当期目录

2019年 第36卷 第02期    刊出日期：2019-04-28

上一期    下一期

研究报告

长爪沙鼠CST3序列同源性分析及蛋白体外表达

王 妍，郭 萌，杜小燕，李长龙，路 静， 霍学云，吕建祎，刘 欣，陈振文

2019, 36(02):  1. 

摘要 ( )   PDF (24442KB) ( )  

相关文章 | 计量指标

目的 分析长爪沙鼠半胱氨酸蛋白酶抑制剂C (Cystatin C，CST3)cDNA序列同源性，并建立CST3蛋白原核表达体系，为长爪沙鼠CST3抗体制备和后续基因功能研究奠定基础。方法 对长爪沙鼠Cst3 cDNA序列进行克隆、同源性分析及密码子优化；将优化后序列酶切连接到pET28a载体，完成重组CST3蛋白表达载体构建；将该载体转化到感受态细胞中，通过异丙基硫代半乳糖苷(Isopropyl β-D-Thiogalactoside，IPTG)诱导实现CST3蛋白的原核表达，并用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹法(Western blotting)验证。结果 长爪沙鼠Cst3基因与人和小鼠Cst3基因的序列同源性较低。密码子优化后的长爪沙鼠Cst3表达序列插入到pET28a质粒中，获得了CST3蛋白表达载体。经1 mmol/L IPTG 37 ℃诱导12 h，可获得大量CST3蛋白。结论 成功地构建了长爪沙鼠CST3蛋白的体外表达体系。

帕金森病食蟹猴系统性模型构建与在体临床过程的动态评价研究

马任驰， 罗斌斌，岳 峰

2019, 36(02):  9. 

摘要 ( )   PDF (5809KB) ( )  

相关文章 | 计量指标

目的 应用行为学与分子影像学的方法在体动态评价帕金森病食蟹猴系统性模型的临床变化特征，为药物、干细胞等治疗的临床前研究提供稳定有效的PD灵长类动物模型。方法 7只10～15岁的健康食蟹猴连续静脉注射1-甲基-4-苯基-1，2，3，6-四氢吡啶(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine，MPTP)0.2 mg/kg体质量，诱导系统性PD模型，持续观察PD症状进展3个月，随后给予左旋多巴干预。应用PD评分量表评价动物的临床症状严重程度，用EthoVision动物运动轨迹跟踪系统分析随意运动距离、运动轨迹的变化，用正电子发射断层显像技术(Positron emission tomography，PET)分子显像剂18F-AV-133评估纹状体多巴胺能神经元的功能状态。结果 所有动物在给予MPTP注射14 d后出现了典型的包括震颤、肌僵直、运动迟缓等PD症状，1个月临床评分达到峰值(21.43±5.35)。随后PD症状趋于稳定，连续观察至2个月(18.43±3.87)、3个月(18.14±3.53)，与MPTP注射结束时(14.43±1.90)相比，临床评分均显著升高(P<0.05)。在3个月随意运动距离(809.77±401.15)cm较基线(8627.46±5751.04)cm显著降低(P<0.01)。18F-AV-133双侧纹状体平均特异性摄取率(Sur)在3个月时(0.16±0.03)较基线(1.66±0.58)显著降低(P<0.01)。在给予L-Dopa干预后可见PD症状显著改善，临床评分(12.86±3.63)较之模型期显著降低(P<0.05)，而随意运动距离则显著增加(P<0.05)。结论 本研究构建的PD食蟹猴系统性模型临床症状持续稳定，纹状体多巴胺能神经损害，对L-Dopa干预有效，全程无自发性恢复，更近似地在体动态模拟了PD的临床特征，以期为PD未来研究提供实验依据。

人参煎剂对实验红鲫经137Cs辐射后肝肾组织HSP70表达量的影响

李登科，彭赞平， 陈科洁，吴端生，王余德

2019, 36(02):  16. 

摘要 ( )   PDF (3024KB) ( )  

相关文章 | 计量指标

目的 研究137Cs辐射对实验红鲫肝肾组织HSP70表达的影响，并探讨人参煎剂对实验红鲫的辐射防护效应。方法 将实验红鲫随机分为8组，即空白对照组、人参对照组、4.1Gy辐照组、4.1Gy人参预防组、4.1Gy人参治疗组、8.2Gy辐照组、8.2Gy人参预防组及8.2Gy人参治疗组。分别以137Cs辐照处理，或辐照处理前以人参煎剂浸浴7 d做预防处理，或辐照处理后以人参煎剂浸浴7 d做治疗处理，然后分别采集实验红鲫肝脏和肾脏组织，利用Western blot方法检测各组HSP70表达量。结果 与空白对照组相比，经4.1Gy或8.2Gy辐照处理后的HSP70蛋白表达量均增加；与辐照组相比，经人参煎剂预防或治疗处理后的HSP70表达量均下降；单独的人参煎剂处理，对HSP70蛋白表达量无明显影响；比较人参煎剂做预防与治疗处理，发现两者之间的HSP70蛋白表达量差异不明显。结论 137Cs辐射能够引起实验红鲫肝脏和肾脏的HSP70表达量升高，再经人参煎剂预防或治疗处理后的HSP70表达量均下降。

建立小鼠学习记忆损伤模型的方法学研究

童 庆，吴晓军，张盼红，艾 彩， 唐子涵 ，张景瑜 ，徐 雅， 赵 勤

2019, 36(02):  21. 

摘要 ( )   PDF (3045KB) ( )  

相关文章 | 计量指标

目的 通过避暗和Morris水迷宫实验研究建立小鼠学习记忆损伤模型的有效方法。方法 分别在小鼠避暗电击训练之前20 min腹腔注射东莨菪碱1 mg/kg体质量，电击训练结束之后立即皮下注射亚硝酸钠90 mg/kg和下次电击测试之前15 min给小鼠灌服35%乙醇0.1 mL/10 g，建立记忆获得、记忆巩固和记忆再现障碍模型，测定各组小鼠在电击训练后6 h、24 h、30 h、48 h后的避暗潜伏期、错误次数和探头次数等多项指标，评价三种记忆障碍模型方法各指标的敏感性和最适测试时间。小鼠分别腹腔注射东莨菪碱1 mg/kg和灌服35%乙醇0.1 mL/10 g造成学习记忆损伤，通过Morris水迷宫定位航行试验和空间探索试验用于测试实验动物对空间位置感和方向感(空间定位)的学习记忆能力，建立空间学习记忆障碍小鼠模型的评价方法。结果 避暗实验显示：和空白组比较，东莨菪碱造成记忆获得障碍模型小鼠在电击训练之后6 h、24 h避暗潜伏期明显缩短，错误次数也明显增多(P0.05)。结论 避暗实验中使用东莨菪碱、亚硝酸钠构建小鼠记忆获得障碍和记忆巩固模型时应在造模后24 h和30 h检测相应指标；乙醇造成的记忆再现障碍模型，应在电击训练24 h后，在下次测试之前15 min给小鼠灌服乙醇后检测，指标以避暗潜伏期、错误次数和探头次数为宜。Morris水迷宫实验提示东莨菪碱能够损害小鼠空间学习记忆，可以作为构建小鼠空间学习记忆障碍模型的药物，乙醇并不能建立小鼠的空间记忆障碍模型。

菌群感应AHLs分子对小鼠肠道菌群多样性影响的分析

付凯飞，李 军，王欲晓，吴成林， 钦可为， 周丽君

2019, 36(02):  27. 

摘要 ( )   PDF (5550KB) ( )  

相关文章 | 计量指标

目的 探讨菌群感应信号分子N-酰基高丝氨酸内酯(N-acyl homoserine lactones，AHLs)对小鼠肠道微生物菌群构成的影响，为感染状态下肠道微生态的紊乱补充理论依据。方法 3-oxo-C10-HSL分子经腹腔注射小鼠后，于24 h分别在小鼠十二指肠及空回肠部位用拭子涂抹法取样，并通过Illumina Hiseq 2500高通量测序平台对样品16S rDNA测序，并进行微生物菌群分类构成及多样性分析。结果 在实验小鼠肠道内共检出22个细菌门，109个细菌属；对照组和3-oxo-C10-HSL处理组小鼠肠道不同部位菌群均以厚壁菌门(>50%)和变形菌门(>20%)为主，但两组在属水平菌群构成有明显差异，对照组优势菌属依次为葡萄球菌、埃希氏-志贺菌、乳球菌、假单胞菌、肠球菌，3-oxo-C10-HSL处理组优势菌属主要为肠球菌、埃希氏-志贺菌、葡萄球菌；多样性和丰度分析提示3-oxo-C10-HSL处理组肠道菌群多样性均有提高，大肠埃希菌属等主要优势菌丰度显著上升，而且空回肠部位的菌落丰度最高。结论 AHLs对小鼠肠道菌群构成影响较小，而对菌群内部某些特定类群结构变化影响较明显。

猴T淋巴细胞趋向性病毒1型RPA和荧光RPA检测方法的建立

熊炜， 林颖峥， 魏晓锋， 陈鸿军， 张强， 王艳， 李健

2019, 36(02):  33. 

