当期目录

2011年 第28卷 第05期    刊出日期：2011-10-31

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研究 论著

固本清肺贴膏对小鼠的免疫调节作用的实验研究

李显华, 杜佳林, 宋达夫, 陈贺, 安然, 郭振武

2011, 28(05):  1-02. 

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目的 研究固本清肺贴膏的免疫调节作用。方法 采用鸡红细胞作免疫原的血清溶血素测定法观察固本清 肺贴膏的体液免疫作用；采用2，4-二硝基氯苯所致小鼠迟发超敏反应试验观察固本清肺贴膏的细胞免疫功能作 用。结果 固本清肺贴膏能促进血清溶血素生成、抑制2，4 -二硝基氯苯所致小鼠迟发超敏反应。结论 固本清 肺贴膏具有免疫调节作用。

30日龄Fmr1基因敲除小鼠的跳台实验观察

2011, 28(05):  3-06. 

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目的 对30日龄的Fmr1基因敲除小鼠的跳台实验进行观察。方法 采用30日龄的KO鼠和WT鼠分别连 续进行2d的跳台实验，根据所获得的数据进行多因素方差分析处理。结果 同周龄KO鼠的潜伏期比WT鼠明 显少(P＜0.05)；而KO鼠的错误次数比WT鼠明显多(P＜0.05)；不同周龄KO鼠或WT鼠的潜伏期、错误次数无 差异(P＞0.05)；第1天KO鼠的潜伏期和错误次数与第2天相比无差异(P＞0.05)；第1天WT鼠的潜伏期和错 误次数与第2天相比有显著差异(P＜0.05)。结论 30日龄Fmr1基因敲除小鼠存在认知功能障碍。

HFJ和MIJ近交系大鼠RAPD特征与比较研究

蔡月花, 李建辉, 郑龙, 刘军须, 王俊霞, 徐增年, 史荣珍, 刘福英

2011, 28(05):  7-11. 

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目的 利用人工合成的PCR随机引物，对本单位培育的HFJ和MIJ近交系大鼠基因组DNA进行扩增，建立 HFJ和MIJ大鼠RAPD扩增特征图谱；选择常用近交系大鼠Lewis和F344作为对照品系，观察HFJ和MIJ大鼠与 对照品系大鼠的RAPD多态性。方法 用酚-氯仿法分别提取4个不同品系大鼠的基因组DNA，从60条随机引 物中筛选能够得到清晰扩增条带的30条引物，对HFJ和MIJ大鼠DNA进行扩增。再从30条引物中随机选择12 条，对4个品系大鼠基因组DNA扩增，并对扩增条带多态性比较分析。结果 30条引物对HFJ和MIJ大鼠DNA 进行扩增，均能获得1～7个较清晰条带，除引物0～08外，条带的分子大小均在200～1 100 bp之间，两品系的引 物0-08扩增结果，均在2 000 bp以上的近原点处扩增出1条清晰的条带。HFJ和MU大鼠品系内个体间和两个品 系之间，扩增的结果均完全一致；用12条随机引物对4个品系大鼠同时扩增，HFJ和MIJ大鼠扩增结果一致，与 Lewis和F344比较，有5个引物出现差异条带。结论 用30条随机引物建立了HFJ和MIJ大鼠RAPD扩增特征性 图谱。由于两品系来源于同一对Wistar封闭群大鼠，虽然遗传特性有显著差异，但是在所选30条引物扩增时，未 发现多态性。两品系与Lewis和F344之间存在多态性条带

大鼠细小病毒KRV株培养方法的建立

刘先菊, 佟巍, 张丽芳, 王艳蓉, 高子琪, 仉惠敏, 荣蓉, 刘云波

2011, 28(05):  12-14. 

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目的 建立用大鼠胶质瘤细胞系( Rat glial cell line C6)替代大鼠原代胚细胞(Primary rat embryo cells，RE)来 培养大鼠细小病毒（Kilham Rat Virus，KRV）的方法。方法 将500 TCID50 KRV培养物接种到75T-C6细胞培养瓶 中（ 细胞接种量为2×105/mL）， 培养过夜， 待细胞病变CPE达++～+++时， 分别用免疫荧光(FITC)鉴定所培 养病毒的特异抗原，用血球凝集试验(HA)测定培养物上清的效价，用DNA测序鉴定所培养的病毒，最后用96孔 板培养法测定KRV的TCID50。结果 KRV在接种到C6细胞的第4～5天， 细胞发生明显的病变，CPE可达++++， FITC鉴定呈KRV抗原阳性， 病毒的培养上清中HA效价为1:5 120，测序结果表明， 该病毒序列与NCBI中KRV序 列同源性达98％ ， 确定为KRV。收获的KRV的TCID50为104.6/0.1 mL。结论 通过对C6细胞系培养KRV方法 的标准化和对所培养病毒的一系列鉴定表明，用大鼠胶质瘤细胞系可以替代大鼠原代胚细胞系进行大鼠细小病毒 的培养。

豚鼠气管平滑肌细胞培养

郝智慧, 赵厚德, 张予阳, 王笑笑

2011, 28(05):  15-18. 

