小鼠微小病毒( MVM) 荧光定量PCR 检测方法的建立及初步应用

实验动物科学 ›› 2015, Vol. 32 ›› Issue (05): 18-21.

小鼠微小病毒( MVM) 荧光定量PCR 检测方法的建立及初步应用

( 中国食品药品检定研究院实验动物资源研究所，北京100050)

出版日期:2015-10-31 发布日期:2015-10-31
基金资助:
<p>基金项目: 普通级封闭群裸鼹鼠种群的建立及耐低氧机制的初步研究( No． 2015BAI09B02)</p>

Establishment and Preliminary Application of the Real-time PCR for Detecting Minute Virus of Mice ( MVM)

Online:2015-10-31 Published:2015-10-31

摘要/Abstract

摘要： 摘要: 目的建立小鼠微小病毒( MVM) 荧光定量PCR 方法，并初步应用于实验小鼠中。方法根据NCBI 上发表的MVM( NC_001510) 基因组序列，设计引物和探针，建立MVM 荧光定量PCR 方法。考察引物探针的最佳线形范围，特异性及灵敏度，并使用该方法对178 份清洁级小鼠粪便DNA 样本进行检测。结果MVM 荧光定量PCR 方法最佳线性范围为109 ～ 104 拷贝/μL，标准曲线的线性关系良好，R2 值可达0. 99，灵敏度为101 拷贝/μL，特异性强，与大鼠细小病毒H-1 株和KRV 株、猪细小病毒均无交叉反应。应用荧光定量PCR 方法对178 份小鼠粪便DNA进行检测，结果均为阴性。结论建立的MVM 荧光定量PCR 方法具有特异、灵敏的特点，为MVM 的流行病学调查、检测提供了有效的技术支持。

关键词: <, p>, 小鼠微小病毒, 荧光定量PCR, 小鼠<, /p>

Abstract: Abstract: Objective To establish and preliminarily apply the real-time PCR for detecting minute virus of mice ( MVM) ． Method According to the genome sequences of MVM( NC_001510) from NCBI，one pairs of primers and probes were designed． The linearity，specificity，and sensitivity of the method were investigated． 178 mouse faeces DNA were detected by the real-time PCR． Result The real-time PCR for detecting MVM showed a linear range of 1x109 ～ 1x104copies /μL，high specificity，which showed no cross-reaction with rat parvovirus H1，KRV and porcine parvovirus． The sensitivity of the real-time PCR was 101copies /μL． The real-time PCR detecting results of 178 clean grade mouse faeces were that all of them were MVM negative． Conclusion The real-time PCR method is good in specificity，sensitivity，which can make a powerful technical support for MVM epidemiological investigation and detection．

Key words: <p>minute virus of mice ( MVM), real-time PCR, mouse</p>

中图分类号:

Q939.47

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