摘要 ( )   PDF (6518KB) ( )  

相关文章 | 计量指标

目的 为了提高口岸对进出境野生及实验用灵长类动物猴T淋巴细胞趋向性病毒l型(Simian T-cell lymphotropic virus type 1,STLV-1)感染情况的监测和流行病学调查,本研究建立了重组酶聚合酶扩增(RPA)和荧光RPA检测STLV-1的方法.方法 使用软件分析不同国家和地区分离的STLV-1的gag蛋白(gag polyprotein)基因序列,设计RPA引物和探针,建立RPA和荧光RPA检测STLV-1的方法,并对方法的特异性、敏感性和稳定性进行验证.结果 通过将猴其它特定病原体与STLV-1对比检测,证实建立的检测方法 具有良好的特异性;通过敏感性试验,证实建立的RPA和荧光RPA方法检测下限与PCR一致;通过对30份STLV-1阳性和阴性核酸样本的检测,证实建立的RPA和荧光RPA方法,具有PCR方法一样的稳定性和可靠性.结论 本研究建立的RPA和荧光RPA检测STLV-1的方法具有良好的特异性、敏感性和可靠性,可应用于STLV-1的监测和流行病学调查.

不同浓度茶多酚服用对小鼠肠道菌群的影响研究

于子婷

2019, 36(02):  38. 

摘要 ( )   PDF (6518KB) ( )  

相关文章 | 计量指标

目的 研究不同浓度的茶多酚对小鼠肠道菌群的影响。方法 选取24只C57BL/6小鼠，随机分为4组，对照组(CK，不添加茶多酚)、低剂量茶多酚组(LTP，饮水中添加0.4 g/L GTP)、中剂量茶多酚组(MTP，饮水中添加0.8 g/L GTP)、高剂量茶多酚组(TP，饮水中添加1.6 g/L GTP)，4组均给予常规饲料，茶多酚饮水每天更换一次，连续14 d。经MiSeq 测序和生物信息学分析小鼠肠道微生物多样性。结果 高浓度茶多酚摄入可增加肠道菌群的多样性，中剂量组和高剂量组中乳酸杆菌的含量明显高于低剂量和对照组(p值=0.038)，茶多酚对乳杆菌的增殖效果最为明显并且呈剂量依赖性。结论 茶多酚具有可以增加肠道微生物的多样性，增加益生菌的比例及改变菌群组成的功能。

异丙肾上腺素诱发大鼠特异性心肌缺血所引起心肌细胞病理组织的变化

李 想， 向绍杰， 赵 磊， 关敬之， 齐 越， 孟 莉，丁春晓， 乔菊久， 甘 雨，刘小虎

2019, 36(02):  42. 

摘要 ( )   PDF (9723KB) ( )  

相关文章 | 计量指标

目的 观察皮下注射不同天数异丙肾上腺素(1 mg/kg体质量)诱发大鼠特异性心肌病所引起心肌组织切片HE染色、VEGF(血管内皮生长因子)、FGF(成纤维细胞生长因子)表达及心电图T波的变化。方法 除空白组外各组大鼠皮下多点注射异丙肾上腺素(1 mg/kg)，分别为连续皮下多点注射异丙肾上腺素(1 mg/kg)2 d组、连续皮下多点注射异丙肾上腺素(1 mg/kg)4 d组、连续皮下多点注射异丙肾上腺素(1 mg/kg)6 d组。给药1周后，大鼠麻醉，测心电图，取心脏，采用HE染色观察大鼠心肌细胞损伤程度的变化，采用免疫组化技术染色观察心肌组织切片VEGF(血管内皮生长因子)、FGF(成纤维细胞生长因子)表达的变化。结果 与空白对照组相比连续皮下多点注射异丙肾上腺素(1 mg/kg)6 d组HE染色组织切片镜下观察具有明显差异，同时随着造模时间的延长模型组心肌组织切片VEGF(血管内皮生长因子)、FGF(成纤维细胞生长因子)表达情况与空白对照组比也存在显著性差异。结论 本研究结果表明与空白对照组相比连续皮下多点注射异丙肾上腺素(1 mg/kg)6 d组模型大鼠特异性心肌病所引起的心肌组织切片HE染色、VEGF(血管内皮生长因子)、FGF(成纤维细胞生长因子)表达及心电图T波的变化具有显著性差异，因此大鼠连续皮下多点注射异丙肾上腺素(1 mg/kg)6 d可以作为特异性心肌病药效评价的实验动物模型使用。

