摘要： 摘要: 目的 分析比格犬雌激素受体 EＲβ 以及剪切异构体 EＲβ419、EＲβ431的转录活性。方法 将细胞分为 6 组，空白对照组( 正常含有培养液的 293T 细胞) ，LV5-EＲβ 组( 稳定表达 EＲβ 的 293T 细胞) ，LV5-NC 组( 感染慢病毒 LV5 空载体的 293T 细胞) ，Lenti-OE-Flag-EＲβ431组( 稳定表达 EＲβ431 的 293T 细胞) ，Lenti-OE-Flag-EＲβ419 组( 稳定表达 EＲβ419的 293T 细胞) ，Lenti-OE-Flag-EＲβ419-NC 组( 感染慢病毒 Lenti-OE-Flag 空载体的 293T 细胞) 。其中每组组内又分为 2 组，每组细胞瞬时转染构建的重组质粒 EＲE-LUC 和 ＲLUC，每组中的其中一组加入终浓度为 10μmol /L 的 E2，而另一组内加入等量无水乙醇。分别检测每组加入刺激( E2 和无水乙醇) 前后的荧光素酶活性。结果 成功地将雌激素反应元件 EＲE 克隆到荧光素酶报告载体 pGL3-Vector 启动子上; 设计引物扩增出的 hＲluc-neo 基因成功克隆到 pGL3-Basic 载体; 加入雌激素后，比格犬 EＲβ 转录活性明显升高( P ＜ 0. 01) ，而 EＲβ419和 EＲβ431转录活性在雌激素加入前后变化不大( P ＞ 0. 05) 。结论 成功建立了比格犬 EＲβ 的转录激活系统，而 EＲβ419 和 EＲβ431 的 LBD 区域都有部分的缺失，使得其不能与雌激素结合，继而转录活性无法被激活。
中图分类号:
