实验用小型猪胎儿成纤维细胞和骨髓间充质细胞为核供体生产转基因克隆胚胎

实验动物科学

实验用小型猪胎儿成纤维细胞和骨髓间充质细胞为核供体生产转基因克隆胚胎

潘登科;潘求真;牟玉莲;万荣;刘吉;郑茂恩;刘晓;张莉;冯书堂;

中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,中国农业大学动物科技学院,中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,中国农业大学动物科技学院,中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,中国农业科学院北京畜牧兽医研究所北京100094,北京100094,北京100094,北京100094,北京100094,北京100094,云南农业大学动物科技学院,昆明650201,北京100094,中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所,兰州730050,北京100094,北京100094

收稿日期:2007-12-28 修回日期:2007-12-28 出版日期:2007-12-28 发布日期:2007-12-28

Production of Transgenic Cloned Embryos by Nuclear Transfer Using FetalFibroblast and Marrow Stromal Cells of Laboratory Miniature Pig

PAN Deng-ke~1,PAN Qiu-zhen~2,MU Yu-Lian~1,WAN Rong~2,LIU Ji~1,ZHENG Mao-en~

(1,3),LIU Xiao~(1,4),ZHANG Li~1,FENG Shu-tang~(1*)(1.Institute of Animal Science and Veterinary,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Beijing 100094)(2.College of Animal Science and Technology,China Agricultural University,Beijing 100094)(3.College of Animal Science and Technology,Yunnan Agricultural University,Kunming 650201)(4.Institute of Farming and Veterinary Medicine,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Lanzhou 730050

Received:2007-12-28 Revised:2007-12-28 Online:2007-12-28 Published:2007-12-28

摘要/Abstract

摘要： 目的比较不同类型体细胞对生产转基因克隆胚胎效率的影响。方法利用脂质体介导的方法将质粒pEGFP-N1转染到五指山小型猪胎儿成纤维细胞和骨髓间充质细胞,经过G418筛选后均获得了阳性细胞株。然后分别以两种类型转基因细胞以及未转基因细胞为核供体进行体细胞核移植,比较不同类型供体细胞克隆胚胎的囊胚发育率。结果胎儿成纤维细胞和骨髓间充质细胞克隆胚的囊胚发育率差异不显著(P>0.05,8.3%vs.7.1%);转基因胎儿成纤维细胞(9.6%)和转基因骨髓间充质细胞(9.9%)克隆胚胎的囊胚发育率差异不显著(P>0.05,9.6%vs.9.9%);每一种类型供体细胞转基因与否对克隆胚的囊胚发育率无影响(P>0.05)。结论通过体细胞核移植技术,小型猪骨髓间充质细胞与胎儿成纤维细胞均可有效地生产转基因囊胚。

关键词: 小型猪, 骨髓间充质细胞, 体细胞核移植, 绿色荧光蛋白, 转基因克隆胚胎

Abstract: Objective The efficiency of production transgenic cloned embryos using the different types of somatic cells was examined.Methods Fetal fibroblast cells(FF) and marrow stromal cells(MSCs) of Wuzhishan pig(WZSP) were transfected with pEGFP-N1 plasmid DNA by lipofectin-mediated way.Clones were obtained by G418 selection.MSCs,FF,and GFP-MSCs,GFP-FF were used as nuclear donors for somatic cell nuclear transfer(SCNT).Results There were no significant differences in the development rates to the blastocyst stage of SCNT embryos from nontransgenic and transgenic cells between MSCs and FF(7.1% vs.8.3%,P>0.05;9.9% vs.9.6%,P>0.05).Blastocyst rate of reconstructed embryos with GFP transfected MSCs or FF in comparison to those derived from non-transgenic somatic cells did not decreased(P>0.05).Conclusion It was suggested that porcine transgenic blastocysts could be efficiently produced by SCNT using transgenic MSCs as well as FF.

