一种替代家兔热原试验的新方法初探——检测人全血中的TNF-α

实验动物科学

一种替代家兔热原试验的新方法初探——检测人全血中的TNF-α

黄清泉,李冠民,奚廷斐,贺争鸣

中国药品生物制品检定所,中国药品生物制品检定所,中国药品生物制品检定所,中国药品生物制品检定所北京100050 ,北京100050 ,北京100050 ,北京100050

收稿日期:2003-09-20 修回日期:2003-09-20 出版日期:2003-09-20 发布日期:2003-09-20

A Novel Test for the Detection of Pyrogen in order to Replace the Rabbit Pyrogen Test by Determination of the Release of TNF-α from Human Whole Blood

HUANG Qing quan,LI Guan min,XI Ting fei,HE Zheng ming

(National Institute for the Control of Pharmaceutical and Biological Products,Beijing 100050,China

Received:2003-09-20 Revised:2003-09-20 Online:2003-09-20 Published:2003-09-20

摘要/Abstract

摘要： 为了寻找一种替代家兔热原试验的方法 ,最近我们对用人全血检测热原的可行性进行了初步探索。其原理是 :将细菌内毒素标准品与从健康自愿者提供的少量肝素抗凝全血共同孵育 6h后 ,用ELISA双抗夹心法测定其产生的内源性热原 (TNF -α)。试验结果表明 :TNF -α的量与内毒素的量在一定范围 (0 0 6EU mL～ 2 0 0EU mL)内有很好的相关性 ,不同来源的内毒素试验结果也是如此。说明该方法作为替代家兔热原检查的新方法有一定的可行性。

关键词: 热原, 家兔热原试验, 细胞因子, 替代, TNF-α

Abstract: The aim of this study was to develop an in vitro test for the detection of pyrogen in order to replace the rabbit pyrogen test. Recently the human whole blood was assessed for tumor necross factor (TNF) α for the probability of the novel test. When human whole blood is incubated in the presence of reference standard endotoxin, they secrete “endogenous pyrogen" TNF α determined by ELISA after a fixed incubation time (6 hours). These results show that the correlation coefficient is greater than or equal to 0.980 in the range of 0 32EU/ml-200EU/ml between the TNF α and the endotoxin. The same result has got from the other kind endotoxin with equal effect in the LAL/TAL test. Therefore we think this human whole blood pyrogen assay will serve as aternative pyrogen test.

Key words: Pyrogen, Pyrogen test, Cytokine, Human whole blood, TNF α

黄清泉,李冠民,奚廷斐,贺争鸣. 一种替代家兔热原试验的新方法初探——检测人全血中的TNF-α[J]. 实验动物科学.

HUANG Qing quan,LI Guan min,XI Ting fei,HE Zheng ming. A Novel Test for the Detection of Pyrogen in order to Replace the Rabbit Pyrogen Test by Determination of the Release of TNF-α from Human Whole Blood[J]. laboratory animal science.

[1]	李鸿雁，颜克松，马东升，战大伟，孙兆增. 无菌大鼠深二度烫伤感染金黄色葡萄球菌机体炎性反应的研究[J]. 实验动物科学, 2019, 36(06): 9-.
[2]	王兴童，韩凌霞. 兽用疫苗中替代方法的研究进展[J]. 实验动物科学, 2018, 35(01): 67-.
[3]	李丽, 郭玉东, 胡宇驰, 曹春然, 刘洪艳, 左泽平, 高阳. EpiDerm 体外皮肤刺激性试验方法研究[J]. 实验动物科学, 2017, 34(02): 51-53.
[4]	李丽, 郭玉东, 栗景蕊, 胡宇驰, 曹春然. 大鼠经皮电阻试验方法研究[J]. 实验动物科学, 2015, 32(06): 26-28.
[5]	付瑞, 李晓波, 王淑菁, 王吉, 卫礼, 岳秉飞, 贺争鸣. H-1 细小病毒感染大鼠神经胶质瘤细胞C6 机制的初步探讨[J]. 实验动物科学, 2015, 32(05): 22-25.
[6]	乔欣,焦昆,池亚菲,王钜,李胜利. 考夫克和卡贝治疗分泌性中耳炎的机制研究[J]. 实验动物科学, 2015, 32(04): 6-9.
[7]	李超,周向梅,赵德明,杨利峰. 致力于减少动物试验的露诗( Lush) 奖[J]. 实验动物科学, 2015, 32(02): 60-62.
[8]	冯书堂, 吴添文, 何微, 刘岚. 皮肤移植排斥反应的研究进展*[J]. 实验动物科学, 2013, 30(03): 54-59.
[9]	洪丽玲, 周庆云. 皮肤致敏反应体外替代方法的研究现状[J]. 实验动物科学, 2012, 29(06): 60-63.
[10]	邹移海;陈嘉;谢玲玲;黄海定;王萧;. 丹酚酸B对骨髓间充质干细胞相关因子表达的影响[J]. 实验动物科学, 2009, 26(05): 13-16.
[11]	卢胜明;赵德明;. 中国实验动物产业化发展现状及方向研究[J]. 实验动物科学, 2008, 25(04): 33-44.
[12]	王红梅;马玲;穆效群;. Hela细胞MTT试验作为眼刺激替代试验的研究[J]. 实验动物科学, 2007, 24(02): 65-68.
[13]	徐文瑜;任珺;杜颖;贺争鸣;邢瑞昌;. 家兔性别与体温变化对热原检测结果的影响[J]. 实验动物科学, 2006, 23(03): 22-25.
[14]	李华;赵建文;银欢;王捷;王禄增;. 兔热源工作台的技术指标[J]. 实验动物科学, 2006, 23(02): 65-65.
[15]	贺争鸣,邢瑞昌. 浅谈我国开展动物实验替代方法研究的保障措施[J]. 实验动物科学, 2005, 22(02): 61-64.