不同周龄、性别、环境下SD大鼠自发病变的病理学研究

李恒华,施汀兰,王天文,罗金萍,张 莉,黄文涛

2019, 36(02):  55. 

摘要 ( )   PDF (1370KB) ( )  

相关文章 | 计量指标

目的 观察不同环境下、不同周龄、不同性别SD大鼠的自发性病变发病情况，为药物安全性研究的病理学评价提供背景资料。方法 采用本中心安评试验中空白对照组SD大鼠，雌雄兼用，分别饲养于屏障系统和普通环境中，分别在19、23、32、36周龄等时间点处死解剖，常规制作病理切片，光学显微镜下观察主要组织器官的病理改变,统计动物自发性病变的类型和发病率。结果 与屏障系统相比较，普通环境大鼠呼吸系统的自发病变发生率明显升高；此外，在屏障环境和普通环境饲养条件下，SD大鼠自发病变发生率均随周龄增长而有增加的趋势；同时，少数病变均呈现较为明显的性别差异，其中以进行性心肌病和肾脏矿物质沉着最为明显。病理组织学检查可见进行性心肌病、肝脏灶性炎细胞浸润、肝细胞空泡变性、自发变异肝细胞灶、肺脏灶性炎细胞浸润、肺泡内泡沫细胞聚集、肾脏矿物质沉着、肾间质炎细胞浸润、胰腺萎缩、气管炎细胞浸润、前列腺间质炎症、睾丸曲细精管萎缩、曲细精管生精上皮细胞脱落、子宫内膜炎症和阴道炎症等主要自发性病变。结论 本文报告的SPF级SD大鼠的各种自发性病变的种类及其发生率丰富了实验动物的背景数据资料，可为相关技术人员提供参考。

静脉注射环磷酰胺对新西兰兔胚胎和胎仔的发育毒性研究

龚英菲，曾现欢，赵维俊，左俊涛，朱钟凯，王湛博，刘 伟，王 昀，杨 勇

2019, 36(02):  58. 

摘要 ( )   PDF (1387KB) ( )  

相关文章 | 计量指标

目的 孕兔静脉给予环磷酰胺，以观察其对孕兔胚胎及胎仔的毒性作用及表现，为选择环磷酰胺作为阳性对照提供使用参考。方法 将孕兔随机分为对照组[0.9%氯化钠注射液，GD11(GD,妊娠日)，i.v]和环磷酰胺组(环磷酰胺30 mg/kg体质量，GD11，i.v)。GD28对孕兔实施安乐死，剖宫取胎仔，检查胎仔外观、内脏和骨骼。结果 环磷酰胺组对兔生殖功能及胚胎形成无明显影响，可引起外观、内脏和骨骼畸变。胎仔外观腭裂畸形率为32.95%；内脏变异率为10.23%；骨骼畸形率为23.37%。结论 新西兰兔GD11静脉给予环磷酰胺30 mg·kg-1可引起胎仔畸形，畸形种类和比例适当，可用于生殖试验阳性对照。

注射用促肝细胞生长素中组胺类物质检查和降压物质检查的比较研究

吴贤生，黄甘泉， 杨嘉俊 ，王凤姬， 严家荣， 钟志勇， 邝少松

2019, 36(02):  63. 

摘要 ( )   PDF (4228KB) ( )  

相关文章 | 计量指标

目的 探讨注射用促肝细胞生长素安全性检查中，以组胺类物质检查法替代降压物质检查法的可能性。方法 按照《中国药典》2015年版中降压物质检查和组胺类物质检查方法的规定，分别对3批注射用促肝细胞生长素进行降压物质检查和组胺类物质检查，比较两种检查方法结果的异同。结果 1.根据药典相关判定标准，3批注射用促肝细胞生长素降压物质检查和组胺类物质检查结果一致，均符合规定。2. 降压物质检查中3批注射用促肝细胞生长素均引起猫血压明显下降，结果呈阳性；3批供试品均未引起豚鼠离体回肠收缩，结果呈阴性。结论 注射用促肝细胞生长素在组胺类物质含量符合要求时也可能引起动物血压明显下降，体外实验结果不能简单扩推至体内实验。

研究简报

实验动物磁共振成像系统的激光定位仪的制作与应用

王战京，雷建锋 ，赵媛媛， 薛 冰

2019, 36(02):  69. 

