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2010年 第27卷 第04期 刊出日期:2010-08-28
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论文
乙型脑炎病毒(JEV)免疫荧光(IFA)检测方法的建立
王吉;高正琴;卫礼;付瑞;岳秉飞;贺争鸣;
2010, 27(04): 1-5.
摘要
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计量指标
目的建立乙型脑炎病毒(JEV)免疫荧光(IFA)检测方法,应用于猪及猪源性生物材料JEV的检测。方法滴定病毒TCID50,筛选JEV敏感细胞,依据国标IFA法制备抗原片,并进行特异性、敏感性和稳定性试验。结果选取BHK21细胞作为JEV敏感细胞,病毒感染力滴度(TCID50)为10-8.9.mL-1;与猪瘟病毒(CSFV)、猪细小病毒(PPV)均无交叉反应;稳定性和敏感性试验显示,不同时间IFA检测灵敏度均为1∶2560;可检测到的病毒滴度最低为10-6.5.mL-1。结论建立的IFA法敏感性、特异性强,稳定性好,可用于猪及猪源性生物材料JEV的检测。
投稿须知
2010, 27(04): 5-5.
摘要
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<正>关于《实验动物科学与管理》更名为《实验动物科学》的启事《实验动物科学与管理》迄今已出版、发行了20多年,承蒙广大读者、作者的支持和厚爱及各届编委的悉心呵所和辛勤耕耘,不仅相继被评为"中国科技核心期刊"、"中国科技论文统计期刊"和《中国学术期刊综
流感病毒H3N2血凝素基因和神经氨酸酶基因在真核酵母菌中的表达
李梓;张烨;唐启慧;陈禹宝;于在江;辛丽;陈永坤;陈清轩;舒跃龙;
2010, 27(04): 6-10.
摘要
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计量指标
目的克隆、表达和鉴定流感病毒H3N2血凝素基因(hemagglutinin,HA)和神经氨酸酶基因(neuramidinase,NA)序列,为制备抗体和基因工程疫苗打下基础。方法在成功克隆流感病毒H3N2全长HA、NA基因并测序的基础上,将部分基因序列克隆到表达载体pMET A上,构建了重组表达质粒pMET A/HA(52 bp~1 549 bp)、pMET A/NA(121 bp~1 260 bp),电转化真核酵母菌pMAD16,甲醇诱导表达,利用Ni2+亲和层析柱对重组蛋白进行纯化,并用Western Blotting和ELISA方法检测其抗原性。结果重组蛋白在酵母菌中可以高效表达,SDS-PAGE显示蛋白表达后形成了二聚体,蛋白纯度占总蛋白的95%以上,ELISA和Western Blotting实验证实,重组蛋白具有良好的抗原性。结论本研究成功克隆和表达了流感病毒H3N2 HA、NA基因序列,为流感病毒H3N2诊断试剂和疫苗开发等进一步研究奠定了基础。
C57BL/6J胚胎冷冻小鼠的遗传监测和分析研究
刘先菊;黄馨;王艳蓉;刘云波;
2010, 27(04): 11-14.
摘要
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计量指标
目的用生化标记和微卫星检测法观察近交系C57BL/6J小鼠胚胎冷冻后的遗传质量是否发生改变。方法采用国标(GB/T 14927.1-2008)生化标记基因检测法对4只玻璃化冷冻、解冻移植后获得的C57BL/6J F1代小鼠的13个生化位点进行预检测,再根据微卫星DNA多态性的遗传监测方法进行多态性分析。结果4只玻璃化冷冻后移植获得的C57BL/6 F1代小鼠的遗传概貌与国标(GB/T 14927.1-2008)中的14个生化位点完全一致;并与本文作者已建立"几种常用近交系小鼠微卫星DNA多态性的分析研究"的遗传监测结果完全相符。结论玻璃化冷冻法(EFS40,straw)对C57BL/6J冷冻胚胎小鼠的遗传物质并未造成影响,其遗传特性保持稳定,是可行的小鼠胚胎冷冻方法。
小鼠Bpi条件基因打靶载体的构建和鉴定
康赟;林福玉;滕艳;侯宁;程萱;吕喆;孔庆利;安云庆;
2010, 27(04): 15-20.
