RELM-β 基因敲除大鼠的繁育及基因型鉴定

doi:10. 3969 / j. issn. 1006-6179. 2023. 03. 003

实验动物科学 ›› 2023, Vol. 40 ›› Issue (3): 12-17.DOI: 10. 3969 / j. issn. 1006-6179. 2023. 03. 003

RELM-β 基因敲除大鼠的繁育及基因型鉴定

( 1. 湖南中医药大学医学院呼吸疾病研究室,长沙 410208) ( 2. 血管生物学与转化医学湖南省高校重点实验,长沙 410208)( 3. 湖南中医药大学第一附属医院呼吸内科,长沙 410021) ( 4. 湖南中医药大学第一附属医院医学创新实验中心,长沙 410021)

收稿日期:2022-11-15 出版日期:2023-06-28 发布日期:2023-07-05
通讯作者: 戴爱国( 1966—) ,男,教授,主任医师,研究方向:呼吸内科. E-mail:daiaiguo@ 126. com
作者简介:陈惠莲( 1996—)女,硕士研究生,研究方向:呼吸内科. E-mail:chen819932106@ qq. com
基金资助:
湖南省自然科学基金 ( 2021JJ30017) ;中国博士后科学基金面上项目 ( 2021M690982 ) ; 湖南省中医药科研计划重点项目(C2022001) ;湖南省教育厅重点项目( 21A0226) ;湖南中医药大学院士工作站指导项目( 21YS004)

Breeding and Genotype Identification of RELM-β Gene Knockout Rats

( 1. Department of Respiratory Diseases, Medical School, Hunan University of Chinese Medicine, Changsha 410208, China)( 2. Hunan Provincial Key Laboratory of Vascular Biology and Translational Medicine, Changsha 410208, China)( 3. Department of Respiratory Medicine, the First Affiliated Hospital, Hunan University of Chinese Medicine, Changsha 410021, China)(4. Medical Innovation Experimental Center, the First Affiliated Hospital of Hunan University of Chinese Medicine, Changsha 410021, China)

Received:2022-11-15 Online:2023-06-28 Published:2023-07-05

摘要/Abstract

摘要： 目的探讨抵抗素样分子 β(RELM-β)基因敲除大鼠的最优繁育方式和基因型鉴定方法。方法将 RELMβ- / -纯合子雌性 Sprague Dawley( SD)大鼠和野生型雄性 Wild type( WT) SD 大鼠按 2 ∶ 1 交配,繁育出 F1 杂合子大鼠,采用 RELM-β- / -纯合子互交、RELM-β+ / -杂合子互交、纯合子及杂合子互交( 正交及反交) 4 种方式交配,PCR 扩增凝胶电泳法鉴定子代大鼠基因型,观察子代大鼠的外形,统计子代大鼠数量、体质量及纯合率。结果 PCR 扩增凝胶电泳法成功鉴定亲代及子代大鼠的基因型,3 种基因型大鼠的外观形态无明显差异,3 周至 6 周龄大鼠体质量无明显差异,不同交配方式子代数量无明显差异。结论合理的繁殖方法并进行正确的鉴定是获得 RELM-β 基因敲除 SD 大鼠的重要途径,PCR 扩增凝胶电泳法具有快速、经济,重复性较好的优点。

关键词: 基因敲除, 抵抗素样分子 β, 基因型鉴定, 繁育方法

Abstract: Objective To investigate the optimal breeding method and genotype identification method of RELM-β gene knockout rats. Method The RELM-β - / - homozygous female Sprague Dawley ( SD) rats and wild-type male Wild type (WT) SD rats were mated according to 2 ∶ 1 to produce F1 heterozygous rats. Four mating method, RELM-β - / - homozygous cross, RELM-β + / - heterozygous cross, homozygous and heterozygous cross ( orthogonal and reverse cross) , were used to identify the genotype of offspring rats by PCR amplification gel electrophoresis. The appearance of the offspring rats was observed, and the number, weight and homozygous rate of the offspring rats were calculated. Result The genotypes of the parents and offspring rats were successfully identified by PCR amplification gel electrophoresis. There was no significant difference in the appearance and morphology of the three genotypes of rats, no significant difference in the body weight of the rats aged from 3 weeks to 6 weeks, and no significant difference in the number of offspring of different mating method. Conclusion Correct reproduction and identification is an important way to obtain RELM-β gene knockout rats. PCR amplification gel electrophoresis is rapid, economical and reproducible in identifying rat genotypes.

Key words: gene knockout, resistin like molecule-β, genotypic identification, breeding methods

中图分类号:

Q95-3

陈惠莲, 周灵灵, 谢思琳, 张超, 谭骏岚, 王飞英, 易健, 戴爱国. RELM-β 基因敲除大鼠的繁育及基因型鉴定[J]. 实验动物科学, 2023, 40(3): 12-17.

CHEN Huilian, ZHOU Lingling, XIE Silin , ZHANG Chao , TAN Junlan , WANG Feiying , YI Jian, DAI Aiguo. Breeding and Genotype Identification of RELM-β Gene Knockout Rats[J]. Laboratory Animal Science, 2023, 40(3): 12-17.

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RELM-β 基因敲除大鼠的繁育及基因型鉴定

Breeding and Genotype Identification of RELM-β Gene Knockout Rats

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