胞出现，培养7d后收集的 细胞可见Tnp2基因表达。结论通过体外培养小鼠精原细胞可迅速完成减数分裂过程和减数分裂后的分化过程， 并可获得更接近成熟阶段的精子细胞。

腺嘌呤和氧嗪酸制作高尿酸血症大鼠模型比较·

杨桂梅, 黄胜华, 李江, 赵劲涛, 廖云娟, 连希艳

2011, 28(02):  23-26. 

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目的比较腺嘌呤和氧嗪酸制作的高尿酸血症大鼠模型，探讨如何建立持续性高尿酸血症大鼠模型。方法 分别采用腺嘌呤、氧嗪酸高、低剂量灌胃。测定血清尿酸、尿素氮、肌酐，与对照组比较，并进行肾组织病理观察。绩 果腺嘌呤组肾损害严重，且肾损害早于血尿酸的增高。而氧嗪酸组血尿酸明显、持续的升高，且较长时间无明显 肾损害。结论腺嘌呤只适合制作肾衰大鼠模型，而氧嗪酸用于制作高尿酸血症大鼠模型较为合适。

硫丹对长爪沙鼠血细胞免疫相关因子表达的影响

杨蕾蕾, 张潆, 周显青, 王迎

2011, 28(02):  27-30. 

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目的探讨有机氯农药硫丹对长爪沙鼠血细胞免疫功能相关因子的影响。方法将50只长爪沙鼠随机分 喊5组，各组动物所用硫丹灌胃的剂量依次为：O mr,／(kg·d)、0．4 me／(kg·d)、0．8 ms／(k8·d)、1．6 me／(kg·d)和 6．4 mg／(kg·d)。灌胃21 d后，取血检测血细胞免疫功能相关因子的表达。结果药物处理后。红细胞表面CD59 因子和B淋巴细胞表面CD35因子的表达量在各实验组和对照组间没有明显差异(P>0．05)。红细胞膜表面 CD58因子随硫丹浓度的升高显著下降，0．8 mg／(kg·d)、1．6 me／(kg·d)和6．4 me／(kg·d)组较对照组有显著降低 (P<0．05)。结论硫丹能抑制长爪沙鼠红细胞膜表面CD58因子表达。但对红细胞膜表面CD59和B细胞表面的 CD35的表达没有影响。

封闭群长爪沙鼠遗传标准的建立木

李薇, 江其辉, 杜小燕, 尚世臣, 陈振文

2011, 28(02):  31-36. 

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目的建立封闭群长爪沙鼠遗传质量标准和遗传质量检测方法。方法根据群体遗传学理论，参照实验动 物哺乳类实验动物的遗传质量控制(GBl4923—2001)，在查阅大量文献资料的基础上，建立封闭群长爪沙鼠遗传标 准。检测方法采用微卫星标记分析技术。从GeneBank中挑选出的536个小鼠微卫星位点对长爪沙鼠基因组DNA 进行PCR扩增得到135个长爪沙鼠微卫星，并优化PCR扩增条件，通过琼脂糖电泳和STR扫描二级筛选，根据位 点在染色体分布情况、等位基因数目和多态性等优化出适于封闭群长爪沙鼠遗传检测的微卫星位点组合，建立检 测方法。结果初步建立了封闭群长爪沙鼠遗传质量标准和检测方法。

ICR母鼠代乳在长爪沙鼠剖腹产净化中的应用

乔欣, 李胜利, 焦昆, 卢静

2011, 28(02):  37-39. 

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目的优化长爪沙鼠剖腹净化的技术方法。方法在超净工作台中对长爪沙鼠进行剖腹取胎，选择有2—3 胎哺乳经验的ICR母鼠代乳，统计子鼠成活率和离乳率，绘制生长曲线。分别按小鼠微生物学和寄生虫学质量控 制标准，对1月龄和2月龄的子鼠进行检测。结果代乳成活率超过50％，微生物学和寄生虫学检测均符合小鼠 相关国家标准。代乳鼠与非代乳鼠其生长曲线没有差异。结论长爪沙鼠剖腹取胎，以ICR小鼠代乳方法，可以 达到微生物净化的目的。

四氯化碳皮下注射诱导兔肝硬化模型的建立·

于晓红, 金博, 邱慧彬, 付山峰, 路平

2011, 28(02):  40-43. 