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目的 建立一种简便、快捷的豚鼠气管平滑肌细胞培养方法。方法 幼年豚鼠气管平滑肌组织块原代培养 法。结果 豚鼠气管平滑肌组织块贴壁5～8d后可见细胞自组织块周围长出，细胞长梭形，核位于中央，呈辐射状 向四周生长。两周后细胞长满瓶壁。经α-平滑肌肌动蛋白单克隆抗体(α-smooth muscle actin monoclonal antibody， α-SMA)免疫组化染色鉴定，获得的细胞为平滑肌细胞。结论 豚鼠气管平滑肌组织块培养法可快速获得数量充足 的气管平滑肌细胞。

两种不同基质对体外培养成骨细胞促贴壁生长的影响

李建瑛, 许永华, 张东辉, 许琴, 是文辉, 李佳佳, 马娜, 董翔

2011, 28(05):  19-21. 

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目的 比较多聚赖氨酸(PoLy lysine PLL)与鼠尾胶原对成骨细胞体外培养生长的影响。方法 分别采用 PLL和鼠尾胶原铺制培养皿，然后接种成骨细胞。于24 h、48 h、72 h镜下观察细胞形态及占培养皿面积的百分比。 结果 24 h PLL组，细胞贴壁呈均匀分布状，贴壁面积比为(30.6±12.9)％；鼠尾胶原组细胞贴壁呈团状，贴壁面 积比为(42.5±15.7)％，两者比较差异显著(P ＜0.05)；48 h PLL组，细胞呈均匀分布生长，贴壁面积比为(43.8± 14.5)％；鼠尾胶原组，细胞团相互连接，生长面积比为(61.3±17.1)％，差异极显著(P ＜0.01)；72 h PLL组细胞相 互连接生长面积比为(56.3±15.4)％；鼠尾胶原组，细胞连成片， 生长面积比为(94.4±14.1)％，两者比较差异极 显著(P＜0.01)。结论 对体外培养成骨细胞鼠尾胶原促贴壁生长比PLL更为适宜。

心肌肽素在小型猪急性心肌缺血再灌注中的作用

唐跃, 钱鑫, 吴爱丽, 田毅, 袁卫民, 彭鹏, 张宝杰, 孙静, 阮英茆

2011, 28(05):  22-25. 

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目的 利用小型猪急性心肌缺血再灌注的模型模拟临床急性心肌梗死患者内科再灌注治疗过程，探讨心肌 肽素在小型猪急性心肌缺血再灌注中的保护作用及可能的作用机制。方法 12只小型猪分成单纯损伤组和治疗 组，每组6只。X线下用球囊阻断冠状动脉左前降支血流造成心肌缺血；90 min后退出球囊，血流再通造成再灌注 损伤。在心肌缺血60 min后，经静脉给予治疗组动物心肌肽素、单纯损伤组动物0.9％ NaCl水溶液干预。分别在 术前、用药结束和用药后24 h进行血清酶学及超声心动检查。用药24 h后，取出心脏进行TC染色并测量梗死面 积，切片行病理学检查、评分和原位凋亡检测。结果 两组各有5只动物存活至实验终点，治疗组乳酸脱氢酶、肌 酸激酶和肌酸激酶MB同工酶水平与单纯损伤组比较差异无统计学意义(P＞0.05)。治疗组用药后24 h左心室 舒张末容积较单纯损伤组增高，差异有统计学意义(P＜0.05)；两组的心肌梗死面积和损伤评分差异无统计学意 义(P＞0.05)，治疗组的梗死区细胞凋亡较单纯损伤组明显减少(P＜0.05)。结论 用小型猪急性心肌缺血再灌 注模型模拟急性心梗患者内科再灌注治疗，静脉输注心肌肽素可通过减少梗死区细胞凋亡保护心肌，但对于大面 积、严重心梗患者，短时间、单独使用心肌肽素不能明显减小梗死面积和改善心功能。

顺铂致小型猪急性肾衰模型

董小君, 丁斗, 吴曙光, 钱宁

2011, 28(05):  26-28. 