摘要
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计量指标
目的构建小鼠Bpi条件基因打靶载体,为建立Bpi条件基因打靶小鼠模型和深入研究Bpi基因功能奠定基础。方法采用Cre/LoxP系统,选择小鼠Bpi基因第2、3外显子作为条件性敲除的目的片段,并在其两侧插入LoxP位点;运用LA-PCR技术,以129品系小鼠ES细胞基因组DNA为模板分步扩增包括Bpi第2、3外显子(中间同源臂)和上游同源臂在内的3.1 kb基因片段以及下游同源臂4.9 kb基因片段;构建pBSKⅡ-5SLoxP和ploxPFRTNeo-3L重组质粒,将前者酶切产物(3.1 kb)与酶切后的ploxPFRTNeo-3L质粒相连获得Bpi条件基因打靶载体。结果经多个限制性内切酶酶切鉴定和测序证实,构建的pBSKⅡ-5SLoxP、ploxPFRTNeo-3L重组质粒和Bpi条件基因打靶载体结构正确,与设计相符。结论成功构建了小鼠Bpi条件基因打靶载体。
动态·信息
2010, 27(04): 20-20.
摘要
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<正>人类干细胞移植治愈瘫痪鼠日本东京庆英大学的科研人员将人类干细胞移植到老鼠身上的实验取得初步成功。实验用鼠因为中枢神经系统受损而四肢瘫痪。研究人员用人的皮肤培养成干细胞,再将皮肤干细胞培育成神经干细胞,然后成
线粒体D-Loop区全序列分析A2a基因敲除小鼠生产扩大群的遗传稳定性
王金丹;管敏强;李渊;陈锡文;金龙金;
2010, 27(04): 21-23.
摘要
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计量指标
目的采用线粒体D-Loop全序列测定法对A2a基因敲除小鼠近交系生产扩大群中的小鼠进行了遗传稳定性分析。方法对5个子代A2a杂合子50只小鼠的线粒体DNA D-Loop区进行了PCR扩增,产物纯化后测序,其结果与小鼠线粒体标准序列比对,分析50只小鼠之间的序列差异。结果发现检测的50只小鼠的D-Loop基因序列完全一致,且与小鼠线粒体标准序列完全一致。结论 A2a基因敲除小鼠扩大繁殖群具有较好的遗传稳定性,同时为进一步研究A2a小鼠提供遗传学资料。
SX1近交系小鼠遗传纯度的初步研究
闻建华;李建国;田还成;张伟;秦秀军;任连生;
2010, 27(04): 24-26.
摘要
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计量指标
目的初步鉴定山西省肿瘤研究所第22代SX1近交系小鼠遗传纯度。方法应用生化基因位点遗传质量检测法和皮肤移植测试法对山西省肿瘤研究所自行培育的第22代昆明近交系小鼠进行了遗传纯度的初步鉴定。结果所检测的6只近交系小鼠的13个生化位点均未发现杂合基因型,所检基因位点全部纯合;所检测的10只近交系小鼠异体间未发现急性排斥现象。结论初步判定山西省肿瘤研究所自行培育的第22代昆明近交系小鼠在遗传质量上符合国标有关实验动物遗传质量检测的要求。
槲芪散对小鼠酒精性肝损伤的干预作用
薛晓伟;丰平;董坤;赵娜;王学江;
2010, 27(04): 27-32.
摘要
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计量指标
目的观察高度白酒和红葡萄酒对肝脏的不同作用;分别从能量代谢和氧化应激两个方面阐述高度白酒可引起小鼠的酒精性肝损伤;同时探讨槲芪散治疗酒精性肝损伤的药理学机制。方法将昆明种雄性小鼠随机分为4组,正常组、红葡萄酒组、白酒模型组和槲芪散治疗组。造模14 d后,取血,采用酶标仪比色法测定血清中丙二醛(malondialdehydehyde,MDA)的含量、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和过氧化氢酶(catalase,CAT)的活性;取肝组织,进行HE染色,过碘酸-雪佛氏染色(schiffperiodicacidshiff,PAS染色);酶组织化学染色法检测葡萄糖-6-磷酸酶(glucose-6-phosphatase,G-6-P)、琥珀酸脱氢酶(succinate dehydrogenase,SDH)以及ATP酶(adenosinetriphosphatase,ATPase)的活性。结果白酒模型组MDA含量显著升高(P<0.05),抗氧化酶类SOD和CAT的活性显著减低(P<0.05);能量代谢的相关酶类ATPase、SDH以及G-6-P活性下降;红葡萄酒组HE染色显示红葡萄酒对肝脏无损伤。槲芪散能够显著降低因高度白酒造成的血清MDA含量(P<0.05),提高抗氧化酶SOD(P<0.05)和CAT(P<0.05)的活性;同时能量代谢相关酶的活性提高以及肝糖原储备增加。结论实验表明长期大量酒精摄入能够造成酒精性肝损伤,而红葡萄酒对肝脏无损伤;槲芪散对酒精性肝损伤有明显的干预作用。
强心颗粒活血化瘀作用的实验研究
秦文艳;董波;陈贺;齐越;孟莉;赵金明;
2010, 27(04): 33-36.
