实验动物科学 ›› 2023, Vol. 40 ›› Issue (6): 19-25.DOI: 10. 3969 / j. issn. 1006-6179. 2023. 06. 004
摘要: 目的 探究 miR-494 在骨质疏松大鼠中的表达及其调控机制。 方法 选取 30 只 8 周龄雌性 Sprague-Dawley大鼠,构建骨质疏松大鼠模型。 双能 X 线吸收仪测定骨密度。 ELISA 检测大鼠血清中骨钙素( BGP) 和总碱性磷酸酶( TALP)含量。 分类培养大鼠骨髓间充质干细胞 ( BMSCs) 。 qRT-PCR 检测 miR-494 和 TLR4 mRNA 的表达。Western blot 检测 TLR4 蛋白的表达。 双荧光素酶报告基因验证 miR-494 与 TLR-4 的靶向关系。 CCK8 实验检测各组 BMSCs 的增殖能力。 茜素红 S 染色检测各组 BMSCs 成骨分化情况。 油红 O 染色检测各组 BMSCs 成脂分化情况。 结果 和 NC 组相比,OP 组大鼠骨密度、BGP 含量、细胞增殖能力、矿化结节数均显著降低,TALP 含量miR494 和 TLR4 的表达、脂肪细胞数均显著升高( P< 0. 05) 。 和 OP 组相比,OP +miR-494 inhibitor 组大鼠骨密度、BGP含量、细胞增殖能力、矿化结节数均显著升高,TALP 含量、miR-494 和 TLR4 的表达、脂肪细胞数均显著降低( P <0. 05) 。 和 OP+miR-494 inhibitor 组相比,OP+miR-494 inhibitor+TLR-4 vector 组大鼠骨密度、BGP 含量、细胞增殖能力、矿化结节数均显著降低,TALP 含量、miR-494 和 TLR4 的表达、脂肪细胞数均显著升高;OP+miR-494 inhibitor+shTLR-4 组大鼠骨密度、BGP 含量、细胞增殖能力、矿化结节数均显著升高,TALP 含量、miR-494 和 TLR4 的表达、脂肪细胞数均显著降低(P<0. 05) 。 结论 miR-494 通过促进 TLR-4 通路的表达,加快大鼠骨质疏松的进展,为骨质疏松的发病机制提供新的理论依据。
中图分类号: