基于 Cre-Loxp 系统构建特异性标记血管内皮细胞的双荧光大鼠模型

doi:10. 3969 / j. issn. 1006-6179. 2025. 02. 011

实验动物科学 ›› 2025, Vol. 42 ›› Issue (2): 71-75.DOI: 10. 3969 / j. issn. 1006-6179. 2025. 02. 011

基于 Cre-Loxp 系统构建特异性标记血管内皮细胞的双荧光大鼠模型

( 1. 天津天士力之骄药业有限公司,天津 300410) ( 2. 天津中医药大学,天津 300193) ( 3. 天津市中药注射剂安全性评价重点实验室,天津 300410) ( 4. 南开大学医学院,天津 300071)

收稿日期:2024-01-02 出版日期:2025-04-28 发布日期:2025-05-05
通讯作者: 聂永伟( 1986—) ,男,实验师,研究方向为实验动物和中药药理,E-mail:yongweinie@ nankai. edu. cn。鞠爱春( 1973—) ,男,正高级工程师,研究方向为中药注射剂工艺及质量控制,E-mail:juach@ tasly. com。
作者简介:姚宇晴( 1998—) ,男,硕士研究生,研究方向为中药学,E-mail:17803332269@ 163. com。

Construction of a Dual-fluorescence Rat Model Specifically Labeling Vascular Endothelial Cells Based on the Cre-Loxp System

( 1. Tianjin Tasly Pride Pharmaceutical Co. , Ltd. , Tianjin 300410,China) ( 2. Tianjin University of Traditional Chinese Medicine, Tianjin 300193,China) ( 3. Tianjin Key Laboratory of Safety Evaluation of traditional Chinese Medicine Injections, Tianjin 300410,China) ( 4. School of Medicine, Nankai University, Tianjin 300071,China)

Received:2024-01-02 Online:2025-04-28 Published:2025-05-05

摘要/Abstract

摘要： 目的旨在利用 Cre-Loxp 系统构建特异性标记血管内皮细胞的双荧光大鼠模型,以便研究血管内皮细胞的结构和功能。方法将使用 Cre 重组酶与血管内皮细胞特异性启动子相连构建的 Tek-e( Cre) 3 基因,定点敲入大鼠与 Rosa26 定点 CAG-Loxp-tdTomato-3xpolyA-Loxp-EGFP-WPRE-polyA 基因表达大鼠,分别进行鉴定和杂交,对其产生的子代大鼠进行基因型鉴定,并取子代大鼠的脑和心脏组织制成冰冻切片后,使用荧光显微镜观察其表型特征。结果两种亲代大鼠基因型鉴定结果显示亲代大鼠均为纯合子,对子代大鼠进行基因型鉴定结果显示两种基因都在子代大鼠中表达且子代大鼠为纯合子。在荧光显微镜下观察到大鼠脑和心脏组织中血管部位存在着绿色荧光(EGFP)信号,而其他组织则表现出红色荧光( tdTomato) 信号,指示 Cre-Loxp 系统成功地使 EGFP 基因在血管内皮细胞中表达。结论本研究构建的双荧光大鼠模型成功地实现了对血管内皮细胞的特异标记,该模型的构建为研究血管内皮细胞的结构、功能和相关疾病提供了有力的工具。

关键词: 大鼠, Cre-Loxp 系统, 荧光蛋白, 血管内皮细胞

Abstract: Objective To construct a dual-fluorescent rat model specifically labeling vascular endothelial cells using the Cre-Loxp system, in order to study the structure and function of vascular endothelial cells. Method Tek-e ( Cre ) 3 gene knock-in rats, constructed by linking Cre recombinase with a vascular endothelial cell-specific promoter, and Rosa26 knock-in rats expressing the CAG-Loxp-tdTomato3xpolyA-Loxp-EGFP-WPRE-polyA gene were identified and crossed. The offspring rats were genotyped, and their brain and heart tissues were processed into frozen sections for phenotypic observation using a fluorescence microscope. Result Genotyping of the parental rats showed that they were both homozygous. Genotyping of the offspring rats revealed that both genes were expressed in the offspring, which were also homozygous. Under the fluorescence microscope, green fluorescent (EGFP) signals were observed in the vascular regions of the brain and heart tissues of the offspring rats, while other tissues exhibited red fluorescent ( tdTomato) signals, indicating that the Cre-Loxp system successfully expressed the EGFP gene in vascular endothelial cells. Conclusion The dual-fluorescence rat model constructed in this study successfully achieved specific labeling of vascular endothelial cells, providing a powerful tool for studying the structure, function, and related diseases of vascular endothelial cells.

Key words: rat, Cre-Loxp system, fluorescent protein, endothelium

中图分类号:

Q95-3

姚宇晴, 薛子卓, 张燕欣, 李德坤, 万梅绪, 李智, 原景, 聂永伟, 鞠爱春. 基于 Cre-Loxp 系统构建特异性标记血管内皮细胞的双荧光大鼠模型[J]. 实验动物科学, 2025, 42(2): 71-75.

YAO Yuqing, XUE Zizhuo , ZHANG Yanxin, LI Dekun , WAN Meixu , LI Zhi , YUAN Jing , NIE Yongwei, JU Aichun. Construction of a Dual-fluorescence Rat Model Specifically Labeling Vascular Endothelial Cells Based on the Cre-Loxp System[J]. Laboratory Animal Science, 2025, 42(2): 71-75.

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Construction of a Dual-fluorescence Rat Model Specifically Labeling Vascular Endothelial Cells Based on the Cre-Loxp System

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