实验动物科学 ›› 2014, Vol. 31 ›› Issue (04): 1-5.

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猫疱疹病毒Ⅰ型( FHV-1) 抗体 ELISA 检测方法的建立与初步应用

  

  1. (中国食品药品检定研究院实验动物资源研究所、国家实验动物微生物、遗传检测中心,北京 100050)
  • 出版日期:2014-08-29 发布日期:2016-12-05
  • 基金资助:

    国家科技支撑计划项目: 实验动物质量检测关键技术研究( No. 2013BAK11B01)

Establishment and Preliminary Application of ELISA for Detecting Antibody to Felid Herpesvirus 1 in Cat

  • Online:2014-08-29 Published:2016-12-05

摘要: 摘要: 目的 建立猫疱疹病毒Ⅰ型( FHV-1) 抗体 ELISA 检测方法,应用于临床样品中 FHV-1 抗体的检测。方法 培养猫肾传代细胞( CRFK) ,接种 FHV-1 病毒,制备 CRFK 正常抗原和 FHV-1 特异抗原,滴定山羊抗猫 IgG-HRP 和 抗原最佳工作浓度,并进行特异性、敏感性、稳定性及精密性实验。结果 正常抗原、特异抗原和酶结合物最佳工 作浓度分别为 0. 05 μg /mL、10 μg /mL 和 1∶ 5 000; 正常抗原、特异抗原批内变异系数分别为 8. 7% 和 5. 8% ,批间平均变异系数分别为 11. 9% 和 6. 6% ; 检测灵敏度为 1∶ 6 400; 与猫细小病毒( FPV) 、猫杯状病毒( FCV) 均无交叉反应。稳定性试验相对偏差小于 25% 。结论 建立的 ELISA 方法重复性、稳定性好,特异性、敏感性强,可用于猫 FHV-1 抗体的检测。

关键词: 猫疱疹病毒 1 型, ELISA,

Abstract: Abstract: Objective To establish a ELISA method for detection of Felid herpesvirus 1( FHV-1) antibody in cat. Method Raises the CRFK cell,vaccinate the FHV-1 virus,prepare the normal CRFK antigen and special FHV- 1 antigen,titrate the best working density of enzyme union and the normal or special antigen and carry out the experiments of accuracy,sensitivity,stability and specificity. Result The best working density of normal,special antigen and the enzyme union is 0. 05 μg /mL,10 μg /mL and 1∶ 5 000 respectively; The inter-assay coefficient of variation of normal antigen and special antigen is 8. 7% and 5. 8% respectively,the intra-assay average coefficient of variation is 11. 9% and 6. 6% respectively; The detection sensitivity is 1∶ 6 400. There is no cross-reactivity with Feline panleukopenia virus ( FPV) and Feline calicivirus virus ( FCV) . The stability test shows the relative deviation is below 25% . Conclusion The ELISA method is good in duplication,stability,specificity,and sensitivity,as a result of which ELISA can be used in detecting the Cat FHV-1 immune body.

Key words: FHV-1, ELISA, cat

中图分类号: