当期目录

2022年 第39卷 第4期    刊出日期：2022-08-28

上一期   

论著

低海拔人工饲养条件下喜马拉雅旱獭血液生理生化及 性激素指标的测定与分析

聂金秋, 朱庆峰, 颜彬, 朱彬, 周顺长, 杨东亮, 王远志, 王宝菊

2022, 39(4):  1-6.  DOI: 10. 3969 / j. issn. 1006-6179. 2022. 04. 001

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目的 旨在为喜马拉雅旱獭低海拔人工饲养条件下的健康管理、配种繁育及实验动物标准化等研究提供参考依据。 方法 在新疆维吾尔自治区进行低海拔适应性人工饲养条件下测定喜马拉雅旱獭的血液生理生化及性激素指标。 结果 雌、雄旱獭间血常规各项指标的差异无统计学意义,3 岁龄及以上旱獭的血红蛋白( Hb) 水平明显高于 3 岁龄以下旱獭(P<0. 05) ,而 3 岁龄以下旱獭的血小板( PLT)水平明显高于 3 岁龄及以上旱獭( P<0. 05) ,人工饲养 1 年以下旱獭的血小板( PLT)水平明显高于人工饲养 1 年以上旱獭(P<0. 001) 。 雌性旱獭的血清总胆红素( TB)及 直 接 胆 红 素 ( DB) 水 平 明 显 高 于 雄 性 ( P < 0. 05) , 而 雄 性 的 血 清 尿 素 氮 ( BUN) 水 平 明 显 高 于 雌 性(P<0. 05) ,3 岁龄及以上旱獭的血 清 总 蛋 白 ( TP ) 、白 蛋 白 ( AL) 及 肌 酐 ( CREA) 水 平 明 显 高 于 3 岁 龄 以 下 旱 獭(P<0. 05) ,不同饲养时间组间血生化各检测指标的差异均无统计学意义。 3 岁龄及以上雌性旱獭的血清雌二醇水平明显高于 3 岁龄以下雌性(P<0. 05) ,3 岁龄及以上雌性旱獭的血清雌二醇水平明显高于同龄雄性( P< 0. 001) ,相同饲养时间雌性旱獭的血清雌二醇水平均高于雄性(P<0. 05) 。 结论 高海拔生长的新疆喜马拉雅旱獭能很好地适应低海拔地区的人工饲养,本研究为其在低海拔地区用于科学研究提供了参考价值。。


槐芩软膏介导 NF-kB 信号通路对小鼠痔疮模型肛缘水肿及 创面愈合的影响

赵俊卿, 范荣荣, 窦龙涛, 房磊, 李少荣, 彭冀, 王茜

2022, 39(4):  7-12.  DOI: 10. 3969 / j. issn. 1006-6179. 2022. 04. 002

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目的 探讨槐芩软膏对小鼠痔疮模型肛缘水肿及创面愈合的疗效及机制。 方法 将 30 只 ICR 小鼠通过肛周局部注射乙酸法建立痔术后创面损伤模型,然后将小鼠随机分成对照组和治疗组。 造模第 2 天对照组小鼠给予低浓度高锰酸钾溶液清洗,治疗组小鼠给予低浓度高锰酸钾清洗复合涂抹槐芩软膏。 治疗 7 d 后,对小鼠肛缘肿胀程度及愈合面积进行统计;采用 ELISA 和 qPCR 法检测小鼠血浆或水肿组织中超敏 C 反应蛋白( hs-CRP) 、白细胞介素 6( IL-6) 、肿瘤坏死因子 α( TNF-α) 、血红蛋白水平;采用 HE 染色和免疫荧光检测肛缘组织中病理变化及炎性细胞浸润情况;采用 Western blot 检测水肿组织中核因子 kB 抑制蛋白 α( IkBα) 磷酸化水平及核内核因子 kB( NFkB) p65 含量。 结果 与对照组小鼠相比,治疗组小鼠肛缘肿胀评分及创面面积显著改善,血浆或肛缘组织 hsCRP、IL-6、TNF-α、血红蛋白水平显著下降(P<0. 05) 。 HE 染色和免疫荧光显示治疗组小鼠肛缘组织中炎性细胞浸润相比于对照组显著减少(P<0. 05) 。 Western blot 显示治疗组组织 IkBα 磷酸化及细胞核内 NF-kB p65 水平相比对照组显著降低(P<0. 05) 。 结论 槐芩软膏治疗改善小鼠痔疮模型肛缘组织炎性反应及水肿,促进创面愈合,其分子机制可能与 NF-kB 信号通路有关。


激素模拟妊娠后激素停撤大鼠产后抑郁模型的改进与评价

王晓菲, 严语, 赵展, 何沐, 王璟萱, 武军驻, 杨怀洁

2022, 39(4):  13-17.  DOI: 10. 3969 / j. issn. 1006-6179. 2022. 04. 003

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目的 改进激素模拟妊娠后激素停撤大鼠产后抑郁模型的建立方法,并对模型进行评价。 方法 25 只 SD雌性大鼠随机分为正常组(10 只)和实验组(15 只) 。 实验组去势手术后筛选合格动物,前 16 d 每日皮下注射雌二醇 2. 5 μg,黄体酮 4 mg,后 7 d 每日注射雌二醇注射液 50 μg。 正常组不做手术处理,23 d 持续注射等量橄榄油。建模后第 1 周通过旷场实验、强迫游泳实验进行大鼠行为学检测。 结果 与正常组相比,实验组旷场实验水平运动距离减短,强迫游泳实验不动时间延长,差异均有统计学意义( P< 0. 05) 。 结论 通过改进建模方法,成功建立稳定的产后抑郁大鼠模型,并探寻到可靠的评价方法。





兴奋性在导盲犬早期筛选中的预判效果分析

董建一, 李昶仪, 张敏, 白静, 王福金, 周子娟, 王靖宇

2022, 39(4):  18-22.  DOI: 10. 3969 / j. issn. 1006-6179. 2022. 04. 004

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目的 通过对待训犬气质测试中与兴奋性相关的 PLAY、追逐测试、被动测试、距离测试 4 个项目进行评估,分析兴奋性在导盲犬早期筛选中的预判效果。 方法 以中国导盲犬大连培训基地提供的 92 只拉布拉多犬( 导盲犬 59 只,淘汰犬 33 只)作为研究对像,分别对导盲犬和淘汰犬在气质测试与兴奋性相关的测试项目中的行为表现进行分析,同时对不同性别的犬、同一性别的导盲犬和淘汰犬在行为学测试中的表现进行差异分析。 结果 导盲犬( n = 59)与兴奋性相关的行为学测试的评分显著高于淘汰犬( n = 33) ,结果具有统计学意义( t = 2. 31,P< 0. 05) ,与兴奋性相关的 PLAY、追逐测试、被动测试、距离测试 4 个测试项目中导盲犬被动测试评分显著高于淘汰犬( t =2. 05,P<0. 05) 。 雄性犬( n = 54)和雌性犬( n = 28) 与兴奋性相关的行为学测试的评分无显著差异( t = 0. 03,P >0. 05) ,4 个测试项目中雄性犬在被动测试中的评分显著高于雌性犬( t = 2. 56,P< 0. 05) 。 4 个行为学测试中,雌性导盲犬( n = 24)的距离游戏测试评分显著高于淘汰犬( n = 14) ( t = 2. 20,P<0. 05) ,4 个行为学测试的 9 个变量中导盲犬在走动时间评分( t = 2. 25,P<0. 05) 、探索变量评分( t = 2. 20,P< 0. 05) 较淘汰均显著增多;雄性导盲犬( n =35)和淘汰犬( n = 19)之间分析无显著差异。 结论 与兴奋性相关的 4 个测试项目总体评估对待训犬的筛选具有一定的作用。


IL-6 / JAK2 / STAT3 信号通路对胃癌增殖能力的影响

黄亚林, 牛世伟, 龚红霞, 苏韫, 张晗, 曾元丁, 李菲菲

2022, 39(4):  23-27.  DOI: 10. 3969 / j. issn. 1006-6179. 2022. 04. 005

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目的 探讨 IL-6 / JAK2 / STAT3 信号通路对胃癌增殖的影响。 方法 建立 MFC 胃癌荷瘤小鼠模型,随机分为 模型组、AG490 阻断剂组、Stattic 阻断剂组,每组 12 只,另选 12 只健康小鼠作为空白组。 干预结束后取瘤体组织检 测瘤体重量及计算抑瘤率;ELISA 法检测小鼠血清中 IL-6 含量;免疫组化法检测瘤体组织中 IL-6、JAK2、STAT3、cMyc 和 Cyclin D1 蛋白表达情况;蛋白免疫印迹法检测瘤体组织中 IL-6、JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3、c-Myc 和 Cyclin D1 蛋白表达情 况;RT-qPCR 法 检 测 瘤 体 组 织 中 IL-6、 JAK2、 STAT3、 c-Myc 和 Cyclin D1 mRNA 表 达 情 况。 结果 与空白组比,模型组小鼠血清中 IL-6 含量升高( P< 0. 01) ;与模型组比,AG490 阻断剂组和 Stattic 阻断剂组 小鼠血清中 IL-6 含量,瘤体质量,瘤体组织中 IL-6、p-JAK2、STAT3、p-STAT3、c-Myc 和 Cyclin D1 的蛋白含量,IL-6、 JAK2、STAT3、c-Myc 和 Cyclin D1 mRNA 含量均下降( P< 0. 05,P< 0. 01) 。 结论 阻断 IL-6 / JAK2 / STAT3 信号通路 后,可影响下游靶蛋白的表达,进而抑制胃癌的增殖。

鸽圆环病毒荧光定量 PCR 检测方法的建立及应用

李晓波, 王吉, 王莎莎, 李威, 秦骁, 黄宗文, 岳秉飞, 王淑菁, 付瑞

2022, 39(4):  28-32.  DOI: 10. 3969 / j. issn. 1006-6179. 2022. 04. 006

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目的 建立鸽圆环病毒 ( PiCV) TaqMan 探针荧光定量 PCR 方法并对其进行 初 步 应 用。 方 法 通 过 比 对 NCBI 发表的 PiCV 各分离株序列,选取其 polymerase 基因保守序列设计引物探针,建立 PiCV 的荧光定量 PCR 方 法,对方法的特异性及敏感性进行验证;取浓度为 3. 48×10 5 和 3. 48×10 4 copies/ μL 的质粒标准品,每个浓度做 6 个 平行,重复检测 3 次,计算组内和组间变异系数,验证方法的重复性和稳定性;用该方法检测采自北京某养殖场的 鸽肝、脾、肺、法式囊样本各 40 份及鸽盲肠样本 36 份,以验证此方法在实际应用中的检测能力。 结果 建立的 PiCV 荧光定量 PCR 方法在 3. 48×10 7 ~ 3. 48× 10 1 copies/ μL 范围 Ct 值与质粒浓度呈线性关系,标准曲线 Slope 为 -3. 381,R 2 值为 1,扩增效率为 97. 61%。 可检测到的 PiCV 最低浓度为 34. 8 copies/ μL,与常规 PCR 法相比,检测 灵敏度高 2 个数量级;以猪圆环病毒 2 型、禽腺病毒 I 型及 III 型、禽白血病病毒、禽网状内皮组织增生性病毒为模 板均无扩增曲线;重复检测 3. 48×10 5 和 3. 48×10 4 copies/ μL 两个浓度的质粒标准品,组内变异系数小于 1. 63%,组 间变异系数小于 7. 23%。 用建立的荧光定量 PCR 方法检测鸽组织样本,肝、脾、肺、法式囊及盲肠阳性率分别为 97. 5%、100%、100%、100%、97. 2%,经卡方检验,各组织病毒含量无显著差异( P> 0. 05) 。 结论 建立的鸽圆环病 毒荧光定量 PCR 方法可有效检测鸽组织中的 PiCV,为实验鸽相关微生物标准的制定提供了技术支持和基础数据。

