实验动物科学

2009—2013年北京地区实验动物质量抽检结果分析

魏杰,林建伟,付瑞,邢进,王洪,巩薇,李根平,贺争鸣,岳秉飞

2014, 31(02): 1-6.

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摘要:目的　通过对2009－2013年北京地区实验动物微生物、寄生虫、遗传质量抽检结果的回顾和总结，为实验动物的生产、管理和检测提供参考。方法　按照现行国家和地方实验动物检测的相关标准，由北京市实验动物管理办公室依法对北京地区具备资质的实验动物生产单位进行抽样，委托检测机构进行检测，并发布质量报告。依据报告数据，对5年中北京地区不同级别大小鼠、豚鼠、兔、犬、猴、小型猪等实验动物的质量进行分析和评价。结果 5年抽检动物总数和批次逐年递增，批次合格率则有递减趋势。SPF级、清洁级、普通级动物均有不同程度的微生物和寄生虫感染，其中弓形虫感染在5年中均有检出，普通级动物的免疫抗体不达标率持续存在，并且有联合感染及上升趋势。有3个批次近交系小鼠遗传质量检测不合格。结论　实验动物质量监督抽检是确保质量的有效手段，对实验动物行业发展和生命科学及生物医药卫生事业的发展至关重要。

Vill转基因小鼠的制备

殷黎静,杨伟伟,殷筱舒,顾小丽,张艳丽,李高天,郑经纬,吴宝金

2014, 31(02): 7-12.

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摘要:目的　通过制备Vill转基因小鼠研究该基因的功能。方法与结果　首先由RT-PRC方法获得全长约2605bp的Vill基因；经T载体克隆测序验证后，以克隆载体pMD19-T-Vill为模板，设计引物并引入酶切位点，将PRC扩增产物与pEF6/V5-His-LacZ同时进行酶切、连接，构建表达载体pEF6/V5His-Vill；经真核表达验证后，酶切获得含Vill基因的显微注射DNA构件；显微注射390枚受精卵后，在出生存活的77只仔鼠中获得转基因阳性GO代小鼠19只，其中16只能够稳定遗传并建系，转基因阳性小鼠外观未有明显改变。结论　Vill转基因小鼠为该基因的功能研究准备了实验材料。

实验动物绿脓杆菌的检测方法研究

郭辉,王翠娥,彭刚,高雪靖,王雪妹,刘博,车路平,王小珂,卢胜明

2014, 31(02): 13-15.

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摘要:目的　研究和建立实验动物及环境样品绿脓杆菌(Pseudomonas aeruginosa)快速、准确的鉴定方法。方法　分别用VITEK2 Compact全自动分析系统和常规生化方法对绿脓杆菌参考菌株、绿脓杆菌分离株和恶臭假单胞菌分离株进行鉴定试验，并比较不同鉴别培养基的鉴定效果。结果　可以用PIA琼脂培养基/ CFC琼脂培养基和乙酰胺琼脂培养基为鉴定培养基，采用以氧化酶、明胶液化和42℃ 生长试验为主的常规鉴定方法，也可采用VITEK2 Compact全自动微生物分析系统直接鉴定绿脓杆菌或将其用于常规鉴定结果的确认。结论　VITEK2 Compact全自动微生物分析系统适于绿脓杆菌快速、准确的鉴定或用于对常规鉴定结果的确认。

VITEK2 Compact全自动微生物分析系统在啮齿类细菌学检测中的应用

郭辉,王翠娥,彭刚,王雪妹,高雪靖,王祎羲,刘博,巫剑,陈瑱,车路平,王小珂,卢胜明

2014, 31(02): 16-19.

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摘要:目的　探讨VITEK2 Compact全自动微生物分析系统对啮齿类动物病原菌鉴定的准确性，方法　参考实验动物国标微生物学检测方法和美国Charles River实验室啮齿类细菌学检测标准，同时用VITEK2 Compact全自动微生物分析系统和常规生化法对16种参考菌株和148株可疑菌株进行检测，对两种方法鉴定的准确性、检测时间等,进行比较分析。结果　VITEK2 Compact全自动微生物分析系统对啮齿类动物细菌学检测和病原菌的鉴定在准确性、时间和鉴定能力等方面均优于常规的鉴定方法。结论　VITEK2 Compact全自动微生物鉴定系统适用于实验动物病原菌的检测及细菌性疾病的诊断。

实验大鼠和小鼠多种病毒的血清学检测结果分析

王翠娥,陈立超,周倩,张文华,张巧稚,陈瑱,巫剑,纪素坤,车路平,王小珂,卢胜明

2014, 31(02): 20-24.

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摘要:目的　评估近期大鼠和小鼠的病毒感染情况，为我国大、小鼠质量控制和标准化提供参考。方法　应用酶联免疫吸附试验(ELISA)对2012年至2013年国内36家单位送检的小鼠和大鼠血清进行病毒抗体检测，检测出现阳性的样品再用免疫荧光试验(IFA)进行复检。结果　检测小鼠病毒抗体18项，出现阳性结果的有9项，小鼠诺如病毒和小鼠肝炎病毒阳性率最高，分别是42.2％和19.9％，检测大鼠病毒抗体14项，出现阳性结果的有8项，大鼠细小病毒有5项，阳性率最高达13.6％—34.4％。结论　我国大、小鼠病毒监测、净化和控制工作仍需加强。

生物阻抗频谱技术检测Wistar大鼠体液成分和脂肪分布的初步研究

董晓敏,李嘉辉,张伟娇,田雪子,芦玲巧,童学红,郝刚

2014, 31(02): 25-28.

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摘要:目的　探讨应用生物阻抗分析仪测量不同性别Wistar大鼠体液成分和脂肪分布情况。方法　利用生物阻抗分析仪检测Wistar大鼠身体组份，包括体液总量(TBW)、细胞内液(ICF)、细胞外液(ECF)、脂肪量(FM)、除脂肪量(FFM)、体液总量/ 体质量(TBW/BW)、细胞外液量/ 体质量(ECF/BW)、细胞内液量/ 体质量(ICF/ BW)、脂肪量/ 体质量(FM/BW)和除脂肪量/ 体质量(FFM/BW)。雄性组13只，雌性组,13只分别检测各项指标改变，以证明不同性别正常成年Wistar大鼠身体组份构成。结果　不同性别两组间比较，雄性Wistar大鼠体液总量、细胞内外液含量、TBW/BW、ECF/BW、ICF/BW高于雌性Wistar大鼠，P值均小于0.05，差异有显著性。 FM/BW、FFM/BW比较，P值均小于0.05，两组差异有显著性。雌性Wistar大鼠的脂肪含量高于雄性Wistar大鼠。结论　正常雄性成年Wistar大鼠的体液含量高于雌性Wistar大鼠，而雌性Wistar大鼠脂肪百分比高于雄性。

大鼠SNL神经性疼痛模型的建立

任士飞,张林吉,汪鹏旭,彭长凌,胡安康

2014, 31(02): 29-31.

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摘要:目的　建立大鼠L5和L6脊神经结扎(Spinal nerve ligation，SNL)疼痛模型并进行评价，方法　根据大鼠痛阈值测定结果，选择90只符合要求的SD雄性大鼠进行手术操作，术后每隔1d测定大鼠后足的机械痛阈值，比较术前和术后大鼠对疼痛刺激的反应变化。结果　术后大鼠左足的痛阈值逐渐降低，至10d 后趋于稳定，与术前有明显差异(P≤0.01)；右足的痛阈值微有升高，保持在稳定的水平内。结论　本研究建立的大鼠SNL模型机械痛阈变化明显，稳定性好，可靠性高，可以作为大鼠一种神经病理性疼痛的模型。

不同采血方法对Wistar大鼠血常规的影响

刘帅,李军延,陈巍

2014, 31(02): 32-34.