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目的应用四氯化碳(CCI+)皮下注射方法，建立兔肝硬化动物模型。方法50只雄性新西兰大白兔随机分 为实验组(n=35)和对照组(n=15)。实验组臀部皮下注射50％CCI．橄榄油0．23 mL／kg，每周2次，对照组注射等 量橄榄油。分别于4 w、8 w和12 w末检测各组兔肝脏功能及组织病理学变化。结果随时间延长，实验组兔肝脏 纤维化程度逐渐加重，血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和^r一谷氨酰转肽酶(GGT)明显升高，12 W末出现 白蛋8／球蛋白比例倒置，可观察到典型肝硬化病理表现，兔肝组织出现典型的假小叶结构，动物死亡率20％，造模 成功率83％。对照组肝脏功能正常，肝脏组织学结构正常。结论此方法可成功地建立兔肝硬化动物模型，该方 法成功率高，可用于相关实验研究。

HBK-SPF鸭生理生化指标的测定

韩凌霞, 刘霄磊, 蔡文博, 于海波, 李淑兰, 曲连东

2011, 28(02):  44-46. 

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目的测定不同日龄的HBK．SPF(哈尔滨白壳无特定病原体)鸭生理生化指标，并分析比较雌雄之间的差异。 方法采用常规方法测定7日龄和56日龄的雌、雄HBK．SPF鸭的生理生化指标，并对雌雄差异进行了统计学分 析。结果在所测定的生理生化指标中，不同日龄、性别之间表现显著性差异的项目不同，其中7日龄时，嗜中性 粒细胞(NE)、血小板计数(PLT)、丙氨酸氨基转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、白蛋白(ALB)、尿素氮(BUN)、血 清钠(Na)血清钾(K)、血清镁(Mg)等参数存在性别差异，达到极显著(P<0．01)，单核细胞(MO)和血清磷(P)存 在显著性别差异(P<0．05)；56日龄时，白细胞计数(V／8C)、红细胞压积(HCT)、血红蛋白(HGB)、ALT、ALP、乳酸 脱氢酶(LDH)、BUN、P、Mg等参数存在极显著性别差异(P<0．01)，平均红细胞体积(MCV)、平均血红蛋白含量 (MCH)、PLT、血清氯(C1)等差异显著(P<0．05)，其它生理生化指标在雌雄之间差异不显著。结论不同日龄的

设施 管理

实验用小型猪行为学应用于中医基础研究的方法学探讨

张宇沁, 田宇瑛, 丁玉龙, 黄涛, 贾术永, 张维波

2011, 28(02):  47-51. 

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目的对实验用小型猪应用于中医基础研究的方法学进行探讨。方法利用特定的笼具和监控系统观测记 录造模前后小型猪的行为学改变。结果该方法初步建立了对大型实验动物行为学应用于中医基础研究的观测 方法。采用的笼具与行为学观测系统对全面、准确采集并分析相关数据具有很大的作用。结论本方法已经成功 应用于实验用小型猪经络堵塞模型的行为学研究，并有望应用于其他中医基础实验研究，更多结论仍有待进一步 实验观察。

高校实验动物中心档案建设与管理

翟亚南, 卢静

2011, 28(02):  52-54. 

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对实验动物档案的分类和内容进行了探讨，阐述了建设和管理实验动物档案的意义和作用，并提出了建设和 管理实验动物档案的措施。

医院的动物实验管理需要适应发展要求

瞿叶清, 郭玉琴, 哈惠馨, 钱丽萍

2011, 28(02):  55-57. 

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相关文章 | 计量指标

探讨医院动物实验管理工作的特点与难点，分析影响动物实验管理平台效率的因素，通过加强对实验动物的 管理、对实验人员的管理等措施，提高动物实验管理平台的效率，尽量满足临床医务人员的科研需求。

综述 进展

转基因家畜及灵长类疾病动物模型

刘岩, 张然, 马腾, 张运海, 何祖勇, 朱化彬, 李宁

2011, 28(02):  58-61. 