Key words: Miniature pig, Marrow stromal cells, Somatic cell nuclear transfer

潘登科;潘求真;牟玉莲;万荣;刘吉;郑茂恩;刘晓;张莉;冯书堂;. 实验用小型猪胎儿成纤维细胞和骨髓间充质细胞为核供体生产转基因克隆胚胎[J]. 实验动物科学.

PAN Deng-ke~1,PAN Qiu-zhen~2,MU Yu-Lian~1,WAN Rong~2,LIU Ji~1,ZHENG Mao-en~. Production of Transgenic Cloned Embryos by Nuclear Transfer Using FetalFibroblast and Marrow Stromal Cells of Laboratory Miniature Pig[J]. laboratory animal science.

[1]	赵玉琼, 戴鑫, 陈华. 巴马小型猪胰腺解剖学特点[J]. 实验动物科学, 2021, 38(3): 66-.
[2]	贾云晓, 赵玉琼, 牛苗苗, 袁记方, 相磊, 戴鑫, 陈华. HbA1c 不适于小型猪血糖控制状态的监控[J]. 实验动物科学, 2020, 37(06): 17-.
[3]	赵玉琼，陈华. 小型猪糖尿病模型研究进展[J]. 实验动物科学, 2020, 37(04): 78-.
[4]	谢美娜，李晶，杨利霞，王云泽，樊立涛，杨国峰，徐兰举. 脱细胞生物敷料对烫伤创面愈合的影响[J]. 实验动物科学, 2020, 37(02): 19-.
[5]	刘天文，李剑明，王帆，李军，高作潮，赵梦，张杰民. 性别对小型猪基础麻醉效果的影响[J]. 实验动物科学, 2020, 37(01): 66-.
[6]	相磊，陈华，赵德明. 高糖高脂饲料诱导的小型猪肥胖模型[J]. 实验动物科学, 2019, 36(04): 1-.
[7]	冯书堂，牟玉莲，王太平，庄爱萍. 小型猪近交系鉴定研究进展[J]. 实验动物科学, 2019, 36(02): 78-.
[8]	邱波，王艳，郑晓霞，张海静，张鑫，王凤乾，胡建廷 . 深Ⅱ度烫伤后小型猪皮肤愈合的组织病理学研究[J]. 实验动物科学, 2019, 36(01): 5-.
[9]	卫旭东, 党源, 温福利, 薛来恩, 张诗兰, 郑和平. 腺病毒介导BMP-4转染兔SMSCs软骨分化研究[J]. 实验动物科学, 2018, 35(03): 34-.
[10]	相磊，刘亚千，赵玉琼，牛苗苗，袁记方，贾云晓，陈华. 全身麻醉对巴马小型猪空腹血糖测定的影响[J]. 实验动物科学, 2018, 35(03): 70-.
[11]	刘科，施赫赫，谭巧燕，陈淦，唐小江. STR扫描技术对融水小型猪群体遗传结构的分析*[J]. 实验动物科学, 2018, 35(02): 16-.
[12]	赵玉琼, 杨述林, 钱宁, 郭亚芬, 吴曙光, 辛磊, 陈华. 贵州小型猪和广西巴马小型猪部分血液生化指标筛查[J]. 实验动物科学, 2017, 34(04): 1-3.
[13]	魏杰, 王洪, 巩薇, 李晓波, 付瑞, 王吉, 邢进, 冯育芳, 王淑菁, 高正琴, 岳秉飞. 北京地区两个封闭群巴马小型猪的群体遗传质量分析[J]. 实验动物科学, 2017, 34(02): 26-30.
[14]	焦昆, 朱力鸣, 卢静. 氯胺酮和速眠新Ⅱ复合麻药剂量对巴马小型猪的麻醉效果及影响[J]. 实验动物科学, 2016, 33(05): 57-60.
[15]	朱文娟, 辛磊磊, 李晨晓, 安翠平, 张凯艺, 杨述林, 李奎. 小型猪2 型糖尿病模型研究进展[J]. 实验动物科学, 2016, 33(03): 61-65.