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目的 建立顺铂诱导的贵州小型猪急性肾功能衰竭模型。方法 将贵州小型猪随机分为对照组、模型组。以4 mg/kg顺铂一次性腹腔注射，膀胱插管收集尿液，动态观察给顺铂前后第0、1、3、6、24、48、96 h 时段小型猪的尿量，测尿中肌酐及尿素氮浓度，计算各时段肌酐和尿素氮的排出量。结果 与对照组比较，模型组尿量和尿中肌酐、尿素氮的排出量显著减少。结论 顺铂4mg/ kg能复制出典型的贵州小型猪急性肾功能衰竭模型。 

设施 管理

普通级实验家兔的质量现状和动物实验机构相应的管理方式探讨

范文平, 贺争鸣

2011, 28(05):  29-34. 

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动物实验机构是实验动物产业链上重要的一环，动物实验机构从业人员是实验动物领域中对动物使用情况 最熟悉的一群人，对实验动物质量最为敏感（因为了解实验动物，敏感程度甚至超过实验人员）。从观察动物实验 机构的角度阐述我国普通级实验家兔的质量现状，分析造成该现状的具体原因，并提出一些保证动物实验质量的 具体管理措施。

浅析我国实验动物相关机构的认可工作概况及改进建议

陶雨风, 刘忠华, 毕玉春, 唐丹舟, 藏捷昕

2011, 28(05):  35-40. 

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在比较国内外实验动物的发展趋势、实验动物管理和认可评价状况的基础上，分析和阐述了我国实验动物相 关机构的管理和认可工作概况，提出了我国实验动物工作面临认可准则与国际不同、认可依据标准不健全、相关实 验动物法规条例要求未纳入认可要求和对实验动物福利重视不够等问题，并有针对性地提出改进建议。

SPF级动物实验室改造初探

郝智慧, 梁建坤, 孔丽娟

2011, 28(05):  41-42. 

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目的 根据实验动物环境及设施国家标准( GB 14925-2001)的规定，建立符合我校实际情况的SPF级大、小 鼠实验设施。方法 在原有土建的基础上，利用普通级大、小鼠饲养室的空调净化系统，室内进行必要的装修和改 造，饲养室内安装IVC、净化工作台及配套设备，使动物饲养和实验全过程达到SPF级。结果 改造后的SPF级实 验室的环境设施各项指标均符合GB 14925-2001的要求，已成功饲养SPF级SD和Wister大鼠，远交系小鼠(KM和 ICR)，近交系小鼠（C57BL/6转基因鼠、BALB/C、BALB/e-nu裸鼠）共20批次。动物的生长健康状况良好，成活率 接近100％。结论 这种在初、中效过滤环境下的IVC配置，大大节省了运行的电费和维持费用，便于管理，非常适 合于以动物实验为主的实验动物使用单位。

青海省实验动物现状及发展构想

范微

2011, 28(05):  43-47. 

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通过对青海省实验动物工作现状的调查分析，阐述了存在的问题，并结合实验动物发展的实际需求，提出了 青海省实验动物资源共享平台建设的思路和对策。

关于实验动物从业人员岗位培训的几点建议

李志满, 柳怀玉, 洪花佟, 晓华田之宁

2011, 28(05):  48-50. 

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生命科学的快速发展对实验动物从业人员的素质提出了更高的要求，为此建议实验动物学岗位培训应根据 管理、实验和饲养岗位的不同，按各自的需要分类培训，并组织、编写实验动物学岗位系列培训教材，在培训过程中 充分利用网络的实验动物教学资源，注重多媒体演示教材的制作与利用，充分发挥远程教育在实验动物岗位培训 中的作用。

实验动物电子商务平台建设之构想

李志满, 李国婧, 张晓红, 董玉杰, 刘闯

2011, 28(05):  51-53. 

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摘要：根据电子商务可以为企业、商家、客户提供全新、方便、快捷、有效的贸易和商品交易活动形式等特点，结合实 验动物的应用特性及国内实验动物供需渠道不畅的现状，阐明建设实验动物电子商务平台的构想和方案。指出电 子商务的应用将创新实验动物的交易模式，消除传统的实验动物供销活动中信息传递与交流的时空障碍，降低交 易成本，提高实验动物资源利用率，可解决实验动物资源的共享问题，为我国的医药科学科技创新提供有利的条件 支撑和技术保障。

配套工程在屏障环境设施建设中的重要性

郎雪楠, 宗阿南

2011, 28(05):  54-55. 

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结合中国医科大学实验动物部屏障系统配套设施建设的实际，从技术指标监控和设施建设的合理性两方面 进行探讨，分析屏障系统配套设施在建设及建后使用维护过程中面临的问题。探讨节能、环保理念应用于屏障环 境设施建设中的可行性等问题。

屏障系统实验动物环境设施应用绿色能源的设想

杨义, 赵文, 宗阿南

2011, 28(05):  56-57. 