摘要
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计量指标
目的研究强心颗粒的活血化瘀作用。方法利用肾上腺素造成小鼠肠系膜微循环障碍,观察强心颗粒对小鼠肠系膜微循环的影响;大鼠两次冰水刺激,期间皮下注射盐酸肾上腺素注射液0.08 mL/100 g,造成大鼠血瘀模型,观察药物对大鼠血液流变学的影响。结果强心颗粒低剂量21.5 g/kg、中剂量43 g/kg、高剂量86 g/kg组均能加快小鼠血流速度,改善血流状态,改善小鼠微循环障碍;强心颗粒中剂量30 g/kg、高剂量60 g/kg组能明显降低大鼠高、中、低切状态下的血黏度,其中高剂量组能降低红细胞压积,中剂量组能加快红细胞电泳时间。结论强心颗粒具有明显的活血化瘀作用。
脑栓通颗粒对实验性脑缺血的保护作用
孟莉;焦富英;乔敏;向绍杰;乔菊久;张颖;秦文艳;
2010, 27(04): 37-39.
摘要
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计量指标
目的研究脑栓通颗粒对实验性脑缺血的保护作用。方法采用小鼠断头后张口喘气的方法,观察脑栓通颗粒对小鼠耐缺氧的影响;常压耐缺氧法考察脑栓通颗粒的抗缺氧作用;采用尾静脉注射伊文思蓝溶液,测定脑内的伊文思蓝含量,观察脑栓通颗粒对小鼠血脑通透性的影响;采用结扎大鼠双侧颈总动脉的方法,考察脑栓通颗粒对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响。结果脑栓通颗粒能明显延长小鼠断头后喘气时间,对延长小鼠常压耐缺氧下存活时间的效果不明显;脑栓通颗粒中剂量组和高剂量组能明显增加小鼠脑内的伊文思蓝含量,增强血脑通透性;脑栓通颗粒能明显减轻缺血再灌注后大鼠的脑组织含水量,改善水肿状态。结论脑栓通颗粒对实验性脑缺血有保护作用。
固本清肺贴膏对小鼠止咳、祛痰作用的实验研究
李显华;宋达夫;甘雨;杜佳林;顾晓颖;安然;
2010, 27(04): 40-41.
摘要
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计量指标
目的研究固本清肺贴膏的止咳、祛痰作用。方法采用浓氨水喷雾法观察固本清肺贴膏对小鼠止咳作用;采用酚红祛痰法观察固本清肺贴膏对小鼠化痰作用。结果固本清肺贴膏能显著延长小鼠咳嗽潜伏期、减少咳嗽反应次数,增加小鼠支气管酚红排泌量。结论固本清肺贴膏具有止咳、祛痰作用。
转移因子(TF)对幼年猕猴生理生化指标的影响
禹文海;和占龙;黄芬;陈丽雄;鲁帅尧;赵远;王俊斌;杨竟凯;杨亮宇;
2010, 27(04): 42-45.
摘要
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计量指标
目的分析人用转移因子(TF)对幼年实验猕猴的影响,探索其在实验猕猴中应用的效果,为开发和制备实验猕猴专属制品提供科学依据。方法采用全自动血液分析仪和全自动生化仪对幼龄实验猕猴(5♂,5♀)部分血液生理生化指标进行测定和分析。结果血液生理指标在对照组和实验组之间比较,MCH指标有极显著性差异(P<0.01),MCHC指标有显著性差异(P<0.05);在实验组内各组间比较,MCH指标有极显著性差异(P<0.01),WBC、PCT、Mid#、RDW、PLT、PDW有显著性差异(P<0.05)。血液生化指标在对照组和实验组之间比较,ALT指标有显著性差异(P<0.05),TG、UA、AST、AKP、LDH指标有极显著性差异(P<0.01);在实验组内各组间比较,LDH、AKP、AST有显著性差异(P<0.05)。其它各项指标没有显著性差异。结论人用转移因子对幼年实验猕猴的部分生理生化指标有显著的影响,为合理利用TF和开展动物专属制品研究提供了基础。
淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒在实验大鼠中的感染状况
佟巍;乔红伟;魏强;张丽芳;代小伟;刘先菊;王艳荣;刘云波;
2010, 27(04): 46-48.
摘要
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计量指标
目的对实验室留存的大鼠血清样本进行淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒(LCMV)抗体检测,调查LCMV在我国实验大鼠中的感染情况。方法依据现行国家标准中规定的免疫荧光试验(IFA)方法对我实验室保存的172份大鼠血清样本(包括48份无级别、100份清洁级和24份SPF级大鼠血清样本)进行LCMV抗体检测。结果无级别大鼠血清样本(n=48)15份阳性,阳性率为33.25%,强阳性样本滴度可达1∶1280;SPF级及清洁级大鼠血清样本全部阴性。结论大鼠可以感染LCMV,实验动物等级标准应增加对大鼠LCMV的检测。
屏障环境动物实验设施的改建和使用
卢选成;李晓燕;张奇;李军延;
2010, 27(04): 49-54.
摘要
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计量指标
为适应生命科学对动物实验设施要求,利用现有资源,对原动物实验设施进行了改建,规范了人员、实验动物和空气等移动传递方向,加强自动控制温度、湿度和压力梯度、设施消防安全措施,增加了通讯、监控、门禁和音乐播放系统、使新的屏障环境符合国标要求和科研需要。
硫普罗宁注射剂安全性再评价
洪花;赵相任;李志满;
2010, 27(04): 55-58.
摘要
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计量指标
目的针对上市硫普罗宁注射剂存在一定临床反应的反馈,对市售硫普罗宁注射剂进行安全性再评价。方法对硫普罗宁注射剂进行血管刺激性、溶血性、过敏性试验。人与动物剂量换算依照1:20(家兔和豚鼠)。结果硫普罗宁注射剂对家兔耳缘静脉无明显刺激作用;对家兔红细胞无明显溶血及致凝聚作用;对豚鼠无过敏作用。结论上市硫普罗宁注射剂供临床静脉注射用安全性尚好。
建立Ⅱ型糖尿病大鼠模型的探讨
董建一;王亮;王福金;李慧玲;詹红微;王靖宇;
2010, 27(04): 59-61.
摘要
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计量指标
目的探讨Ⅱ型糖尿病SD大鼠模型的稳定性与耐受性。方法采用连续4周喂养高脂饲料后,空腹一次性注射25 mg/kg链脲佐菌素的方法,建立Ⅱ型糖尿病SD大鼠模型。结果造模7 d后血糖值均高于6.78 mmol/L。持续观察22 d,血糖值后期略有波动,但稳定性与耐受性良好(均高于6.78 mmol/L)。结论采用高脂饮食,联合空腹一次性注射25 mg/kg链脲佐菌素的方法能成功建立Ⅱ型糖尿病SD大鼠模型。该方法建立模型简单、用药量小,有良好的稳定性与耐受性。
动物实验的生物安全防护初探
郝智慧;赵厚德;
2010, 27(04): 62-64.
摘要
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计量指标
生命科学的许多研究领域都依赖于动物实验,动物实验也存在生物安全的危险,这种危险来自于动物性气溶胶、人畜共患病以及实验室获得性疾病感染。从事动物实验的工作人员应充分认识动物实验生物安全防护的重要性,加强生物安全防护知识和技能的培训,采取有效的管理和监督措施,减少或尽可能杜绝自身感染、环境污染以及实验室感染等事件发生。
实验动物资源网络共享公告板的设计及思考
李志满;佟晓华;洪花;董玉杰;李青;
2010, 27(04): 65-67.