不饱和脂肪酸对肝癌移植瘤小鼠 P21、P53、P13K 及 PKB / Akt 蛋白表达的影响

朱喜春, 张永兴, 俞发荣

2022, 39(4):  33-38.  DOI: 10. 3969 / j. issn. 1006-6179. 2022. 04. 007

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目的 建立 SCID 小鼠肿瘤模型,为筛选新的抗肿瘤药物提供受试对象。 方法 将肝癌组织移植到重症联合 免疫缺陷( SCID)小鼠皮下,待移植瘤生长到 6 ~ 7 mm 时,50 只荷瘤 SCID 小鼠分为不饱和脂肪酸低、中、高剂量组 【50 mg / ( kg·d) 、100 / ( kg·d) 、200 mg / ( kg· d) 】 ,五氟尿嘧啶 ( 5 - FU) 组 【 100 mg / ( kg· d) 】 ,模型组 【 蒸馏水 2 mL / ( kg·d) 】 ,连续给药 21 d,剥取移植瘤测量其体质量和体积,比较肿瘤生长情况;用酶联免疫吸附法( ELISA) 检测瘤组织 P21、P53、P13K、PKB / Akt 蛋白表达水平。 结果 不饱和脂肪酸低、中、高剂量组和 5-FU 组肝癌移植 瘤质量或体积显著小于模型组(P<0. 01) ;肝癌移植瘤 P21 水平较模型组明显升高( P<0. 05,P<0. 01) ;P53、P13K、 PKB / Akt 水平较模型组明显降低(P<0. 05,P<0. 01) 。 结论 不饱和脂肪酸对肝癌移植瘤生长具有明显的抑制作 用。 其可能机制与上调移植瘤 P21 水平,下调 P53、P13K、PKB / Akt 水平,抑制 PI3K-Akt 信号传导通路活性有关。

姜黄素减轻小鼠癫痫发作

吴连连, 秦滢, 胡安康

2022, 39(4):  39-43.  DOI: 10. 3969 / j. issn. 1006-6179. 2022. 04. 008

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目的 探讨姜黄素对小鼠癫痫发作的作用及机制。 方法 C57 / BL6 雄性小鼠 60 只,随机分为 3 组:正常组、 癫痫模型组和姜黄素治疗组,每组 20 只。 观察记录每组小鼠癫痫发作 Racine 分级评分和癫痫发作的潜伏期。 免 疫荧光染色检测海马 CA3 区 GFAP 和 IBA-1 表达,蛋白免疫印迹(Western blot)检测海马 IL-1β、NLRP3、caspase1 的 表达水平。 结果 姜黄素治疗组小鼠癫痫发作 Racine 分级评分显著低于癫痫模型组( P< 0. 05) ,发作潜伏期显著 延长(P<0. 05) 。 与正常组相比,模型组海马 CA3 区 GFAP 和 IBA-1 的表达显著增加(P<0. 01) ,胶质细胞呈现明显 激活状态,IL-1β、NLRP3、caspase1 蛋白的相对表达量显著升高( P< 0. 01) ,与模型组相比,姜黄素组海马 CA3 区的 GFAP 和 IBA-1 阳性细胞数显著减少 ( P < 0. 05) ,海马 IL-1β、NLRP3、 caspase1 蛋白相对表达量也显著降 低 ( P < 0. 05) 。 结论 姜黄素可以减轻癫痫发作程度,这可能通过调节 NLRP3 / caspase1 通路抑制海马炎性反应来实现。

