实验动物科学 ›› 2022, Vol. 39 ›› Issue (3): 33-39.DOI: 10. 3969 / j. issn. 1006-6179. 2022. 03. 007
摘要: 目的 通过对国际实验动物科学理事会( the International Council for Laboratory Animal Science,ICLAS)能力验证计划( Performance Evaluation Program,PEP)提供的 4 份病毒盲样进行检测,从而对实验室病毒检测能力进行验证,进一步提高实验室的病毒检测水平。 方法 对 ICLAS 提供的盲样信息进行分析,提取核酸进行 PCR 检测并对阳性产物进行测序验证。 对诺如病毒阴性盲肠内容物进行不同倍数的稀释后,与诺如病毒培养液 1 ∶ 1 混合,使用两种不同的核酸提取试剂盒进行核酸提取,通过荧光定量 PCR 方法进行诺如病毒核酸检测,比较检测的核酸拷贝数。 结果 经过检测确定 ICLAS 提供的盲样分别为小鼠脑脊髓炎病毒、小鼠诺如病毒、小鼠轮状病毒以及小鼠乳酸脱氢酶增高症病毒。 比较不同稀释度的盲肠内容物诺如病毒荧光定量 PCR 检测结果发现,使用病毒 DNA / RNA提取试剂盒提取核酸,稀释度不高于 1 ∶ 16 时,检测结果相比于病毒对照出现不同程度的偏差,稀释度为 1 ∶ 32 时检测结果与病毒对照检测结果相近。 使用病毒 RNA 提取试剂盒提取核酸,稀释度不低于 1 ∶ 8 时,检测结果与病毒对照相近。 结论 通过国际比对能力验证,说明本实验室病毒检测能力可靠,且经过污染实验研究,粪便样本1 ∶ 8 稀释后使用病毒 RNA 提取试剂盒提取核酸为粪便中诺如病毒检测的最佳预处理方法。
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