摘要 ( )   PDF (2092KB) ( )  

相关文章 | 计量指标

目的 设计研制简易大鼠与小鼠激光定位仪，为医学核磁共振实验提供安全，方便，准确，价格低廉，便于操作的实验工具。方法 选用有机玻璃板以及激光定位仪组合拼装制成小动物激光定位仪。结果 该小鼠激光定位仪与其他类似产品比较，具有制作简单，安全，基本满足实验要求，价格低廉等优点。结论 小动物激光定位仪对小动物核磁检查起到了积极的作用，极大地缩短了实验时间与提高了试验动物摆放位置的精度，为下一步对实验动物进行核磁扫描提供了有力保障。

研究报告

实验动物仁慈终点及安乐死的法规现状与思考

史光华，李麟辉， 吕龙宝， 张晓迪， 陈佳琦

2019, 36(02):  72. 

摘要 ( )   PDF (1385KB) ( )  

相关文章 | 计量指标

仁慈终点及安乐死作为3R准则中“优化”原则的重要组成部分，国际上已形成了完善的法律法规体系，我国还需要在相关法规、标准方面进一步完善。本文通过介绍国外有关人道终点及安乐死的主要指南、法规，为我国有关工作的开展提供借鉴。

一种快速取大鼠膝关节滑膜的方法

邓 超，孔立红

2019, 36(02):  76. 

摘要 ( )   PDF (3766KB) ( )  

相关文章 | 计量指标

目的 建立一种较传统方法更为快速可行地获取大鼠膝关节滑膜组织的方法。方法 通过查阅文献了解取大鼠膝关节滑膜组织传统方法，并查阅大量大鼠膝关节解剖图谱，在实验中随机将60只造模成功的佐剂性关节炎实验大鼠分成两个小组。30只大鼠采用传统方法取大鼠膝关节滑膜组织，另外30只大鼠采用新方法取大鼠膝关节滑膜组织。结果 传统方法30只大鼠中23只取出较为完整的滑膜组织。新方法30只大鼠全部完整取出膝关节滑膜组织；传统方法平均取一只大鼠单侧膝关节滑膜组织耗时为(15.26±3.41)min，新方法平均每只耗时(10.12±2.34)min，两者比较有显著差异(P<0.01)。结论 新方法较传统方法能更为快速可行地取出大鼠膝关节滑膜组织。

研究进展

小型猪近交系鉴定研究进展

冯书堂， 牟玉莲，王太平，庄爱萍

2019, 36(02):  78. 

摘要 ( )   PDF (2743KB) ( )  

相关文章 | 计量指标

本文综述了国内外小型猪近交系鉴定方法的研究进展，包括：异体皮肤移植鉴定、基因组水平鉴定、生理生化标记、同工酶蛋白质鉴定、DNA遗传标记、SNP分析等分子遗传学的方法。综合分析，异体皮肤移植技术是大型哺乳动物近交系最佳鉴定方法。该技术将为我国创新资源近交系猪培育和开发利用奠定科学基础，为大型哺乳动物近交系鉴定提供科学的检测技术和方法，并使我国大型哺乳动物近交系研究处于国际领先地位。

研究报告

浅析面瘫动物模型的制备与比较

李小娟，赵中亭，曹朝霞，魏玉婷， 严兴科

2019, 36(02):  83. 

摘要 ( )   PDF (1458KB) ( )  

相关文章 | 计量指标

目的 对面瘫动物不同模型相关文献进行检索，分析各种模型制备方法的优缺点，探寻适合不同研究类型模型的制备方法，从而为面瘫动物模型的制备提供实验依据。方法 检索近十年来面瘫动物模型制备的相关文献，对各种实验动物及造模方法进行归纳总结。结果 目前面瘫模型制备使用较多的动物有大鼠、小鼠、日本大耳白兔等，造模方法有面神经切断法、压榨法、牵拉法等。结论 目前面瘫模型的制备方法较多，各有优缺点，根据研究目的不同选择不同的造模方法，才能给针灸治疗面瘫提供科学依据。