不同遗传背景小鼠输卵管移植效率的研究

杜淼, 陈芳华, 战大伟

2022, 39(4):  44-46.  DOI: 10. 3969 / j. issn. 1006-6179. 2022. 04. 009

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目的 选用不同遗传背景的小鼠,研究移植不同胚胎数量对产仔率的影响,旨在提高小鼠的移植 效 率。 方法 本研究主要采用输卵管移植技术将 2-细胞胚胎移植至假孕鼠体内,对妊娠母鼠的产仔数量进行统计分析。 结果 与封闭群相比,近交系的移植效率较低,平均产仔率为 37. 5%,封闭群则为 45%。 免疫缺陷动物对移植的胚 胎数量要求较高,每只小鼠单侧移植 11 ~ 15 枚细胞时的产仔率最高,为 63. 5%;不同类型小鼠的平均产仔率比较: C57BL / 6J(49. 8%) >KM(45. 8%) >ICR(44. 1%) >NOD-SCID( 35. 6%) >BAL B / c-nu( 29. 3%) 。 ICR、C57、NOD-SCID 三种小鼠移植胚胎数量在 11 ~ 15 枚时,产仔率最高;而 KM 小鼠移植胚胎数量在 16 ~ 30 枚时,产仔率最高;BALB / c-nu 小鼠移植胚胎数量≤10 枚时,产仔率最高。 结论 不同遗传背景的小鼠输卵管移植效率不同,相同遗传背景 小鼠移植产仔率随移植胚胎数量的不同而有所变化。

大鼠活体肺功能检测方法的建立及环境因素与 体质量对其的影响

王文迪, 孙琦, 杜会博, 赵振奥, 赵自刚, 牛春雨

2022, 39(4):  47-50.  DOI: 10. 3969 / j. issn. 1006-6179. 2022. 04. 010

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目的 建立一种稳定可靠、成功率高的大鼠活体肺功能检测方法。 方法 校准小动物活体肺功能检测系统 后,大鼠气管插管,检测肺功能各项指标,观察检测过程中外界环境变化、大鼠体质量改变对肺功能参数的影响。 结果 外界的气流变化、震动因素会影响压力传感器,引起波形波动;体质量较大的大鼠( 340 ~ 370) g 功能残气量 ( FRC) 、动态肺 顺 应 性 ( Cdyn) 、第 100 毫 秒 用 力 呼 气 容 积 ( FEV100) 、 用 力 肺 活 量 ( FVC) 、 最 大 呼 气 中 期 流 量 (MMEF)均显著高于体质量较小大鼠(280 ~ 300) g,体质量对吸气阻力( RI) 没有明显影响。 结论 成功建立了简 便可靠的大鼠活体肺功能检测方法;大鼠活体肺功能检测中要确保环境的稳定以及大鼠体质量的一致性。 

技术

实验兔胸腺取材及检测方法

方慧, 田岳凤

2022, 39(4):  51-54.  DOI: 10. 3969 / j. issn. 1006-6179. 2022. 04. 011

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目的 观察兔胸腺的发育退化过程及取材时的注意事项。 方法 取 8 只大耳白兔,随机分为空白组和免疫 抑制模型组,每组 4 只。 模型组以环磷酰胺制备免疫抑制模型,以 60 mg / kg 腹腔注射,连续 7 d。 造模结束后 20 d, 取胸腺组织进行 HE 染色。 结果 一般形态显示,胸腺多呈左、右双叶状,质地偏硬,与脂肪组织比更有韧性。 其中 空白组胸腺多呈淡粉色,环磷酰胺模型组胸腺多呈白色。 HE 结果显示,胸腺结构完整,皮髓界限清楚,皮质淋巴细 胞密集;免疫抑制模型组胸腺失去正常结构,皮髓界限不清,皮质淋巴细胞减少,周围脂肪组织增多。 结论 环磷 酰胺致免疫抑制模型会对机体胸腺组织形态结构产生不可逆破坏。

自制小钩在大鼠双侧卵巢切除术中的应用

张颖, 孙小勇, 张爱琳, 田枫

2022, 39(4):  55-58.  DOI: 10. 3969 / j. issn. 1006-6179. 2022. 04. 012

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目的 探索更高效的实验大鼠双侧卵巢摘除手术方法。 方法 普通卵巢摘除法是采用眼科镊将卵巢取出腹 腔后子宫角与卵巢双侧结扎,再利用眼科剪进行切除,最后用青霉素肌肉注射。 该方法有少量血液渗出,易发生腹 腔内感染。 为提高手术成功率,经过多次摸索,本实验自制了专用于探索及固定卵巢的工具,改双侧结扎为单侧结 扎,青霉素肌肉注射改为腹腔注射。 结果 对比实验显示,新方法更简单易操作,手术过程中不易出血,术后不易 感染,手术成功率更高。 结论 新实验方法操作更简单,术后成功率更高。 

