一种替代家兔热原试验的新方法初探——检测THP-1细胞系释放的TNF-α

实验动物科学

一种替代家兔热原试验的新方法初探——检测THP-1细胞系释放的TNF-α

黄清泉,李冠民,奚廷斐,贺争鸣

中国药品生物制品检定所,中国药品生物制品检定所,中国药品生物制品检定所,中国药品生物制品检定所北京100050 ,北京100050 ,北京100050 ,北京100050

收稿日期:2003-09-20 修回日期:2003-09-20 出版日期:2003-09-20 发布日期:2003-09-20

Another Novel Test for the Detection of Pyrogen in Order to Replace the Rabbit Pyrogen Test by Determination of the Release of TNF-α from THP-1 Lines

HUANG Qing quan,LI Guan min,XI Ting fei,HE Zheng ming

(National Institute for the Control of Pharmaceutical and Biological Products,Beijing 100050,China

Received:2003-09-20 Revised:2003-09-20 Online:2003-09-20 Published:2003-09-20

摘要/Abstract

摘要： 为了寻找一种替代家兔热原试验的方法 ,最近我们对用THP 1细胞系检测热原的可行性进行了初步探索。其原理是 :将细菌内毒素标准品刺激THP 1细胞 6h后 ,用ELISA双抗夹心法测定其释放的内源性热原 (TNF α)。试验结果表明 :TNF α的量与内毒素的量在一定范围 (0 .32EU mL— 2 0 0EU mL)内有很好的相关性 ,两种不同来源的内毒素得到的结果相似。说明该方法作为替代家兔热原检查的新方法有一定的可行性

关键词: 热原, 家兔热原试验, 细胞因子, THP1, TNFα

Abstract: The aim of this study was to development an in vitro test for the detection of pyrogen in order to replace the rabbit pyrogen test. Recently the THP 1 monocytic cells was assessed for tumor necross factor (TNF) α for the probability of the novel test. When THP 1lines is incubated in the presence of reference standard endotoxin, they secrete “endogenous pyrogen" TNF α determined by ELISA after a fixed incubation time (6 hours). These results show that the correlation coefficient is greater than or equal to 0.980 in the range of 0.32EU/mL 200EU/mL between the TNF α and the endotoxin. The same result has got from the other kind endotoxin with equal effect in the LAL/TAL test. Therefore we think this novel test will serve as an aternative pyrogen test.

Key words: Pyrogen, Pyrogen test, Cytokine, THP 1, TNF α

黄清泉,李冠民,奚廷斐,贺争鸣. 一种替代家兔热原试验的新方法初探——检测THP-1细胞系释放的TNF-α[J]. 实验动物科学.

HUANG Qing quan,LI Guan min,XI Ting fei,HE Zheng ming. Another Novel Test for the Detection of Pyrogen in Order to Replace the Rabbit Pyrogen Test by Determination of the Release of TNF-α from THP-1 Lines[J]. laboratory animal science.

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