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摘要:目的　探讨不同采血方法对Wistar大鼠血常规测定结果的影响。方法　40只SPF级Wistar大鼠顺序进行断尾采血、眼内眦采血和腹主动脉采血，用光电血细胞分析仪进行检测，3种采血方法的检测结果两两比较，进行配对t 检验。结果　断尾采血白细胞计数最高，其次为眼内眦采血，腹主动脉采血白细胞最低，约为断尾采血的1/3，3种采血途径相互之间差异都极显著(P 0.05)，而雌性大鼠断尾采血和眼内眦采血间差异极显著(P0.05)。血小板计数方面，末梢血(断尾、眼内眦采血)极显著低于腹主动脉(P0.05)。结论　不同采血方法血常规检测结果具有较大统计学差异，应建立各自的背景数据以进行统一比较。

BMSCs对大鼠放射性皮肤损伤的治疗研究

陈强,李志满,吴建军

2014, 31(02): 35-37.

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摘要:目的　探讨通过BMSCs (骨髓间充质干细胞)移植治疗放射性皮肤损伤。方法　将放射性皮肤损伤的模型大鼠随机分为干细胞治疗组、阳性药治疗组和对照组。取BMSCs经体外培养后，加于Ⅲ度放射性皮肤损伤的异体大鼠创面上，以平均愈合时间和平均愈合速度为指标，观察各组动物损伤皮肤的修复情况。结果　干细胞治疗组皮肤修复速度为(32.37±3.16) mm2/d；平均愈合时间为(20.03±3.95) /d，明显高于其他两组。且组织结构完整、瘫痕小。经统计学处理干细胞治疗组与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论　利用同种异体动物干细胞培养物，进行放射性皮肤损伤的治疗有明显的效果，为放射性皮肤损伤的临床治疗提供了一条新途径。

不同MHC-B单倍型SPF鸡对禽白血病的抗性研究

廉传江,周刚,司昌德,文辉强,陈洪岩,韩凌霞

2014, 31(02): 38-43.

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摘要:目的　探索不同MHC-B单倍型SPF鸡对禽白血病(Avian leukosis，AL)的抗性差异，为建立AL抗性和易感鸡系提供实验依据。方法　选择纯合G1、G5、G6鸡系及杂合G8鸡系雏鸡进行人工感染白血病病毒A 亚群(Avian leukosis virus，ALV-A)RAV-1毒株实验，G8系雏鸡(6羽)作为对照。攻毒后对各鸡系的死亡率、病变率、血液中抗体水平以及外周血淋巴细胞的病毒载量等与抗性相关指标进行动态评估与统计学分析，最终确定抗性较强和较弱的鸡系。结果　G5系病变率和死亡率均明显高于其它攻毒鸡系，G1系最低，G6和G8系居中，G1系在攻毒后第5周开始，抗体效价一直高于其它鸡系，而G5系则最低，并且在攻毒后第8周至11周和第15周至18周，G1系的抗体效价显著高于G5系(P<0.05)，G1系的病毒载量在攻毒后第7周至15周，低于其它鸡系，而G5系自攻毒后第9周至13周，极显著高于G1系(P<0.01)。结论　G1系在感染ALV后，死亡率较低，病变轻微，抗体保护力较强，且病毒的增殖较慢，因而其对AL具有较强的抗性，而G5系则相反较为易感。本研究不仅为建立AL抗性较强和较易感的鸡系提供了实验依据，而且对进一步阐明鸡主要组织相容性复合体(Major histocompatablity complex，MHC)多态性与AL抗病性的关系有重要作用。

甜菜夜蛾室内人工饲养技术方法的建立

肖宇宙,安学芳

2014, 31(02): 44-46.

