摘要： 摘要: 目的 本研究目的为构建重组穿梭载体，拯救带有增强型绿色荧光蛋白( Enhanced green fluorescent protein， EGFP) 重组病毒，为重组二联苗的研制奠定基础。方法 选择已经证实的 US 区域的 US2-SOＲF3、US7-US8 和 UL 区域中的 UL15-UL18 的非编码区作为插入位点构建穿梭载体 P-US2-SOＲF3-EGFP，P-UL15-UL18-EGFP，P-US7- US8-EGFP。在已感染疫苗毒的鸡胚成纤维细胞( chicken embryo fibroblasts，CEFs) 中转染穿梭载体，经细胞同源重组，收集细胞上清，进行噬斑筛选及纯化。结果 成功构建了三个带有 EGFP 标签的穿梭载体，pBlusecript II SK 构建的穿梭载体未成功筛选到重组噬斑而用 pUC18 构建的穿梭载体成功筛选到重组噬斑。结论 拯救鸭瘟重组毒的研究中，pBlusecript II SK 载体可能不是最佳的适用载体，也可能是插入位点为病毒复制的必须区。
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