摘要
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计量指标
为了实现实验动物信息资源的网络共享,我们设计、建设了实验动物资源信息网络共享公告板,将各生产单位可供应的实验动物的品种和数量通过网络以电子表格的方式显示出来,为实验动物的使用单位提供快捷、可靠的查询通道,也为管理者的决策提供数据参考,也有利于本地资源的充分利用,做到多方参与、共建共享。
无菌隔离器与超净工作台、洁净层流柜的直连改造尝试
李志满;田之宁;张晓红;佟晓华;
2010, 27(04): 68-69.
摘要
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计量指标
为了解决无菌隔离器在开放环境下进行清洁级、SPF级动物实验的问题,将隔离器与超净工作台、层流柜分别进行了直连对接改造,经过改造的屏障设施成本低,操作简便、安全,能提高工作效率,实验效果良好。
单向气流饲育系统对控制实验动物屏障环境的作用分析
宗阿南;郑心然;赵文;高文婷;王禄增;
2010, 27(04): 70-71.
摘要
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计量指标
<正>我国目前建成的屏障系统实验动物设施气流组织方式多为乱流式,从净化原理分析,乱流的气流组织具有方向多变、常伴有逆流、涡流气体流动的特性,会在室内产生死角,设施动态运行后,实验动物皮屑、垫料碎屑及排泄物等有害物质不能完全及时地排出,易造成系统内微生物污染,并危及实验动物工作者的身体健康。
我国屏障系统实验动物环境设施建设难点分析
宗阿南;王禄增;
2010, 27(04): 72-73.
摘要
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计量指标
<正>国家科技部组织实验动物学专家分别于1994年、2001年、2008年编制和修订了国家实验动物环境设施标准:《实验动物环境及设施》——GB/T14925-94;《实验动物环境及设施》——GB14925-2001;《实验动物设施建筑技术规范》——GB50447-2008,并经国家技术监督局批准发布实施。这些标
SPF级实验动物设施净化空调的耗能与节能及运行管理
王丽清;马天驰;
2010, 27(04): 74-76.
摘要
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计量指标
<正>《实验动物设施建筑技术规范》提出在满足使用功能条件下尽可能降低运行成本。因为实验动物设施全新风系统居多,其能耗比普通空调系统高很多,运行费用巨大。因此,在空调设计时,必须把"节能"作为一个重要条件来考虑。我们拟通过工程实例计算比较,即可看出沈阳地区两种同样温湿度条件下空调能耗的差别,采用有效节能手段后,能耗与投资能否下降。
小动物快速计数装置的研制
赵建文;银欢;匡宝平;
2010, 27(04): 77-78.
摘要
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计量指标
目的研制一种适用于小动物生产、供应及使用环节中对大批量体型小、陆生动物进行快速计数的装置。方法先将成群小动物快速逐个分开排列,便于计数。然后将分开排列的动物经计数器准确计数,显示在控制面板上。技术方案包括动物盛装箱、转轮、传输带、过渡通道、洞口调节轮、计数器、收集漏斗、收集盒、支架和控制面板等部分。结果成群小动物经本实用新型装置快速传输,可逐个被计数并显示。结论此装置快捷通畅,简便易行,明显克服了传统人工计数的缓慢、繁琐、易出错等缺点,能够达到省时、省力、省钱的目标要求。
热烈庆祝“第八届中国北方实验动物科技年会”顺利召开
2010, 27(04): 78-78.
摘要
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计量指标
<正>由内蒙古自治区科技厅、内蒙古自治区实验动物管理委员会主办,内蒙古大学、北京实验动物行业协会、内蒙古自治区食品药品检验所承办的"第八届中国北方实验动物科技年会"于2010年7月4日在内蒙古自治区呼和浩特市内蒙古大学校园内顺利召开。
加强高校实验动物科学技术交流,促进区域共同提高
王禄增;
2010, 27(04): 79-80.
摘要
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计量指标
<正>实验动物科学是现代科学技术的重要组成部分,是研究生命科学的基础和条件,是衡量现代生物医学科学研究的重要标志。高等院校、科研院所是实验动物科学发展的重要研究基地之一。
动物行为学应用——导盲犬的培训与应用情况简介
李慧玲;王亮;董建一;王福金;王靖宇;
2010, 27(04): 81-82.
摘要
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计量指标
<正>导盲犬是应用动物行为学原理,结合视障人士的特征,专门培训用来为视障人士提供向导服务的工作犬,在国外已经有100多年的历史,在我国正处于起步阶段。我们从导盲犬的起源、意义、国内外的发展现状及训练方法等方面进行了探讨。