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摘要:随着生物农药的不断发展，许多昆虫也逐步加入到实验动物行列中，甜菜夜蛾在农业及生命科学相关领域的研究中作为科研材料发挥着重要的作用。利用合理的人工配方饲料，通过室内长期的继代饲养繁育，确定了甜菜夜蛾生活史中各个阶段温度、湿度和光照等技术参数，掌握了甜菜夜蛾室内人工饲养管理的关键技术，从而建立了适宜甜菜夜蛾生长发育以及连续传代繁育的环境设施条件和技术方法。目前，甜菜夜蛾已经在室内连续传代超过100代，其产卵率、孵化率、幼虫成活率、化蛹率和蛹质量以及成虫羽化率等都一直处于稳定状态，种群未出现退化现象。

浅谈实验小鼠非病理性脱毛原因

曲平,仇志华

2014, 31(02): 47-48.

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摘要:随着生命科学研究的发展，动物实验中小鼠的使用频率越来越高。实验人员对实验小鼠不明原因的脱毛现象十分困扰，影响实验结果的判断，本文针对小鼠的非病理性脱毛，简述包括自然发生和偶然诱导脱毛的原因，实验人员可根据具体情况作出科学的判断。

饲料硬度对BALB/c裸小鼠生长性能的影响

赵伟健,黎雄才,汪鹏丽,张富发,黄红坤,王刚

2014, 31(02): 49-51.

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摘要:目的　裸小鼠是免疫缺陷动物，饲料硬度对其采食性能及生长影响较大。研究和生产适合裸小鼠采食、硬度适宜并可提高利用率的颗粒饲料，以满足其正常生长。方法　spf 级10 周龄BALB/c 裸鼠240 只，雌雄各半，随机分为实验Ⅰ组、实验Ⅱ组、实验Ⅲ组、实验Ⅳ、实验Ⅴ和实验Ⅵ组。实验Ⅰ－Ⅵ分别给予硬度为83.3N、96.0N、112.7N、132.3N、149.0N和181.3N的颗粒饲料，观察不同饲料硬度对裸鼠体质量增加的效果。结果　各实验组动物生长情况显示，83.3N、96.0N、112.7N等3 个实验组裸小鼠的体质量增加明显;随着饲料，硬度增加,裸小鼠体质量增加量呈下降趋势。结论　饲料硬度控制在108－137N 范围BALB/c裸小鼠生长性能良好，还可提高裸小鼠对饲料的利用率。

6-8月龄健康Beagle 犬血液微量元素测定

李秋波,杨　杰,康纪平,冯晓科

2014, 31(02): 52-53.

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摘要:目的　建立本繁育饲养基地正常Beagle 犬血液中主要微量元素指标正常参考值范围，为医学研究提供参考基础数据。方法　选用普通级健康Beagle 犬60 只(雄性30 只，雌性30 只)，6-8 月龄，体质量6.5—8.5kg，前肢内侧隐静脉采血，使用TC-3010A 型微量元素分析仪及配套试剂，分别测定血液中锌、铁、锰、钙、镁、铅、铜、镉等8种微量元素，将数据进行统计分析。? 结果　分别得出了雌雄Beagle 犬血液中锌、铁、钙、镁、铜、铅六种微量元素指标参考值的均值及标准差，未测定出锰和镉。? 结论　血液中铁、钙、铅指标雌雄间比较差异不显著(p >0.05)，锌、镁和铜指标雌雄间比较差异显著(p<0.05)。

CNAS认可条件下动物实验档案资料的规范化管理

黄小红，黄红坤，黄小琼，饶子亮，钟志勇，唐小江

2014, 31(02): 54-56.

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摘要: 阐述了在中国合格评定国家认可委员会(CNAS)认可条件下，动物实验档案规范化管理的重要性。以笔者所在动物实验室为例，介绍了动物实验档案资料的分类、收集和整理归档程序，以及档案室的规范化管理。

SPF级实验动物在兽用疫苗检定中的应用

刘　钧,翟新验

2014, 31(02): 57-58.

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摘要: SPF级实验动物来源清晰，并且对它们携带的微生物进行严格控制，它们不仅应用在生命科学研究、生物制药等领域，而且在兽用疫苗检定等动物疫病防控中发挥了极其重要的作用。

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