综述

慢性昼夜节律紊乱实验动物造模及其致病机制研究进展

刘薇薇, 于洋, 闻德亮

2022, 39(4):  59-63.  DOI: 10. 3969 / j. issn. 1006-6179. 2022. 04. 013

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在现代生活方式下,人们受到轮班、光污染、睡眠不足和进餐时间不规律等因素的影响,引起内部时钟和环境 之间长期不同步,从而导致昼夜节律紊乱,当昼夜节律受到干扰或失调时,就会产生不利的健康后果,并增加癌症、 心血管疾病或代谢紊乱等患病风险。 近年来,通过核心基因敲除、化学诱导、物理和饮食干预等方法,建立了广泛 的昼夜节律紊乱动物模型,本文总结了常用的昼夜节律紊乱动物模型,并简要归纳了昼夜节律紊乱相关发病机制。

MPTP 致帕金森病动物模型的研究进展

吕海燕, 侯广玉, 朱梅

2022, 39(4):  64-68.  DOI: 10. 3969 / j. issn. 1006-6179. 2022. 04. 014

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帕金森病 ( PD) 是一种神经退行性疾病,主要表现为静止性震颤、肌强直、运动徐缓及姿势不稳等运动症状, 同时伴有精神和认知障碍、自主神经功能障碍等非运动症状。 PD 的主要特征是黑质多巴胺 ( DA) 能神经元变性 和死亡,其病理性标志是路易小体 ( LB) 形成。 人们建立了多种动物模型来研究 PD 的不同方面,疾病模型可以通 过基于神经毒素或基因的方法在非人类灵长类 (NHP) 、啮齿动物、斑马鱼、秀丽隐杆线虫和果蝇等动物中产生,制 备的模型都是 模 拟 PD 部 分 病 理 改 变, 有 其 各 自 的 优 势 和 局 限 性。 目 前, 1-甲 基-4-苯 基-1, 2, 3, 6-四 氢 吡 啶 (MPTP) 诱导的 PD 模型在医学领域的研究中应用越来越广泛。

单核苷酸多态性在近交系小鼠遗传检测方面的研究进展

尚艳姣, 周小军, 袁征, 邱业峰

2022, 39(4):  69-73.  DOI: 10. 3969 / j. issn. 1006-6179. 2022. 04. 015

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随着分子生物学技术的迅速发展,单核苷酸多态性( SNP ) 检测技术也得以不断的完善和发展。 SNP 作为第 三代遗传标记,已经成为小鼠遗传检测的重要手段。 SNP 检测是在 DNA 水平进行的检测,依赖于完整的基因组信 息注释。 本文概述了小鼠基因组学的发展,以及 SNP 在近交系小鼠遗传检测方面的研究进展。

药物诱导斑马鱼心力衰竭模型的研究进展

任哲郯, 谢雨瑶, 刘安琪

2022, 39(4):  74-78.  DOI: 10. 3969 / j. issn. 1006-6179. 2022. 04. 016

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本文介绍了各类药物诱导斑马鱼心力衰竭模型的方法。 因斑马鱼和哺乳动物心脏的相似性、基因操作的便 捷性和发育的快速易驯化等特点,斑马鱼已被证实可用于模拟人类心脏疾病。 文章叙述了斑马鱼作为人源化动物 模型在心力衰竭模型的优势和不足,讨论了利用不同药物构建斑马鱼模型来揭示心力衰竭和心脏重塑发生的具体 机制,归纳和总结得出斑马鱼模型将会有助于对人类心血管疾病的病理生理机制进行深入研究,为心力衰竭提供 新的预防和治疗思路。