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以生命科学研究为重点的高等院校及科研单位，实验动物环境设施建设规模大、水平高，不少设施已超过2 ×104m²。在实验动物环境设施建设中应用绿色能源是今后发展的方向。利用净化空气单向流气流方式代替传统 的乱流气流方式配备IVC笼具的做法可以减少能源消耗；利用蓄积雨水在空调机组冷热交换等非生产用水时使用 可以减少淡水消耗量；利用风塔为屏障系统实验动物环境设施非净化区送风降温可以节约大量能源。

关于实验动物屏障环境设施单向流的研究

宗阿南, 王光, 王丽清, 赵文, 杨义, 朗雪楠

2011, 28(05):  58-59. 

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就单向流气流分布特性、单向流的换气次数及气流速度、单向流的不均匀度及流线的平行度等3个方面进行 了研究，剖析了单向流的关键三要素。提出以减少或避免涡流，减少室内菌、尘扩散，有利于污染物被迅速排除为 目的，认为实验动物屏障环境净化空气应选择采用单向流流型。

动物实验室管理过程中经常遇到的一些问题及解决方案

刘巍, 刘福生, 邹岩柏, 赵明海, 李萌, 张潇, 范文平

2011, 28(05):  60-63. 

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动物实验室的平稳运行涉及到人员、设施设备、消毒灭菌、实验期动物等方面的管理。最近10多年来，我国 实验动物学研究和食品药品检定工作的快速发展，对实验动物和动物实验管理提出更高的要求，也是对实验动物 从业者新的挑战。动物实验设施的管理如何满足科研和检定工作要求，是我们一直探索和追求的目标。处理随时 出现的各种问题是实验动物设施日常管理的一部分，及时发现问题，分析问题，通过硬件的改良和管理制度的创 新，逐步优化和完善动物实验管理系统，提高动物实验的服务水平和能力。结合我单位具体情况，针对动物实验室 日常管理过程中出现的一些普遍性问题进行分析并探索解决办法，和广大科学实验工作者以及实验动物同行进行 交流和探讨。

加强和完善质检机构建设，促进区域实验动物质量提高

王光, 赵文, 宗阿南

2011, 28(05):  64. 

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技术 方法

WHPI经腹腔注射和静脉注射对小鼠的急性毒性研究

许迪, 叶明霞, 熊美云, 孔利佳

2011, 28(05):  66. 

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目的 考察WHPI经腹腔注射和静脉注射对小鼠的急性毒性作用。方法 按中药新药毒理学研究指南的要 求与方法，用SPF级昆明小鼠以腹腔注射、尾静脉注射两种给药途径进行了WHPI的急性毒性试验，用Bliss法计 算其半数致死量( Lethal Dose 50，LD50)。结果 受试物腹腔注射给药对昆明小鼠的LD50为30.08 mg/kg;尾静脉注 射给药对昆明小鼠的LD50为71.45 mg/kg。结论 WHPI腹腔注射对昆明小鼠的毒性比静脉注射的毒性高。这可 能是WHPI经肝代谢后的产物毒性比静脉注射时高，提示临床上宜采用静脉注射途径。  

Beagle犬脑脊液(CSF)多次采集手术模型的建立

张升, 辛艳飞, 顾利强, 宣尧仙

2011, 28(05):  69. 

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目的 通过建立一种新的手术模型，实现对脑脊液(CSF)的多次采集。方法 研究Beagle犬头颅结构，定位 手术钻孔，手术穿刺、埋管采集脑脊液。结果 动物手术存活率为80％，模型成功率为60％。结论 新模型设计 合理，有利于多次采集，此方法可成为Beagle犬脑脊液采集新手段。

经验 交流

一种家兔饲养笼具的改进

纪莲, 马铁, 孙坚

2011, 28(05):  72. 

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目的 设计塑料垫布法，比较塑料垫布法与其它家兔饲养方法的优劣。方法 改进冲洗式笼具后，同时用塑 料垫布法、冲洗式法、干养式法饲养家兔，测定不同方法家兔饲养室的湿度，并比较三种笼具工作方式的特征。结 果 1）塑料垫布法与冲洗式法相比，可降低饲养室湿度17％;2）三种方法用于家兔的饲养效果没有差异；3）塑料 垫布法与干养式法相比可减轻劳动量89％ 以上。结论 塑料垫布法有其独有的优势，既降低了冲洗式法的室内湿 度，又减轻了干养式法的工作量，既能发挥干湿法的优点，又互补了两者的缺点。