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无

实验用小型猪在毒理学研究中的应用

洪丽玲, 张天宝

2011, 28(02):  62-65. 

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未来的丙型肝炎疫苗

邵惠训

2011, 28(02):  64. 

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丙型肝炎病毒(hepatitis C virus，HCV)是丙型肝炎的病原体，是导致输血后肝炎和非甲非乙型肝炎的主要致 病因子。HCV感染常导致慢性肝炎、肝硬化和肝细胞癌。HCV在细胞内和动物体内复制能力很差，没有理想的细 胞模型和动物模型。丙型肝炎目前尚无疫苗，还有很多病人在等待治疗。研制预防性和治疗性疫苗。以控制HCV 感染有着重要意义。经过几代科技工作者的努力和奉献，丙型肝炎疫苗研究取得了重大进展。用核酸疫苗作首次 免疫，用多肽疫苗或树突状细胞疫苗作加强免疫，不但有预防作用，而且有治疗效果。核酸疫苗将为改善人类和动 物健康作出巨大贡献。

经验 交流

浅谈部分啮齿类动物疾病对试验结果的干扰及其诊断要点

赵化阳, 李伟, 卢胜明

2011, 28(02):  64. 

摘要 ( )  

相关文章 | 计量指标

加深对啮齿类动物疾病的了解，有利于控制和消除这类疾病。就全球存在的部分大小鼠疾病病原体(MHV、 EDIM、MPV／RPV、RRV)进行讨论。并对病原体感染动物后对试验研究的干扰以及有效的检测加以探讨。

研究 论著

加强高校实验动物科技论坛交流，促进区域共同提高·

程津津, 任萍萍, 王禄增

2011, 28(02):  64. 

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技术 方法

解脲支原体大鼠感染模型的建立

王喆, 陆承荣, 罗渊, 段连宁, 胡海翔

2011, 28(02):  64. 

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目的观察解脲支原体(Ureaplasma urealyticum，Uu)感染对大鼠睾丸形态学的影响。方法在大鼠膀胱内接 种Uu(105ccU／mL)。在大鼠的睾丸组织中培养出Uu，用聚合酶链反应(PCR)检测Uu，并用光镜观察睾丸组织。结 果模型组检测出Uu阳性8只，检测阳性率为66．7％，正常组均未检测出Uu；模型组睾丸重量明显低于正常组(P <0．01)．正常组睾丸曲细精管正常，生精细胞排列有序，管腔中常可见到精子，模型组光镜可见曲细精管变性，生 精细胞减少，部分区域间质呈渗出、水肿。结论提示Uu感染可干扰精子发生，是造成男性不育的因素之一。

研究 论著

比格犬自发疾病的病理组织学研究

朱奎成, 刘娜, 王纯耀, 金树兴

2011, 28(02):  64. 

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为了解比格犬组织器官的自发疾病，为药物的安全性评价提供背景资料，采用病理组织学方法对8一12月龄 的36只比格犬主要脏器进行了观察，发现，肝脏、心脏、脾脏、肺脏、肾脏等组织器官均有不同程度的自发病变。

技术 方法

实验Beagle犬贾第鞭毛虫感染情况调查

毕甜甜, 张晋, 文润来, 韩杰, 富强, 王小珂, 卢胜明

2011, 28(02):  64. 

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为了掌握Beagle犬贾第鞭毛虫的感染情况，本实验室在2009年3月一2010年2月共抽样检测了910只实验 Beagle犬，其中109只检测到了贾第鞭毛虫包囊，贾第鞭毛虫感染的总阳性率为11．98％。结果还表明，不同月份 问差异极显著，不同性别间差异不显著，幼犬感染率大于成犬，不同年龄组间差异极显著。通过检测可掌握犬群中 贾第鞭毛虫的感染情况，对及时诊断、发现并控制疾病的传播有积极的指导意义。